一种简便实用的大鼠高脂血症模型

冠心病是临床最常见的心血管疾病,90%以上是以动脉粥样硬化(Atherosc-lerosis,AS)为其发病基础,而高脂血症又与AS的发病关系密切。因此,复制动物高脂血症模型,研究AS的成因,对冠心病的预防和治疗均有较大意义。我们在参照文献的基础上,经过改良,成功地复制出明显的大鼠高脂血症模型。该模型具有经济、简便、误差较小等优点,现简介如下。

内皮素在休克中的发病学意义

内皮素是新近发现的血管内皮细胞产生的一种生物活性多肽,本工作用特异性放免法测定发现晚期败血症休克病人血浆内皮素水平显著增加;给健康大鼠持续滴注内皮素即能复制出典型休克模型(Endothelin-shock);给失血性休克大鼠滴注小剂量内皮素则恶化休克促进其不可逆发展。实验结果提示内皮素可能是机体的内源性致损伤因子,是参与休克发生发展的重要体液因素之一。

牛磺酸对家兔心肌肌膜和磷脂脂质体脂质过氧化的影响

在家兔心肌肌膜和人工生物膜脂质体上,牛磺酸显著抑制氧自由基发生系统(FeCl_3和抗坏血酸)所引起的脂质过氧化物丙二醛的增加,其抑制作用呈剂量依赖和时间依赖关系。本结果证实牛磺酸具有抗氧化作用,在膜水平上直接起到自由基清除剂作用。

束缚应激动物血清中免疫抑制因子产生部位的初步研究

大鼠或小鼠经束缚应激10h后,血清中出现一类淋巴细胞转化抑制因子。本实验在上述工作的基础上对抑制因子的产生部位做了初步研究,结果表明,应激后脑脊液中不存在淋巴细胞转化抑制因子,说明这种因子不是由中枢神经系统产生。大剂量辐射与环磷酰胺均能降低脾脏有核细胞总数,但前者能降低抑制因子的产生,后者无作用,提示淋巴细胞总数的减少对血清抑制因子的产生可能不起决定性作用。细胞分类的结果表明,辐射能明显降低T、B细胞比例,而环磷酰胺反而使其比例有上升趋势。因而提示抑制因子的产生可能与T、B淋巴细胞的比例有关。当T细胞比例减少时,抑制因子的产生受到阻碍。裸鼠为先天性T细胞功能缺失动物,同样的应激条件抑制因子的产生受到明显抑制。这也说明抑制因子的产生可能与T细胞的作用有关。

C纤维不是电针镇痛的主要传入纤维,而是弥散性伤害性抑制控制的主要纤维

电针刺激通过何种纤维传入中枢产生镇痛作用,至今仍有争论。范少光等采用我室常用电针参数,以大鼠行为反应为指标,观察到电针(Electroacupuncture,EA)镇痛信息主要不是由 C 纤维传入。本工作用辣椒素选择性阻断 C 纤维传导后,观察了 EA 和伤害性热刺激(Noxious heat,NH)对脊髓广动力范围(Wide DynamicRange,WDR)神经元抑制作用的影响,进一步对上述问题作探讨。

异搏定对四氧嘧啶损害大鼠胰岛β细胞的保护作用

本工作用四氧嘧啶(尾静脉注射)造成大鼠实验性糖尿病模型。若预先由腹腔注射异搏定(40mg/kg)则可使大鼠血糖水平明显降低,不产生糖尿病,注射四氧嘧啶后48h,血糖浓度的平均值由22.93±1.37mmol/L下降到8.79±0.83mmol/L。口服葡萄糖耐量试验观察到,经过异搏定处理的糖尿病大鼠,在注射四氧嘧啶后的48h,其胰岛素分泌功能较未经异搏定处理的糖尿病大鼠有明显的恢复。组织学切片也显示,胰岛β细胞内胰岛素分泌颗粒的含量在异搏定处理组较单独四氧嘧啶处理组明显增多。上述结果表明,预先注射异搏定能减轻四氧嘧啶对胰岛β细胞造成的急性损伤。

游泳方法建立大鼠模拟过度训练模型

本文报道用超负荷训练大鼠游泳的方法，来建立大鼠模拟过度训练模型。大鼠随机分为３组：（１）对照组；（２）一般游泳训练组，进行中等强度游泳训练；（３）过度负荷组，采用负重的方法增加游泳训练的强度，并在训练的后期，使训练动物反复运动至力竭。结果表明：过度负荷组大鼠在训练的后期，普遍出现了运动能力下降，并且神志、外观等一般状况恶化、体重下降，血清睾酮浓度明显下降，运动后即刻和２４小时皮质酮浓度明显升高，血红蛋白含量下降，尿中蛋白含量升高等异常表现，尤其运动后２４小时，血浆皮质酮浓度仍较高，睾酮／皮质酮比值较对照组下降９４．２％，远远超过３０％的人类过度训练诊断参考标准。作者认为，采用超负荷训练大鼠游泳的方法，来建立大鼠模拟过度训练模型，是可行的。

消炎痛对大鼠肝线粒体、微粒体^(45)Ca 摄取及膜流动性的影响

我们曾报道消炎痛预处理在大鼠能引起明显的肝保护作用,为了进一步探讨消炎痛肝保护作用的机制,本工作观察了它对大鼠肝线粒体、微粒体钙调节作用及膜流动性的影响。结果表明,经消炎痛整体预处理的大鼠肝线粒体和微粒体的钙摄取及膜流动性均明显增加,但是,将消炎痛直接加入由正常大鼠分离的线粒体或微粒体中,则反而使膜的流动性降低。这些变化可能与消炎痛的肝保护作用有关。

牛磺酸对大鼠脑缺血再灌注损伤时内皮素变化的影响

为了探讨牛磺酸对缺血－再灌注损伤的保护机理，在大鼠脑缺血－再灌注模型上观察牛磺酸治疗效果，发现牛磺酸（６００ｍｇ／ｋｇｉ．Ｐ）能明显减轻脑组织的损伤和钙超载，增加脑组织牛磺酸的含量，抑制血浆和脑脊液内皮素水平的增加。在离体孵育的大鼠脑血管条上发现牛磺酸呈剂量依赖地抑制缺氧引起的内皮素释放。以上结果提示牛磺酸抑制内皮素释放可能是其防治脑缺血－再灌注损伤的机理之一。

电针刺激可在大鼠脊髓诱发Fos样蛋白的生成

本研究利用Fos蛋白的免疫组织化学方法首次报道电针“三阴交”穴位可在大鼠脊髓诱发原癌基因c-fos的表达。电针后大量Fos免疫反应(FLI)细胞出现在脊髓腰膨大的背、腹角,但标记最密集区为背角Ⅲ,Ⅳ层。在动物足部注射福尔马林产生的伤害性刺激亦可在脊髓腰膨大背、腹角诱发大量FLI细胞,但以背角Ⅰ,Ⅱ层标记最为密集。因此电针和伤害性刺激引起的脊髓c-fos表达在分布上是不同的。电针诱发的Foc蛋白可能参与针刺镇痛。

枸杞多糖对肾性高血压大鼠离体血管反应性的影响及其机制

本工作利用两肾—夹（2KlC）肾性高血压（RH）大鼠模型，观察枸杞多糖（LBP）对高血压大鼠血压的影响以及离体主动脉环内皮细胞在调节血管张力中的功能改变，探讨LBP对高血压发生发展的影响及其机制。结果表明，LBP可防止2KlC大鼠高血压的形成。离体主动脉环灌流表明RH组对苯肾上腺素（PE）的收缩反应明显高于对照组，去除内皮后组间差异消失；而LBP组由—氧化氮（NO）合成酶抑制剂卜硝基-L-精氨酸甲基酯（LNAME）及鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝（MB）引起的收缩反应较RH组明显增加；LBP组对乙酸胆碱（ACh）的内皮依赖性舒张反应较RH对照组明显增加，而对非内皮依赖舒张剂硝普钠（SNP）的舒张反应无组间差异；NO合成底物L-精氨酸（L-Arg）能显著提高RH大鼠对ACh的内皮依赖性舒张，而对LBP组无明显作用。上述结果表明，LBP降低2lIC大鼠增强的血管收缩反应，增加内皮依赖性的舒张。此作用与LBP对内皮的保护、内皮源性舒张因子（EDRF）生成增多以及促进LArg的代谢有关。

维拉帕米拮抗内皮素所引起的心肌损伤

本实验用10^(-8)mol/L 内皮素灌流离体大鼠心脏,导致平均灌流压,心室内压急剧升高,±LV dP/dt_(max)值显著降低,心肌蛋白漏出和脂质过氧化物形成,心肌钙含量显著增加等严重心脏功能和组织损伤。钙通道阻滞剂维拉帕米,无论与内皮素同时灌流或在内皮素灌流以后应用,都能有效地拮抗内皮素的心脏损伤作用。

神经降压素对醋氨酚引起肝损伤的保护作用及其与谷胱甘肽系统的关系

本工作观察了神经降压素（ＮＴ）对醋氨酚引起的小鼠在体肝脏和高体肝细胞损伤的保护作用及其与各胱甘肽系统的关系。结果表明，ＮＴ在整体和离体肝细胞均能减轻醋氨酚诱导的转氨酶的漏出，且在离体肝细胞部分翻转了醋氨酚引起的ＤＮＡ合成速率的下降。在离体肝细胞醋氨酚使细胞内还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ），谷胱甘肽总含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性均降低，但氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）含量无明显改变。ＮＴ预处理后再给予酪氨酚，则ＧＳＨ含量进一步下降，而ＧＳＳＧ、谷胱甘肽总含量及ＧＳＨ－ＰＸ活性均增加，提示ＮＴ一方面促进谷胱甘肽的合成，另一方面通过提高ＧＳＨ－Ｐｘ的活性，促进ＧＳＨ转变成ＧＳＳＧ，从而提高了肝细胞清除自由基的功能。

脊髓5-HT_(1A)受体和5-HT_(3)受体参与的心血管反应

给清醒大鼠脊髓蛛网膜下腔注射(ith)5-羟色胺(5-HT)1.56、3.125、6.25和12.5μg/1Oμl后引起明显血压升高,并呈量效关系,但心率(HR)无明显改变。Ith 5-HT 再摄取抑制剂 fluoxetine(10μg/10μ1)后也使平均动脉压(mABP)明显上升,这一效应可被5-HT 受体阻断剂肉桂硫胺(cinanserin 25μg/1Oμl)完全阻断。8-OH-DPAT 和2-Methylhydroxy-tryptamine 分别为5-HT_(1A)受体和5-HT_3受体的激动剂,在 ith 8-OH-DPAT(2.5,5.0,1Oμg/1Oμl)后 mABP 明显上升,但 HR 减慢;相反,ith 2-Methylhydroxytryptamine 之后则使 mABP 明显降低,HR 无明显变化。以上结果表明,脊髓中5-HT 可通过激活5-HT_(1A)受体引起血压升高,激活5-HT_3受体则引起血压降低。这一发现对有关5-HT 中枢效应的不同报道提出了一种可能的解释。

离体大鼠心肌细胞钠超负荷与缺氧-复氧损伤

本工作在离体成年大鼠心肌细胞缺氧-复氧模型上,观察到细胞无氧孵育时加入Na^+-K^+ATP酶抑制剂哇巴因,增加细胞内钠离子浓度,复氧孵育后造成了更严重的细胞损伤及钙超负荷,缺氧期末细胞内钠离子浓度与复氧后钙超负荷的程度呈显著正相关。复氧期给予Na^+-Ca^(2+)交换抑制剂Mn^(2+),明显减轻了细胞的缺氧-复氧损伤,Mn^(2+)还显著抑制了无钠孵育引起的细胞损伤。结果提示:缺氧期细胞内钠超负荷是复氧时细胞内钙超负荷发生的条件,Na^+-Ca^(2+)交换是Ca^(2+)进入细胞的重要途径。

培养大鼠心肌细胞缺氧与复氧时H~＋－Ca^（2＋）交换的研究

大量研究表明：心肌细胞缺氧后再复氧，可因氧反常和ｐＨ反常造成细胞内Ｃａ２＋超载。通常认为，在心肌细胞发生ｐＨ反常后，Ｈ＋－Ｎａ＋和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换加强是细胞内Ｃａ２＋超载的重要机制。本实验结果表明：阻断了Ｈ＋－Ｎａ＋和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换后，仍有部分Ｃａ２＋进入细胞，Ｃａ２＋内流量与缺氧时间成正比关系。在无Ｎａ＋溶液中也得到了同样结果，表明此时Ｃａ２＋内流是通过与Ｎａ＋无关的通路进入细胞的。进一步实验表明这种Ｃａ２＋内流与细胞膜内外ｐＨ梯度差密切相关。当胞外ｐＨ升高即胞内相对Ｈ＋浓度增加时，Ｃａ２＋内流量也增加。故推测：ｐＨ反常所致细胞内Ｃａ２＋超载的原因，除Ｈ＋－Ｎａ＋和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换外，尚有Ｈ＋－Ｃａ２＋交换机制。

超氧化物歧化酶对内皮细胞缺氧复氧损伤的防护作用

体外培养的家兔胸主动脉内皮细胞（endotheliacell，EC）缺氧30min后复氧10min，可以发现缺氧后复氧可引起细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量、细胞悬液丙二醛（MDA）含量增加，谷胱甘肽过氧化酶（GSH－Px）活性降低，细胞合成释放一氧化氮（NO）减少，细胞内钙离子浓度明显升高；EC的这些损伤在缺氧期间即有表现，复氧后更为加剧。而在缺氧前预先加入终浓度为200U／ml的超氧化物歧化酶（SOD）可改善细胞的抗氧化能力，减轻缺氧复氧（H／R）对EC的损伤。上述结果表明，缺氧后复氧产生的大量氧自由基是造成细胞损伤的主要因素，SOD通过清除氧自由基减轻缺氧复氧对细胞的损伤。

山莨菪碱对内毒素与大鼠离体心脏及肝细胞结合的抑制作用

本实验用含异硫氰荧光素标记的内毒素(FITC内毒素25μg/ml)的灌流液及含内毒素和山莨菪碱(各25μg/ml)的灌流液进行大鼠离体心脏灌流。经荧光分光光度计测定灌流前后灌流液内毒素含量,发现山莨菪碱使内毒素与心肌组织结合率降低47.7%(P<0.02)。分离的大鼠肝细胞与FITC内毒素共同孵育,预先或同时加入山莨菪碱均可明显抑制内毒素与肝细胞结合。本实验说明:山莨菪碱在离体组织器官及细胞水平均可抑制宿主缅胞与内毒素的结合。提示:山莨菪碱在细胞膜水平上与内毒素相拮抗。

神经节苷脂纯化方法的改进

神经节苷脂(ganglioside,Gls)的分离与纯化是研究组织细胞Gls组成、含量及代谢的基本手段。由于Gls在神经以外组织中含量甚微,而且因组织、细胞的不同,影响Gls纯化的因素也不同.在实验过程中常常由于方法选择不当致使实验失敗.本文介绍一种改进的方法,它操作简单,适用于大鼠多种组织。

巯基参与胃粘膜防御机制

本工作研究了胃粘膜非蛋白质巯基物质(NPSH)在粘膜防御功能中的作用。结果表明,酸性乙醇灌胃或冷冻加束缚应激引起大鼠胃粘膜 NPSH 含量显著下降;补充含-SH 的化合物半胱胺或还原型谷胱甘肽可防止酸性乙醇引起的胃粘膜损伤;在酸性乙醇灌胃或应激后,胃粘膜谷胱甘肽还原酶活性明显降低,并与 NPSH 含量的下降在时间上一致;丙二醛含量在酸性乙醇灌胃后显著升高,自由基清除剂二甲亚砜可减轻胃粘膜损伤。上述结果提示,胃粘膜NPSH 可能通过对自由基的清除作用参与粘膜的局部防御机制;谷胱甘肽还原酶活性下降和自由基生成增加所导致的粘膜 NPSH 含量下降可能是损伤发生过程的重要环节。