Grb7蛋白SH2结构域的表达及其纯化的方法

目的:探讨Grb7蛋白SH2结构域的表达及其纯化的方法。方法:将Grb7蛋白SH2结构域编码基因与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签编码基因构建为融合基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆酶切位点EcoRⅠ与XhoⅠ之间,挑选测序正确的质粒将其转染至BL 21感受态细胞内,感受态细胞于37℃摇培至其OD值达到0.6～0.8后,经0.2 mmol/L IPTG 25℃过夜诱导表达融合蛋白,MALDI-TOF质谱检测蛋白纯化产物,SPR生物传感器(Biacore 3000)检测纯化蛋白与天然配体磷酸化肽段的相互作用。结果:GST-Grb7 SH2结构域融合蛋白在裂解菌液的上清液中存在,500 ml LB/Amp菌液可纯化得到415μg GST-Grb7 SH2结构域融合蛋白,MALDI-TOF质谱图上可见明显目的蛋白峰,Biacore 3000检测到纯化蛋白可结合不同浓度的磷酸化肽段配体。结论:运用改进的GST融合蛋白纯化方法可得到具有一定纯度及生物学活性的GST-Grb7 SH2结构域融合蛋白,为该蛋白结构域后续功能研究奠定了基础。

汉族与朝鲜族人群体循环血管阻力及相关因素的比较

本文比较了牡丹江、海林地区汉族与朝鲜族人群体循环血管阻力（systemic vascular resistance,SVR）差异及相关影响因素。采用BIOZ无创血流动力学心功能监护仪,检查了1647名汉族和876名朝鲜族人SVR、体循环血管阻力指数（systemicvascular resistance index,SVRI）、收缩压（systolic blood pressure,SBP）、舒张压（diastolic blood pressure,DBP）、平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）、心输出量（cardiac output,CO）、心指数（cardiac output index,CI）和心率（heart rate,HR）。采用SPSS15.0软件统计分析所得数据。结果表明汉族人群男性和女性SVR/SVRI分别低于同性别、同年龄组朝鲜族人群。t检验比较两民族之间的差异,结果显示：（1）SVR存在统计学差异的组别有：男性4150、5160、6170岁组（P〈0.001）,3140岁组（P〈0.01）,1930岁组（P〈0.05）;女性1518、3140、5160岁组（P〈0.001）,4150岁组（P〈0.01）,6170岁组（P〈0.05）。（2）SVRI存在统计学差异的组别有：男性4150、5160岁组（P〈0.05）;女性1014、5160岁组（P〈0.001）,1518、3140岁组（P〈0.01）,4150岁组（P〈0.05）。协方差分析表明,排除了性别、年龄、体重指数（body mass index,BMI）等因素的影响后,两民族之间SVR/SVRI仍然存在统计学差异（P〈0.001）。多元线性回归显示：对两民族之间SVR差异影响的贡献大小依次为MAP、DBP、CI、SBP、HR;对SVRI差异的影响强弱依次为MAP、DBP、SBP、CI、HR。以上结果表明,SVR/SVRI的升高与朝鲜族血压高于汉族有关。