几种肾素-血管紧张素系统抑制剂对正常大鼠血浆细胞因子和心肌eNOS、Caspase-3蛋白表达的影响

目的观察几种血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)培哚普利、雷米普利、福辛普利、卡托普利及血管紧张素受体拮抗剂(ARB)替米沙坦对正常大鼠用药后血浆细胞因子VEGF、eNOS、TNF-α、vWF、NO水平及心肌eNOS及Caspase-3蛋白表达的影响。方法48只SD大鼠随机分为6组,每组8只,1组空白对照,余5组药物干预,给药组每日灌胃,分别给予培哚普利(1.33mg/kg)、雷米普利(1.67 mg/kg)、福辛普利(6.67 mg/kg)、卡托普利(25 mg/kg)或替米沙坦(13.33 mg/kg),对照组给予生理盐水,2周后取外周血应用ELISA法检测血浆VEGF、eNOS、TNF-α、vWF的含量,硝酸还原酶法检测血浆NO含量,免疫组化方法观察心肌eNOS表达,免疫荧光方法观察心肌vWF表达,Western-blot分析心肌eNOS及Caspase-3的蛋白表达。结果服药2周后,血浆TNF-α、vWF数值明显下降,较对照组差异显著(P<0.05),药物组间对比未见明显差异,VEGF有所升高但未达到统计意义(P>0.05), eNOS水平亦有所升高,与对照组比较雷米普利组、卡托普利组及替米沙坦组差异显著(P<0.05),各药物组间差异无显著性。血浆NO含量有升高趋势,但未达到统计学差异,各组均(P>0.05)。免疫组化方法观察心肌eNOS在小血管内皮及心肌细胞胞膜及胞浆表达。免疫荧光亦可观察到vWF在心肌血管内皮的表达。Western-blot分析药物组心肌eNOS蛋白表达增加,与对照组相比,卡托普利组、替米沙坦组差异达到显著性(P<0.05),Caspase-3蛋白有所减低,与对照组相比,福辛普利组、替米沙坦组差异达到显著性(P<0.05)。结论正常大鼠灌胃给予ACEI或ARB类药物也可降低血浆TNF-α、vWF水平并提高eNOS的含量,增加心肌组织eNOS及降低Caspase-3蛋白表达,各治疗组间作用无显著差异。

大鼠外周血晚期内皮前体细胞体外培养研究

目的体外培养大鼠外周血内皮前体细胞(EPCs),观察细胞克隆形态并进行鉴定。方法密度梯度离心法分离SD大鼠外周血单个核细胞,EGM-2培养基离体培养。免疫荧光染色鉴定细胞CD34、CD31、CD133、FLk-1、vWF细胞表面标志。Real-TimePCR检测细胞CD34、CD133、FLk-1、eNOSmRNA表达。结果细胞培养10天后可见"铺路石样细胞"和少数"紊乱生长细胞",传代培养后经免疫荧光及Real-TimePCR鉴定"铺路石样细胞"符合晚期EPCs特点,紊乱生长细胞不表达相应标志。结论通过体外分离长时培养可从大鼠外周血获得晚期内皮前体细胞,具有内皮细胞的特征。