临床检验与健康促进

健康是人类最普遍最根本的需求,人民健康是民族昌盛和国家富强的重要标志。“活得好点、活得长点”是人的一直的愿望,也是我国目前的国家战略。随着经济社会的快速发展,我国传染病、意外伤害等健康威胁已大幅减小,慢性非传染性疾病(如心血管病、癌症、糖尿病及呼吸、神经、泌尿、骨骼等系统的慢性疾病)成为人口死亡或失能的主要原因。预防控制慢性疾病是卫生健康工作的重要任务,鉴别监测危险因素是慢性疾病预防控制的关键环节,临床检验是危险因素鉴别监测的主要手段。

液相色谱串联质谱测定血清24,25双羟基维生素D方法的建立

目的建立液相色谱串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定血清24,25双羟基维生素D_2[24,25-dihydroxyvitamin D_2,24,25(OH)_2D_2]和24,25双羟维生素D_3[24,25-dihydroxyvitamin D_3,24,25(OH)_2D_3]的方法。方法首先采用乙腈和硫酸锌溶液沉淀血清蛋白,之后加入正己烷/乙酸乙酯震荡提取24,25(OH)_2D、离心后吸取上清液、氮气挥干,再用流动相重组。以稳定同位素标记的24,25(OH)_2D_3-d6作内标。质谱采用正离子电喷雾离子化的多离子反应监测模式,24,25(OH)_2D_2和24,25(OH)_2D_3定量离子通道选择质荷比分别为429. 3→271. 3和417. 3→381. 3;内标24,25(OH)_2D_3-d6离子通道m/z为423. 3→387. 3。以标准品峰面积与同位素内标峰面积比制作标准曲线,建立LC-MS/MS快速测定24,25(OH)_2D_2和24,25(OH)_2D_3的方法。根据EP15-A2文件评价方法的精密度,并初步测定40例北京协和医院表观健康体检者[年龄(35±5)岁,男性18例,女性22例]血清24,25(OH)3D的含量及其与25OHD的比值。结果本实验条件下可同时快速检测血清24,25(OH)_2D_2和24,25(OH)_2D_3,分析时间仅为7. 5 min,特异性高,不受3-epi 24,25(OH)_2D_3以及1,25(OH)_2D的干扰。24,25(OH)_2D_2和24,25(OH)_2D_3与内标峰面积比与对应的浓度线性相关系数均>0. 999,24,25(OH)_2D_3重复性和实验室内不精密度分别为2. 46%～4. 81%和4. 33%～7. 21%,24,25(OH)_2D_2重复性和实验室内不精密度分别为4. 90%～6. 87%和5. 82%～9. 90%。24,25(OH)_2D_3和24,25(OH)_2D_2的加样回收率分别为91. 20%～96. 60%和92. 8%～105. 00%。24,25(OH)_2D_3和24,25(OH)_2D_2的定量限分别为0. 25和0. 5μg/L,检测限分别为0. 125和0. 25μg/L。初步分析北京协和医院40例体检人群血清,24,25(OH)_2D的平均值为(0. 81±0. 43)μg/L,25OHD/24,25(OH)_2D比值范围为8. 7～37. 2,平均值为18. 9±6. 7,性别间差异无统计学意义(P>0. 05)。结论本研究成功建立了LC-MS/MS快捷、准确测定血清24,25(OH)_2D的方法。