枸杞多糖的分离、纯化、分析及免疫作用的研究

枸杞子经热水提取，用蛋白酶法和Ｓｅｖａｇ法除蛋白，透析纯化得到枸杞多糖（Ｉｖｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＢＰ）．经ＵＶ扫描，ＬＢＰ未见核酸（２６０ｎｍ）和蛋白质（２８０ｎｍ）特征吸收峰，ＰＡＧＥ电泳和Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测蛋白质含量，仅测到微量蛋白质及低于５ｍｇ／ｇ糖，红外分析显示有典型多糖吸收峰，对其活性作了分析，结果表明本室所提取的ＬＢＰ具有明显增强ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用，并对Ｓ－１８０荷瘤小鼠具明显的免疫抑瘤作用。

LBP_2对大鼠免疫功能影响的体外实验研究

研究了ＬＢＰ２（ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－２）对ＳＤ大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）功能的影响，以探讨ＬＢＰ２的免疫调节机制．ＭΦ吞噬中性红试验研究表明，ＬＢＰ２在体外具有浓度（０３２～２０ｍｇ／Ｌ）依赖性增强大鼠腹腔ＭΦ吞噬中性红的能力．另外，采用生物活性检测法测定了细胞因子的水平，将大鼠ＭΦ用ＬＰＳ（１０ｍｇ／Ｌ）和ＬＢＰ２共同孵育１８～２４ｈ后，培养上清及细胞内ＩＬ－１和ＴＮＦ水平均随ＬＢＰ２浓度的增加而增加，表明ＬＢＰ２对ＭΦ合成和释放ＩＬ－１，ＴＮＦ具有明显促进作用．ＬＢＰ２对ＭΦ功能的影响可能是其免疫调节作用的机制之一．

枸杞多糖的分离、纯化、鉴定及生物活性的研究

构杞子经热水提取,乙醇沉淀,获得构杞粗多糖。后者经 Sevag 法、蛋白酶法和透析纯化得到枸杞多糖(LBP)。LBP 进一步经 Sephadex G-50分子筛层析分离,可分为LBP_1(分子量>10000)和 LBP_2(分子量<10000)两种成分。LBP_1和 LBP_2用 DEAE-DE32离子交换层析去除色素,PAGE 电泳和 Brandford 法测蛋白质含量仅测到微量蛋白质(<5μg 蛋白/mg 糖)。经岛津 UV-260扫描,LBP、LBP_1、LBP_2未见核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰,红外光谱分析表明有典型多糖吸收峰。分子量测定 LBP_1、LBP_2分别为35400、9900。体内外试验证明 LBP、BLP_1和 LBP_2对小鼠脾脏 T 淋巴细胞的功能呈双相调节,可明显促进 ConA 诱导的淋巴细胞增殖反应。抗体形成细胞试验显示 LBP_2还可明显增强小鼠体液免疫功能;并具抗辐射损伤作用,能明显延长 BALB/C 小鼠的生存期。

LBP_2对束缚应激小鼠免疫功能的影响

研究了ＬＢＰ＿２对束缚应激小鼠免疫功能的影响．小鼠在束缚应激作用１５ｈ后，脾脏和胸腺细胞对ＣｏｎＡ的增殖力、ＱＨＳ，ＤＴＨ反应和ＩＬ－２产生均明显受到抑制．应激前ＬＢＰ＿２５ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）ｉｐ，连续７ｄ，束缚应激ＬＢＰ＿２组小鼠以上功能均较束缚应激对照明显增强，已接近正常．研究结果表明，ＬＢＰ＿２对束缚应激所致的免疫功能低下有明显的调节和保护作用．

枸杞多糖的免疫调研究进展

枸杞多糖（ｌｙｃｉｕｍｂａｒａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＢＰ）是枸杞子的主要活性成分，其药理作用甚广，尤其对免疫功能具有极重要的调节作用。ＬＢＰ能明显调节Ｔ、Ｂ、ＣＴＬ、ＮＫ和ＭΦ等细胞的功能。对ＩＬ－２和ＩＬ－３具有双向调节作用；并促进ＩＬ－２Ｒ的表达，诱导ＩＬ－６、ＴＮＦ的产生。在肿瘤免疫和神经内分泌免疫调节网络中具有免疫增强功能。

大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的鉴定

根据小鼠胸腺冰冻切片免疫组织化学染色,将已获得的30种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体分为8组:1.髓质胸腺基质细胞(TSC)阳性,皮质TSC阴性;12.髓质部分TSC阳性,皮质TSC阴性;3.皮、髓交界部分TSC阳性;4.皮、髓质部分TSC阳性;5.髓质TSC阳性,皮质部分TSC阳性,6.皮、髓质大部分TSC阳性;7.被膜和血管内皮细胞呈阳性;8.髓质TSC和皮质胸腺细胞为阳性。用这8组单抗对本室建立的5株小鼠胸腺基质细胞系进行免疫荧光染色,发现它们与各细胞系的反应各不相同。对这些单抗的鉴定不仅有利于鉴别TSC亚群,并且为研究T细胞与基质细胞的相互作用提供了新的抗体。

小檗胺对小鼠迟发型超敏反应的影响

本文研究了小檗胺对小鼠由绵羊红细胞，二硝基氯苯及同种异型脾细胞所诱导的迟发型超敏反应的影响。实验结果显示小檗胺能明显抑制小鼠的迟发型超敏反应，表明小檗胺可能对小鼠的细胞免疫功能具有抑制作用。

枸杞多糖2对辐射损伤小鼠免疫功能恢复的影响

从枸杞子中提取的枸杞多糖（ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＢＰ）有较好的免疫增强作用，可促进Ｔ、Ｂ淋巴细胞的功能，增强机体免疫监视功能以及降低抗肿瘤化疗药物引起的免疫抑制等作用。本文研究了ＬＢＰ２对辐射损伤小鼠免疫功能恢复的影响，ＬＢＰ２能明显促进辐射损伤小鼠免疫功能的恢复，照射后３０ｄ，胸腺指数、脾细胞对ＣｏｎＡ、ＬＰＳ的增殖反应、ＭＬＲ、ＤＴＨ及ＰＦＣ均较照射对照组明显增强。

小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体PF18-3的特性研究

用免疫组织化学及流式细胞计(FACS)对抗小鼠胸腺基质细胞(Thymic stromal cells,TSC)的单克隆抗体PF18-3进行了系统研究。免疫组织化学结果:PF18-3与小鼠胸腺髓质TSC和皮质胸腺细胞呈阳性反应;FACS分析显示,在活细胞染色时,PF18-3不能与膜表面分子结合,经甲醛固定丙酮增加细胞膜通透性后才能使各免疫细胞亚群呈阳性反应,固定后细胞染色结果为:胸腺细胞中,PF18-3^+细胞为84.4％;在分离的CD4^-8^-、CD4^+8^-、CD4^-8^+胸腺细胞中,PF18-3^+细胞分别为2％,69.3％,62％;在脾、颌下淋巴结、外周血淋巴细胞中,PF18-3^+细胞分别为37.9％,51.5％,26.7％;PF18-3^+CD3^+双阳性细胞在总T淋巴细胞中分别占54.6％,59.8％,20.2％;PF18-3^+B220^+细胞在总B细胞中分别占35.1％,38.1％,37.6％;PF18-3对大部分巨噬细胞(71.6％)和极少数粒细胞(6.1％)也呈阳性反应。以上结果说明PF18-3识别的抗原主要分布于胸腺基质细胞膜表面和胸腺及外周免疫细胞的胞浆。提示它可能介导了TSC诱导的T细胞发育;可能也参与了免疫反应中不同种类细胞间的相互作用。

白细胞介素－1受体拮抗剂对小鼠油酸型肺损伤的保护作用

３６只小鼠分为对照组、油酸肺损伤组及白细胞介素－１受体桔抗剂（ＩＬ－１ｒａ）保护组，每组１２只。油酸由小鼠尾静脉注入，保护组注入上述拮抗剂后再给予油酸。结果表明，保护组肺系数、肺湿／干重比值较低，支气管肺泡灌洗液总蛋白量较少，ＰａＯ＿２较高，肺组织学改变（肺泡水肿、肺泡出血、肺坏死、炎症细胞浸润）明显减轻。认为该拮抗剂对油酸型肺损伤有保护作用，从而为其在成人型呼吸窘迫综合征中的临床应用提供一定依据。

微卫星不稳定性与泌尿系统常见肿瘤

微卫星（ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅ，ＭＳ）是广泛存在于原核及真核细胞基因组中的简单串联重复ＤＮＡ序列，约占人基因组的１０％。其基本构成单位为１～６个核苷酸，以双核苷酸（ＣＡ）ｎ最为常见。微卫星ＤＮＡ具有高度多态性，主要由于串联重复的数目不同。与其他Ｄ...

BMP－1融合蛋白在大肠杆菌中的表达

本研究采用ＤＮＡ重组技术，构建ｐＭＳ３２Ｃ／ＢＭＰ－１表达载体，在工程细胞Ｅ．Ｃｏｌｉ中高效表达了人ＢＭＰ－１融合蛋白，ＭＷ６６ＫＤ，表达量占细菌总蛋白２０％，用制备性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纯化后免疫小鼠获得人ＢＭＰ－１融合蛋白多克隆抗体，免疫血清学鉴定证明表达的融合蛋白具有ＢＭＰ的抗原性，为ＢＭＰ研究打下了基础。

TIMPs抑制肿瘤细胞的浸润

组织金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰｓ）家族至今已被命名的有ＴＩＭＰ－１和ＴＩＭＰ－２，分别与９２－ｋＤ和７２－ｋＤＩＶ型胶原酶优先地结合，形成１：１的复合物。实验结果表明，在体外，两者均可以抑制肿瘤细胞的浸润；在体内，多次静脉注射ｒＴＩＭＰ，可以抑制某些恶性肿瘤的浸润和转移。将ＴＩＭＰｓ的ｃＤＮＡ导入某些肿瘤细胞，可以使这些细胞的恶性表型发生逆转。