丙型肝炎病毒Simmonds基因分型法酶切分型的研究

丙型肝炎病毒（HCV）的基因分型在临床和流行病学的研究方面有重要意义。以多聚酶链反应的方法扩增HCV的5’-非编码区第28至284区段（HCV－J株），并以复合限制性内切酶水解的方法按Simmonds基因分型的标准，将HCV分为6型和若干亚型。结果：检测标本38份，均为1b型，与以往的检测结果类似。

输血后丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量的动态观察

近年来,国内外已有报道应用α-干扰素治疗丙型肝炎取得了较好的效果,病情好转,血清ALT下降,但不能指示血清中HCV RNA含量逐渐下降或消失的情况。本文应用定量PCR方法检测了2例未经干扰素治疗的8份系列血清和3例经干扰素治疗的16份系列血清,进行HCV RNA动态观察。

HGV RT PCR在血制品检验中的应用

ＨＧＶＲＴＰＣＲ在血制品检验中的应用１０００４４北京医科大学第二临床学院肝病研究所杜绍财朱凌自从ＧＢＶ－Ｃ和ＨＧＶ被命名庚型肝炎病毒以来［１，２］，国外已有庚型肝炎病毒在多次输血的病人及静脉吸毒者和血友病患者中感染率较高的报道。值得注意的是在慢性ＨＣ...

RT─PCR抗污染技术的研究

ＲＴ─ＰＣＲ抗污染技术的研究杜绍财，陶其敏，朱凌，刘金祥近几年来，ＰＣＲ技术已广泛地应用于不同疾病的临床诊断，由于该技术灵敏度非常高，能将目的基因扩增放大１×１０６￣２×１０６，所以在一般实验室极易发生污染而造成一定的经济损失，并影响实验结果的可靠性...

抗污染RT-PCR检测HCVRNA的研究

目的研究与解决ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ过程中常见的产物污染问题．方法以稀释的含ｄＵＴＰ的ＰＣＲ产物加入ＲＴＰＣＲ反应的不同阶段以模拟ＰＣＲ产物污染，再采用尿苷酶以清除污染的ＰＣＲ产物分子．结果在检测ＨＣＶＲＮＡ的套式ＰＣＲ反应中，假阳性结果主要是由于ＰＣＲ终产物在实验过程中的任何阶段污染所引起，但污染的模板分子仅在第２次ＰＣＲ反应时扩增．将ＨＣＶＲＮＡ套式ＰＣＲ检测试剂盒中的第２次ＰＣＲ反应液中加入一定量的ｄＵＴＰ，可使反应终产物核酸分子上含有ｄＵＴＰ．此后，在每进行第２次ＰＣＲ反应前，均在每３０μｌ反应体系中加入尿苷酶１Ｕ，３７℃消化１ｈ，然后９４℃１０ｍｉｎ灭活尿苷酶，即可降解其中含ｄＵＴＰ的污染核酸分子．结论此法能消除同一实验室内套式ＰＣＲ终产物的污染，防止假阳性结果的出现．