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激光微束诱导pSV-β质粒导入Hela细胞的研究 被引量:4
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作者 沈子威 张斌 +3 位作者 张志诚 张鸿升 杨重山 苏雅娴 《激光生物学》 CSCD 1995年第3期673-678,共6页
本文报道了用一套Nd:YAG紫外激光微束系统研究基因转移。我们以pSV-β质粒(β─半乳糖苷酶基因)作为报道基因,利用紫外激光微束将其导入Hela细胞中,通过组织化学染色检测到质粒在Hela细胞中获得表达,在最佳的激... 本文报道了用一套Nd:YAG紫外激光微束系统研究基因转移。我们以pSV-β质粒(β─半乳糖苷酶基因)作为报道基因,利用紫外激光微束将其导入Hela细胞中,通过组织化学染色检测到质粒在Hela细胞中获得表达,在最佳的激光辎照条件下,Hela细胞的导入表达成功率在80%以上。本工作是国内首次报道激光微束诱导外源基因进入动物细胞中并获得表达,为激光微束技术在动、植物细胞高效率导入外源DNA的研究中摸索到一套经验,也将有力地促进这一技术在细胞工程方面的应用。 展开更多
关键词 激光微束 基因导入 pSV-β质粒 HELA细胞
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显微红外研究巨噬细胞膜电融合后膜蛋白二级结构的变化
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作者 沈子威 齐娟娟 +4 位作者 张志诚 杨重山 孙素琴 赵南明 苏雅娴 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期179-184,共6页
首次尝试了将显微傅里叶变换红外光谱术应用于研究电融合后细胞膜蛋白质二级结构的变化,发现脉冲电场作用于细胞具有穿透效应,施加电脉冲后,整个细胞的蛋白质体系能量增加,表明电脉冲对蛋白质的二级结构影响很大;同时,还发现用唾... 首次尝试了将显微傅里叶变换红外光谱术应用于研究电融合后细胞膜蛋白质二级结构的变化,发现脉冲电场作用于细胞具有穿透效应,施加电脉冲后,整个细胞的蛋白质体系能量增加,表明电脉冲对蛋白质的二级结构影响很大;同时,还发现用唾液酸苷酶和蛋白酶Pronase分别处理巨噬细胞膜表面后,膜上蛋白质二级结构无序化程度增加,用酶适度处理的细胞将更易发生电融合。 展开更多
关键词 显微红外 巨噬细胞 电融合 膜蛋白质 二级结构
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以“dominant negative”策略消除人肝癌细胞表面层粘连蛋白受体α6β1的功能 被引量:3
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作者 路艳艳 周柔丽 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第1期133-137,共5页
选用高表达 α6β1并主要借其介导细胞在层粘连蛋白 ( laminin,LN)基质上粘附和铺展的肝癌细胞系 Bel740 2 ,采用“dominant negative”策略消除细胞表面 α6β1受体的功能 ,以研究 α6β1在人肝癌细胞生物学行为中的作用 .用缺失胞质... 选用高表达 α6β1并主要借其介导细胞在层粘连蛋白 ( laminin,LN)基质上粘附和铺展的肝癌细胞系 Bel740 2 ,采用“dominant negative”策略消除细胞表面 α6β1受体的功能 ,以研究 α6β1在人肝癌细胞生物学行为中的作用 .用缺失胞质功能域的 β4亚单位 c DNA( β4- tr)转染细胞 ,其表达产物β4- TR可以和α6高亲和性竞争性地结合 ,形成因β4- TR缺失胞质功能域而无生物学功能的α6β4- TR二聚体 ,取代α6β1 .结果显示在转染β4- tr的 Bel740 2细胞表面可以检测到大量的β4- TR,与内源性α6结合形成α6β4- TR二聚体 ,而细胞表面α6β1受体降至极低水平 .细胞在 LN基质上的铺展率降低 ,表明 展开更多
关键词 整合素 肝癌细胞 基因转染 生物学行为 α6β1
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氯硝基安定抗惊厥作用耐受及停药前后对大鼠下丘脑室旁核CRHmRNA表达的影响 被引量:1
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作者 廖建湘 王丽 +1 位作者 左启华 孟书聪 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 1996年第1期65-67,共3页
氯硝基安定抗惊厥作用耐受性及依赖性机制目前尚不清楚。近来发现促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)具有促惊厥作用,并参与应激过程。我们用原位杂交方法观察了氯硝基安定抗大鼠点燃惊厥耐受及停药前后下丘脑室旁核CRHmRNA表... 氯硝基安定抗惊厥作用耐受性及依赖性机制目前尚不清楚。近来发现促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)具有促惊厥作用,并参与应激过程。我们用原位杂交方法观察了氯硝基安定抗大鼠点燃惊厥耐受及停药前后下丘脑室旁核CRHmRNA表达的变化,发现耐受时CRHmRNA表达增强,停药7d时不再变化。提示CRH参与了耐受性与依赖性过程。 展开更多
关键词 氯硝基安定 药物依赖性 抗惊厥药 mRNA CRH
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小牛心凝集素的分离纯化及部分性质研究 被引量:1
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作者 王燕蓉 周柔丽 金月英 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期441-444,T020,共5页
为探讨小牛心凝集素作为研究肿瘤细胞表面糖链的分子探针的可能性,以去唾液酸胎球蛋白-SepharoseCL-4B为亲和吸附剂,从小牛心组织中分离纯化了小牛心凝集素(calfheartagglutinin,CHA),在不... 为探讨小牛心凝集素作为研究肿瘤细胞表面糖链的分子探针的可能性,以去唾液酸胎球蛋白-SepharoseCL-4B为亲和吸附剂,从小牛心组织中分离纯化了小牛心凝集素(calfheartagglutinin,CHA),在不连续SDS-PAGE上得到一条蛋白质带,分子量为11.7kD。纯化的CHA凝集新鲜兔红细胞的比活性提高了365倍,总活性回收率为80.4%。糖抑制实验显示乳糖具有明显的抑制CHA血凝活性作用,其产生抑制的最低浓度为0.625mmol/L。此外,CHA还可凝集人精子和S180肉瘤细胞,产生凝集的最低浓度分别为10.56mg/L和0.476mg/L。CHA冻融后有蛋白质沉淀析出,凝血活性明显下降。 展开更多
关键词 小牛心 凝集素 亲和层析 S180肉瘤细胞 人精子
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癌患者血清中癌细胞凝集因子的初步研究 被引量:7
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作者 周柔丽 刘广超 +5 位作者 候林 洪英瑜 王少斌 芮静安 张绍丛 刑蓓佩 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第7期433-434,共2页
癌患者血清中癌细胞凝集因子的初步研究周柔丽,刘广超,候林,洪英瑜,王少斌,芮静安,张绍丛,刑蓓佩在癌细胞转移的复杂过程中,游离并进入血循环中的癌细胞相互聚集形成瘤栓,对于血流中癌细胞的存活及出血管都具有重要作用。癌细... 癌患者血清中癌细胞凝集因子的初步研究周柔丽,刘广超,候林,洪英瑜,王少斌,芮静安,张绍丛,刑蓓佩在癌细胞转移的复杂过程中,游离并进入血循环中的癌细胞相互聚集形成瘤栓,对于血流中癌细胞的存活及出血管都具有重要作用。癌细胞在宿主出血管中形成瘤栓主要由癌细... 展开更多
关键词 癌细胞 凝集因子 血清
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