流式细胞计无菌分选功能的开发

分选技术是流式细胞计一项重要功能。其分离细胞的速度及纯度是目前世界上任何其他医学仪器无法比拟的。其分选速度可高达3000—5000个细胞/秒;纯度可高达99％以上。 分选可分为两种,一种为一般分选,另一种为无菌分选。无菌分选需要在分选过程中严格保证无菌条件,使分选过程中细胞不受污染。以利于细胞的继续增殖。一般分选,国内其他实验室正在开展;而无菌分选国内尚未见报道。国外也只是部分实验室在应用。我们参考了一些国内外文献并借鉴了一些国外经验,在FACS440型流式细胞计上开发了无菌分选功能。本文介绍这种方法及应用。希望此文对今后推广这项技术起到促进作用。

流式细胞计在免疫荧光测量中去除死细胞影响的方法

用流式细胞计测量免疫荧光的活细胞样品时,死细胞的存在会影响实验结果的准确性。因此消除死细胞的影响对于提高实验结果的可靠性是必要的。我们用低浓度的PI溶液去染死细胞,并利用专门的计算机软件来消除死细胞的影响。本文通过对三种细胞五个不同细胞活性的样品进行测试分析,证明了此方法对于消除死细胞的影响,提高实验结果的准确性是有效的。

流式细胞计多参数测量中的补偿问题

目的：正确解决流式细胞计多参数测量的补偿问题。方法：应用外周血淋巴细胞的双阴性对照、双染样品电子补偿和二维点图得到正确的补偿值。结果：补偿值大小受ＰＭＴ电压值和染色条件的影响。结论：流式测量中除设定实验样品的阴性对照外，在多重染色样品测量时还应设置阳性对照，以调整补偿器的正确值。

流式细胞术免疫荧光测量中的直标及间标

直接标记和间接标记是免疫荧光测量中两种不同的标记方法。在流式细胞计测量中，一般说来，直接标记不易引入样品的非特异性结合，因此引入干扰少，样品的数据好处理，而间接标记由于有放大作用，容易引入非特异结合的干扰，严重时所得数据无法区分特异及非特异信号，造成数据分析的混乱，通过样品实测比较，认为在流式细胞计测量中应用直接样品更为合适。

流式细胞计的多参数分选技术

多参数分选技术是多参数流式细胞计一项重要应用，此技术不仅提高分离细胞的纯度，而且可以得到更多的细胞信息及更多的不同性质细胞亚群，这无疑对更细地分离细胞，进一步研究不同亚群的细胞性质是很有意义的。参照一些国外文献及经验，应用ＦＡＣＳ４４０流式细胞计，通过对人外周血细胞分析及分选，介绍了这项技术和流式细胞计多参数分选细胞方法，并详细地讨论了影响分选纯度的一些关键步骤，提供了多参数分选的一些数据供使用参考。