一种高效制备α-L-岩藻糖苷酶的方法和应用

α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)[EC 3.2.1.51]是一种外切糖苷酶,从细菌到哺乳动物体内都广泛存在[1],参与多种基础生化反应。免疫化学交叉反应和纯系化研究显示,不同物种间AFU的氨基酸序列与结构十分相似,具有较高的保守性[2]。人体中存在高分子量(约100 kD)和低分子量(约50 kD)两种形态的AFU,高分子量的AFU是唾液酸糖蛋白,由两个低分子量的单体组成,而低分子量形式是中性的富含甘露糖的糖蛋白,两种形式都可以聚集为四聚体或六聚体形式[3]。人体内的AFU广泛分布于各种组织及体液中,如胎盘、胎儿组织、脑、肺、肝、胰、肾,以及血清、尿液、唾液、泪液等。从人脾脏、肝、脑和肾脏中纯化得到的AFU具有明显同质性,其中以肝、肾等组织活性较高,细胞内的AFU则主要位于溶酶体内[4]。