体外循环前后血清的差异蛋白质组学研究

目的研究体外循环(CPB)相关病理状态的分子机制,筛选出心脏手术患者CPB前后血清中的差异表达蛋白质。方法采用双向凝胶电泳技术(two-di mensional gel electrophoresis,2-DE),分别分离16例心脏手术患者CPB开始前30 min、CPB结束后1 h和24 h的血清蛋白质,PDQuest识别差异蛋白质点,再用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱进行分析,数据库查询后对差异蛋白质点进行鉴定,然后应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedi mmunosorbent assay,ELISA)检测差异表达蛋白质——血清淀粉样蛋白A(serumamyloid A protein,SAA)在健康人、心脏手术患者CPB前后血清中的表达情况。结果采用2-DE联合质谱技术最终成功鉴定了7种差异蛋白质,即SAA、触珠蛋白(Haptoglobin,HPT)、富亮氨酸α-2糖蛋白(Leucine-rich alpha-2-glycoprotein,A2GL)、血红蛋白β亚基(Hemoglobin subunit beta,HBB)、丝氨酸/苏氨酸-蛋白磷酸酶2A调节亚基-β亚基-γ(Serine/threonine-proteinphosphatase 2Aregulatory subunit B″subunit gamma,P2R3C)、转甲状腺素蛋白(Transthyretin,TTHY)、T-合成蛋白11-类蛋白2(T-complex protein 11-like protein 2,T11L2)。ELISA分析结果显示:心脏手术患者与健康人CPB前30 min血清中SAA的表达水平差异无统计学意义(t=-1.955,P=0.056),心脏手术患者血清中SAA表达水平由CPB开始前30 min的54.47±48.32μg/ml上升到CPB结束后24 h时的1 017.78±189.92μg/ml。结论SAA、HPT、A2GL、HBB、P2R3C、TTHY、T11L2可能是CPB相关病理状态的分子标记物;机体在CPB后会发生强烈的急性期反应。