目的探讨不同渗透压下红细胞体积和溶血情况的变化,为优化人红细胞保护剂的添加和洗涤方案、冷冻干燥程序设定等方面提供参考依据。方法以梯度浓度的氯化钠溶液提供不同的渗透压环境,加入储存4周的全血,离心法测红细胞压积(Hct)、显微...目的探讨不同渗透压下红细胞体积和溶血情况的变化,为优化人红细胞保护剂的添加和洗涤方案、冷冻干燥程序设定等方面提供参考依据。方法以梯度浓度的氯化钠溶液提供不同的渗透压环境,加入储存4周的全血,离心法测红细胞压积(Hct)、显微镜下记录红细胞形态和直径、用冰点渗透压仪测定上清的渗透压、测定上清血红蛋白(Hb)含量,经计算得到不同渗透压下的红细胞体积及溶血率差异。结果在低渗环境下,当渗透压(m Osm/kg)为148、154、158、171、191和236时,溶血率(%)分别为87.3±4.3、79.4±6.7、68.5±6.6、30.2±2.8、6.6±1.0和2.5±0.8,红细胞平均体积(MCV)(f L)分别为184.1±32.7、216.4±62.9、185.2±27.3、151.8±6.8、122.4±3.7和109.3±2.4;在高渗环境下,当渗透压(m Osm/kg)为810、1 073、2 460和3 033时,溶血率(%)分别为2.1±0.7、2.5±0.6、25.2±8.7和55.8±13.8,MCV(f L)分别为58.1±1.9、60.6±2.8、74.5±4.8和80.1±13.9;在等渗环境,溶血率为(1.9±0.8)%、MCV为(94.9±1.08)f L。结论渗透压从低渗到高渗变化过程中,红细胞的体积逐渐减小,溶血率先降低后升高,当渗透压为160 m Osm/kg时,红细胞体积达到上限160 f L,溶血率增加至68%;当渗透压为800 m Osm/kg时,红细胞体积达到下限为60 f L,溶血率为2%。为了降低细胞溶血率,红细胞体积变化宜<1.68倍、>0.68倍原体积。展开更多
文摘目的探讨一氧化氮(NO)对采用percoll密度梯度离心法分离的不同天龄红细胞(RBC)功能状态的影响作用。方法 1)将Percoll细胞分离液配制成5个不连续密度梯度(1.091,1.098 5,1.106,1.113 5,1.121 g/ml),将RBC按平均密度大小分层,依次吸取每层RBC分别做RBC内丙酮酸激酶(PK)含量测定并计算天龄、RBC内ATP含量检测、RBC变形性评价,以及RBC膜蛋白Western Blot。2)从同1份滤白全血中取出2等份,1份为实验组:加适宜浓度的NO溶液,另1份为对照组:加等体积红细胞保存液Ⅲ,分别于保存初期、中期、末期检测2组血液及不同天龄RBC的功能。结果 1)同1份样品经密度梯度离心分离后,RBC随着密度的增大,PK活性逐渐减小(6.192±1.25、5.165±0.84、4.538±0.76,P<0.05)、天龄逐渐增加(10.409、34.957、49.945)、ATP含量逐渐减少(4.755±0.037、3.242±0.445、2.929±0.153,P<0.01)、RBC变形性逐渐降低(200-1切变率下,0.381±0.005、0.340±0.033、0.281±0.028、P<0.05)、RBC膜带3蛋白量减小、聚簇化的带3蛋白量增多、膜上结合的IgG含量增多。2)NO组与对照组相比,全血各指标无明显差异,但NO组保存中、末期老年RBC变形性明显高于对照组(200-1切变率下,中期:0.290±0.021 vs 0.276±0.021、0.229±0.024 vs 0.211±0.027;末期:0.277±0.017 vs0.263±0.019、0.213±0.038 vs 0.193±0.039,P<0.01)。结论 RBC功能随密度的增大逐渐降低;NO可明显改善老年RBC的变形性,但对全血无明显影响。
文摘目的探讨不同渗透压下红细胞体积和溶血情况的变化,为优化人红细胞保护剂的添加和洗涤方案、冷冻干燥程序设定等方面提供参考依据。方法以梯度浓度的氯化钠溶液提供不同的渗透压环境,加入储存4周的全血,离心法测红细胞压积(Hct)、显微镜下记录红细胞形态和直径、用冰点渗透压仪测定上清的渗透压、测定上清血红蛋白(Hb)含量,经计算得到不同渗透压下的红细胞体积及溶血率差异。结果在低渗环境下,当渗透压(m Osm/kg)为148、154、158、171、191和236时,溶血率(%)分别为87.3±4.3、79.4±6.7、68.5±6.6、30.2±2.8、6.6±1.0和2.5±0.8,红细胞平均体积(MCV)(f L)分别为184.1±32.7、216.4±62.9、185.2±27.3、151.8±6.8、122.4±3.7和109.3±2.4;在高渗环境下,当渗透压(m Osm/kg)为810、1 073、2 460和3 033时,溶血率(%)分别为2.1±0.7、2.5±0.6、25.2±8.7和55.8±13.8,MCV(f L)分别为58.1±1.9、60.6±2.8、74.5±4.8和80.1±13.9;在等渗环境,溶血率为(1.9±0.8)%、MCV为(94.9±1.08)f L。结论渗透压从低渗到高渗变化过程中,红细胞的体积逐渐减小,溶血率先降低后升高,当渗透压为160 m Osm/kg时,红细胞体积达到上限160 f L,溶血率增加至68%;当渗透压为800 m Osm/kg时,红细胞体积达到下限为60 f L,溶血率为2%。为了降低细胞溶血率,红细胞体积变化宜<1.68倍、>0.68倍原体积。
