哺乳动物凝集素及其生物学作用

哺乳动物凝集素及其生物学作用周柔丽（北京医科大学细胞生物学教研室，北京１０００８３）关键词动物凝集素，细胞识别自Ａｓｈｗｅｌｌ和Ｍｏｒｅｌｌ发现肝细胞凝集素廿余年来在高等动物体内陆续发现了多种多样的凝集素。其生物学作用涉及到许多重要的生理与病理活动，...

放射自显影术在神经生物学研究中的应用

在当前科学前沿中,脑的结构与功能是非常重要的研究课题。脑的功能决定于其结构上和化学上的特性,对脑的研究不能破坏其结构的完整性,必须将功能、结构和化学成分有机地结合起来。放射自显影术能较好地满足上述要求,可以在生理条件下进行示踪,提供结构与功能相关的图象;自显影定位的优点可以补充用生化技术从脑组织碎片中得到的知识;还可与免疫组化或其它细胞化学技术联用。

灵芝多糖引起的小鼠脾细胞核DNA，RNA含量及核质比的变化

灵芝多糖可引起体外培养的小鼠脾细胞核ＤＮＡ，ＲＮＡ含量显著增加，细胞内超微结构改变，细胞质和细胞核的平均截面积明显增加，核质比呈下降趋势，提示灵芝多糖诱导脾细胞ＤＮＡ和蛋白质合成的同时，促进细胞增殖。

转化生长因子－β对细胞外基质基因表达调节作用的研究进展

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一类具有激素样活性的多肽生长因子，许多正常和转化细胞均可合成并分泌ＴＧＦ－β，ＴＧＦ－β既可刺激细胞的增殖，又可刺激细胞的分化，对细胞进行双向调节。细胞外基质（ＥＣＭ）对细胞的增殖和分化也具有控制作用，ＥＣＭ主要成份的ｍＲＮＡ表达可被ＴＧＦ－β诱导和调节，而且两者具有一定的相关性。提示ＴＧＦ－β可能是通过ＥＣＭ实现其对细胞的双向调节。

肿瘤细胞粘附、迁移与转移的相关性

肿瘤细胞的粘附、迁移能力与癌转移密切相关．细胞粘附分子选择素、整合素、免疫球蛋白超家族及钙粘素介导同型或异型细胞间以及细胞与基质间的粘附，其在肿瘤细胞表面表达数量或分布方式的改变直接或间接影响着转移潜能，是肿瘤细胞从原发瘤脱落以及着床的关键性环节．肿瘤细胞的迁移能力被认为是癌转移的限速环节．一般情况下，肿瘤细胞在体内或体外的迁移能力与其转移潜能呈正相关性，肿瘤细胞通过对迁移刺激物的趋化性及趋触性应答而完成向远离器官的转移。

层粘连蛋白对人胃癌细胞内游离钙及钙调蛋白和核DNA含量的影响

本文研究外源性层粘连蛋白与人胃癌细胞膜上其受体介导细胞内Ｃａ２＋浓度及钙调蛋白（ＣａＭ）和ＤＮＡ发生的变化。结果表明，层粘连蛋白可引起细胞内Ｃａ２＋浓度升高和钙调蛋白含量显著升高。同时伴有核ＤＮＡ含量增加。提示外源性层粘连蛋白与质膜上的层粘连蛋白受体结合后可能通过细胞内Ｃａ２＋影响核内ＣａＭ，进而促进ＤＮＡ的合成。该信息通路在层粘连蛋白促进肿瘤细胞粘着，铺展，增殖等生物学效应中可能起重要调节作用。

伴刀豆蛋白A与巨噬细胞膜上受体结合后对微丝组装的影响

本文采用流式细胞术(FCM)和荧光显微术研究ConA与巨噬细胞膜上受体结合后细胞骨架微丝组装的变化,实验证明ConA与膜受体结合后巨噬细胞内微丝含量增多,并且与ConA的浓度有关。荧光显微镜下还可见细胞面积增大。本实验成功地用流式细胞术定量研究活细胞内细胞骨架的变化情况。

石英粉尘对人红细胞膜的损伤及柠檬酸铝的抗损伤作用研究——V、对膜蛋白构象的影响

本研究用圆二色技术测定石英粉尘对人红细胞膜蛋白构象的影响以及柠檬酸铝拮抗石英影响的效应.结果显示,石英引起膜蛋白构象改变较为迅速;对膜蛋白构象的影响(α-螺旋量减少)存在着剂量效应关系.柠檬酸铝可以有效地减轻石英对红细胞膜蛋白构象的影响.

小鼠Lewis肺癌组织中糖肽的分离纯化及其对肿瘤细胞与层粘连蛋白基质粘着的影响

小鼠Lewis肺癌组织经氯仿甲醇去除脂类,用木瓜蛋白酶消化,再经Sephadex柱层析分离得到总糖肽。它有明显地抑制小鼠Lewis肺癌细胞,S180肉瘤细胞及人巨细胞肺癌细胞与层粘连蛋白(Laminin,LN)基质粘着的作用;对层粘连蛋白受体(LN-R)与其配体的识别及结合也具有同样明显的阻断效应。糖肽的上述作用均具有剂量依赖性。进一步经ConA-Sepharose CL-4B亲和层析将总糖肽分为三个部分。与ConA不结合的糖肽部分对Lewis肺癌细胞与LN基质的粘着也具有剂量性抑制作用。

层粘连蛋白糖肽在B 16-MBK黑色素瘤细胞对小鼠实验性肺转移中的作用

层粘连蛋白(LN)及其受体在癌瘤细胞转移的复杂过程中于多个环节起着决定性作用。LN(分子量约900 000kD)是构成基膜的主要非胶原糖蛋白,其含糖量约13％～15％。已证实LN分子中YIGSR五肽序列在LN与细胞表面67kDLN受体结合中起重要作用。

层粘连蛋白糖肽对实体型瘤细胞粘着于层粘连蛋白基质的影响

本文报告由小鼠EHS瘤提取的层粘连蛋白(Laminin,LN)经链霉蛋白酶(Pronase)消化,再经Sephadex-G50层析分离得到LN总糖肽。它可显著抑制黑色素瘤细胞B16-MBK及S180肉瘤细胞与LN基质的识别及粘着,并具有明显剂量依赖性。与五肽(YIGSR),卵清蛋白及其糖肽,胎球蛋白及其糖肽比较,LN总糖肽的抑制效果显著高于YIGSR及胎球蛋白糖肽,而其它三者均无抑制作用。因而提示:LN分子中一定结构的糖链特异地参与了LN对肿瘤细胞表面LN受体的识别与结合。

层粘连蛋白总糖肽对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的：观察层粘连蛋白总糖肽（Ｌａｍｉｎｉｎｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＬＮ－Ｇｐｓ）对小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍ）杀伤黑色素瘤Ｂ１６细胞及吞噬抗体包被的羊红细胞（ＥＡ）作用的影响。方法：将ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔Ｍ体外培养４８ｈ后，再分别与０（对照），５０，１００，２００μｇ／ｍｌ终浓度的ＬＮ－Ｇｐｓ预温３０ｍｉｎ，用噻唑蓝比色法检测Ｍ对Ｂ１６细胞的杀伤作用，用联苯胺氧化比色法检测Ｍ吞噬ＥＡ的功能。结果：（１）Ｍ杀伤Ｂ１６细胞的作用呈剂量依赖性增高，其中１００μｇ／ｍｌ和２００μｇ／ｍｌ的ＬＮ－Ｇｐｓ可分别使Ｍ对Ｂ１６细胞的杀伤作用较对照组增高（１０．３±２．８）％和（２８．４±９．９）％（Ｐ均＜０．０５）。（２）Ｍ对ＥＡ吞噬作用降低，分别为对照组的（９２．２±１２．４）％（ＬＮ－Ｇｐｓ５０μｇ／ｍｌ）、（８７．０±１４．２）％（ＬＮ－Ｇｐｓ１００μｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５）和（６９．４±１８．２）％（ＬＮ－Ｇｐｓ２００μｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５）。（３）如果将Ｂ１６细胞与ＬＮ－Ｇｐｓ２００μｇ／ｍｌ先预温，则Ｍ对Ｂ１６细胞的杀伤作用较对照组（Ｂ１６细胞不与ＬＮ－Ｇｐｓ预温）明显下降，为对照组的（８４．７±７．３）％（Ｐ?

CD_(23)McAb抑制活化B细胞增殖机制的初步探讨

本研究用CD_(23)单克隆抗体(CD_(23)McAb)交联活化的人扁桃体B细胞,证明CD_(23)McAb对B细胞呈双向调节效应,即:高浓度区抑制B细胞增殖,低浓度区促进B细胞增殖。继而,用对B细胞有抑制效应浓度的CD_(23)McAb交联B细胞膜CD_(23)分子,通过研究抑制效应恢复条件,探讨了CD_(23)McAb产生抑制效应的作用机制。结果显示;去除CD_(23)McAb后,抑制作用不能恢复,用SAC再次活化,使B细胞恢复增殖状态,用促B细胞增殖浓度的CD_(23)M-cAb却无此作用。提示:过量CD_(23)McAb过度交联B细胞膜CD_(23)分子后,所产生的抑制B细胞增殖现象,可能是由于促使B细胞从细胞增殖周期进入非增殖状态的G_0期所致。

癌患者血清中癌细胞凝集因子特性的研究

前曾报道癌患者血清中存在选择性凝集具高转移潜能的人鼻咽癌细胞的凝集因子．现除扩大了检测例数外，重点对癌患者血清中凝集因子的化学本质及生物学特性进行了系统研究，证明其可能是一种内源性凝集素（糖结合蛋白质），特异性识别甘露糖及β1，6分枝的N-乙酰氨基乳糖．其作用不依赖于Ca+，而还原剂可提高其活性并对高碘酸氧化敏感．对这种内源性凝集素在癌栓形成及癌细胞转移中的作用进行了讨论．

CD23与B细胞分化

ＣＤ２３分子是Ｃ型血凝素家族类的ＩｇＥＦｃ受体。它选择性地表达于成熟Ｂ细胞表面，是Ｂ细胞分化过程中表达最短暂的分子之一。本文在简要介绍ＣＤ２３分子的基础上，综述了Ｂ淋巴细胞分化研究的新进展；结合我们实验室的工作，探讨了ＣＤ２３分子与Ｂ细胞活化和分化的可能关系；一些研究结果表明，ＣＤ２３分子不但是Ｂ细胞特定分化阶段的标志，该分子也能够向细胞内传递与细胞增殖和分化有关的化学信号。

巨噬细胞膜变形性与细胞骨架微丝关系的研究

以巨噬细胞的圆形因子和面积作为细胞膜变形性指标,研究细胞膜变形性与膜下微丝的关系。结果表明,ConA能使细胞膜变形性增大,同时加入细胞松弛素B则膜变形性下降。本实验将图像分析技术和多元统计软件包结合,为定量研究活细胞行为的一个成功尝试。

糖基在小鼠Lewis肺癌细胞与层粘连蛋白识别及结合中的作用

培养的小鼠Lewis肺癌细胞可粘着于固化在玻璃表面的层粘连蛋白(Laminin,LN)基质上。此过程可分别被抗LN兔血清和抗LN受体(LN-R)兔血清阻断,说明二者的结合是LN与细胞表面LN-R的作用结果。几种外源性单糖如唾液酸,α-甲基甘露糖等可抑制Lewis肺癌细胞与LN相结合,且有剂量依赖性。一种混合糖肽可分别与Lewis肺癌细胞和LN结合,而阻断二者的结合。

人红细胞膜血型糖蛋白A的提纯及扫描隧道显微镜观察

以氯仿-甲醇选择性抽提法提纯人红细胞膜血型糖蛋白A,用扫描隧道显微镜直接观察其在水溶液中的分子形貌。

巨噬细胞源成纤维细胞生长因子的分离纯化

为探讨二氧化硅在大鼠肺内引发的一系列纤维增生反应，试图寻找一种关键的细胞增生因子，采用高压液相色谱技术，包括凝胶过滤柱层析、离子交换柱层析以及反相Ｃ４高压液相色谱柱层析，获得一种新的巨噬细胞源成纤维细胞生长因子（ａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅ－ｄｅｒｉｖｅｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ，ＡＭＤＧＦ），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明它已达到均一的纯度，其分子量为５８０００，ｐＩ为４．７．该因子的分子量与ＭΦ在体外接受石英粉尘刺激分泌的因子的分子量明显不同．Ｎ端序列测定结果显示它与已知蛋白序列的同源性小于５０％，其刺激成纤维细胞增殖的最适浓度范围为２．０～６．０μｇ／ｍｌ，推测ＡＭＤＧＦ是矽肺纤维化病变发生。

巨噬细胞的抗肿瘤效应

本文从巨噬细胞的活化及效应两方面综述了巨噬细胞抗肿瘤的作用及作用机理的新进展。