前列腺素E2和白三烯B4对口腔癌促进作用的研究

目的通过在DMBA诱导的金黄地鼠口腔癌颊囊模型上,局部应用白三烯B4(LTB4)或前列腺素E2(PGE2),探讨LTB4和PGE2在口腔癌形成中的作用,进一步阐明口腔癌的发病机制。方法用DMBA涂抹金黄地鼠左侧颊囊粘膜4周,第五周开始分别局部涂抹LTB4和PGE220周,处死动物,取全部颊囊进行肉眼观察计数和组织学检查,并进行统计学分析。结果LTB4+DMBA组癌变率为51.4%(18/35);PGE2+DMBA组癌变率为45.7%(16/35),均显著高于DMBA组20.0%(7/35)。另外两组不使用DMBA启动,同时局部分别涂抹LTB4和PGE220周,两组均有异常增生发生,但是没有癌变。结论PGE2和LTB4是口腔癌形成的促进剂,并且有可能成为化学预防作用的重要靶点。

壳聚糖用于乳牙活髓切断的临床研究

目的 :研究壳聚糖作为乳牙活髓切断盖髓剂的临床疗效。方法 :选取我院儿科合作患儿临床明确诊断为深龋 ,牙根处于稳定期的乳磨牙 75颗 ,随机分为试验组 (壳聚糖组 ) 4 5颗及对照组 (氢氧化钙组 ) 35颗 ,行活髓切断术。于术后 2周、1、3、6、12个月复查 ,内容包括临床检查、电活力测试及X线检查。结果 :临床疗效 :壳聚糖组优 72 2 2 % ;良 2 2 2 2 % ;失败5 5 6 % ,综合判效成功率为 94 4 4 %。氢氧化钙组优 5 0 % ;良 2 0 % ;失败 30 % ,综合判效成功率为 70 %。二者间有显著性差异。异常根吸收 ,壳聚糖组 (13 89% )少于氢氧化钙组 (4 0 % ) ,两组间有显著性差异。钙化屏障壳聚糖组 (4 4 4 4 % )与氢氧化钙组 (6 0 % )差别无统计学意义。结论 :用壳聚糖做乳牙活髓切断盖髓剂 ,可保持根髓活力 ,很少引起牙根吸收 。

WDR63促进人根尖牙乳头干细胞成神经分化功能

目的:研究WD重复结构域63(WDR63)对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)体外成神经分化能力的作用。方法:通过实时荧光定量PCR检测未转染慢病毒SCAPs中WDR63基因在成神经分化诱导3、6、9 d的表达变化,利用慢病毒转染分别获得WDR63稳定过表达和敲低的SCAPs,通过类神经球形成实验对各组SCAPs进行神经分化诱导,对类神经球的直径进行定量分析,免疫荧光染色实验检测SCAPs中巢蛋白(Nestin)和βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)的表达,实时荧光定量PCR实验检测神经分化相关指标βⅢ-tubulin、神经源性分化蛋白(NeuroD)、神经细胞黏附分子(NCAM)和Nestin基因的表达。结果:未转染慢病毒SCAPs中WDR63的表达量在成神经分化后的3、6、9 d逐渐增加(P<0.05);过表达WDR63后,WDR63基因(P<0.001)和蛋白表达增加,神经球直径增加(P<0.01),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度增加(P<0.01),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达升高(P<0.05);敲低WDR63后,WDR63基因(P<0.01)和蛋白的表达降低,神经球直径降低(P<0.05),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度减少(P<0.05),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达降低(P<0.05)。结论:WDR63可促进SCAPs的成神经分化功能。

miR⁃615⁃3p通过负调控FBLN1的表达抑制脂肪干细胞成骨分化

目的:探讨miR-615-3p及其靶基因纤维蛋白1(FBLN1)在脂肪干细胞(ADSCs)成骨分化中的作用及其相互调控机制。方法:利用慢病毒转染ADSCs分别敲低miR-615-3p及过表达FBLN1,Western blot和实时荧光定量PCR检测miR-615-3p敲低效率和FBLN1过表达效率以及敲低miR-615-3p后FBLN1的表达,通过碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色检测敲低miR-615-3p和过表达FBLN1对ADSCs的成骨分化能力的影响,通过实时荧光定量PCR检测敲低miR-615-3p和过表达FBLN1 ADSCs成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白-1(DMP1)的基因表达,通过Western blot检测敲低miR-615-3p和过表达FBLN1后ADSCs DMP1和DSPP蛋白表达。结果:敲低ADSCs中miR-615-3p后,miR-615-3p基因表达降低,ALP活性升高(P<0.05),矿化结节增多,OSX、DMP1、DSPP基因表达水平上升(P<0.05),DMP1、DSPP蛋白表达升高。低表达miR-615-3p的ADSCs中FBLN1表达升高。过表达FBLN1后,ADSCs中FBLN1蛋白和基因表达升高,ALP活性升高(P<0.05),矿化结节增多,OSX、DMP1、DSPP基因表达水平上升(P<0.05),DMP1、DSPP蛋白表达升高。结论:miR-615-3p通过下调FBLN1抑制ADSCs的成骨分化。

佳洁士含三氯生牙膏和佳洁士防蛀修复牙膏抑菌作用的比较研究

目的:比较佳洁士含三氯生牙膏和佳洁士防蛀修复牙膏的抑菌效果及作用时间。方法:选用变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌等为实验菌株,用微孔板微量液体稀释法对两种牙膏进行细菌敏感实验,比较二者对不同菌株的最低抑菌浓度(M IC);并选择22名受试者,在晚间和清晨分别使用两种牙膏按指定方法刷牙后,观察两种牙膏抑菌作用的持续时间。结果:①含三氯生牙膏对5种菌的抑菌浓度均低于防蛀修复牙膏。②22名受试者使用含三氯生牙膏刷牙后,清晨抑菌作用保持率为81.8%,日间检出率下降,为40.9%;防蛀修复组抑菌作用保持率为0。统计学差异具有显著性意义。结论:佳洁士含三氯生牙膏抑菌作用较强,使用后能持续发挥抑菌作用,其夜间抑菌作用优于日间。

新型含氟正畸托槽对变形链球菌抑制性的实验研究

目的研究新型含氟正畸托槽对主要致龋菌变形链球菌生长繁殖的抑制性,探讨新型含氟正畸托槽对正畸固定矫治中牙釉质脱矿的预防作用。方法将新型含氟正畸托槽浸泡在去离子水中,每24h换液1次,留取2～5d的浸泡液,然后将浸泡液与变形链球菌菌悬液同时加入变形链球菌液体培养基中,厌氧培养后,观察菌悬液的光密度OD值变化。再将测过OD值的菌悬液经过固体培养基培养观察菌落数(CFU)。结果2、3、4d所得的含氟正畸托槽24h浸泡液经细菌培养后OD值与对照组相比,OD值减小且差异非常显著,5dOD值与对照组相比也减小,但差异无统计学意义。而菌落数的变化只是2、3d的与对照组相比,数目减少并且差异有统计学意义,4、5d的与对照组相比,数目也减少但差异无统计学意义。结论新型含氟正畸托槽在一定时间内对变形链球菌有抑制作用,其在正畸临床治疗中预防牙釉质脱矿的作用尚待进一步研究。

小型猪拔牙创愈合的组织学研究

目的了解小型猪拔牙窝愈合的基本特征,观察愈合过程中成骨细胞及破骨细胞的分布规律。方法拔除小型猪相邻的两颗前磨牙,分别于拔除后即刻、4、7、14、30及60天处死动物,获取标本后脱钙,制作组织切片,HE染色,光镜观察不同时间点的拔牙窝组织学变化。采用Image-ProAnalyzer 7.0图像分析系统对颊、舌侧骨板的成骨、破骨细胞进行计数分析。结果拔牙后第4天拔牙窝底部可见较多的破骨细胞;拔牙后第7天骨板内外侧已经有类骨质形成,破骨细胞向方迁移;拔牙后第14天成骨活动十分活跃,仅舌侧骨板还可观察到少量破骨细胞;拔牙后30天拔牙窝内已充满板层骨,哈弗氏系统丰富;60天后拔牙窝内组织学形态接近正常牙槽骨。结论小型猪拔牙窝愈合过程中组织学特征与人类及其它种属相似,但愈合速度更接近人类,小型猪是研究拔牙窝愈合及牙槽突改建较理想的动物模型。

氯己定凝胶和氢氧化钙糊剂抑菌作用的对比研究

目的:研究氯己定凝胶(CHX)、氢氧化钙糊剂(CH)及其混合物(CHX+CH)对粪肠球菌、牙龈卟啉单胞菌、伴放线放线杆菌、微小小单胞菌的抑菌作用。方法:采用琼脂扩散法测量CHX、CH及CHX+CH的抑菌圈;将以上4种细菌悬液分别稀释成1.5×10~8、3×10~8、6×10~8、9×10~8、12×10~8、15×10~8CFU/mL不同浓度,通过直接接触法比较各药物的抑菌效果,并用Kruskal-Wallis检验进行统计分析。结果:抑菌圈从大到小依次为:CHX、CHX+CH、CH(各药物间相比,P<0.05);对粪肠球菌的抑制效果为:CHX+CH>CHX>CH,而对牙龈卟啉单胞菌、伴放线放线杆菌及微小小单胞菌的抑菌效果为:CHX>CH>CHX(各药物间相比,P<0.05)。结论:氯己定凝胶扩散作用最强,氯己定凝胶和氢氧化钙糊剂混合物直接接触抑菌作用最强。

美国国立卫生研究院学生暑期的实习制度

美国国立卫生研究院(NIH)是美国进行和支持医学研究的首要联邦机构,在提高人类健康和增加人类寿命方面做出了很大贡献。NIH除了医学研究之外,在人才培养方面还建立了一套行之有效的制度,包括对当代及下一代的研究人员进行培训以确保医学研究继续强有力的进行下去。其中针对包括医学及牙科学生在内的暑期学生培训制度,给学生提供了一个在暑期和世界顶尖科学家在无外界干扰的环境里心无旁鹫地一起进行生物医学研究工作的机会,激发优秀人才进行科学研究的兴趣,培养出潜在的优秀科研工作者,这是值得我们借鉴的地方。

长链非编码RNA对间充质干细胞定向分化调控作用的研究进展

长链非编码RNA(LncRNA)参与多种细胞分化与发育,在X染色体失活、肿瘤、免疫系统、神经系统和心血管系统疾病等多种生物学过程和疾病的调控起着重要的作用。然而,关于lncRNA在间充质干细胞的生物发生和分化中的关键作用及机制探讨较少。本文就lncRNA在调节间充质干细胞中的作用,包括脂肪分化、成肌分化、成血管分化和成神经分化等细胞分化进行了综述,并探讨了lncRNA作为疾病治疗靶点的的潜在应用价值。

牙龈卟啉单胞菌血凝素2与血红素结合多肽的免疫原性研究

目的探究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)血凝素2(hemagglutinin-2,HA2)与血红素结合的多肽片段作为抗原的免疫原性。方法 SD(Sprague Dawley)雄性大鼠随机分成三组,多肽免疫组:多肽片段(DGFPGDHYAVMISK)与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,使其乳化,颈背部皮下注射多肽乳化物0.2 ml;佐剂对照组:颈背部皮下注射佐剂0.2 ml;磷酸盐缓冲液(PBS)对照组:颈背部皮下注射PBS 0.2 ml。在第0、35、49天取唾液以及内眦取血,用间接ELISA法检测血清及唾液抗体,评估多肽片段的免疫原性。结果多肽免疫组产生的大鼠血清抗体效价为1∶9 600,唾液抗体效价为1∶1 200,高于PBS及佐剂对照组;多肽免疫组大鼠血清Ig G的A450nm值为(1.592±0.416),佐剂对照组大鼠血清Ig G的A450nm值为(0.121±0.027),PBS对照组大鼠血清Ig G的A450nm值为(0.116±0.024)。多肽免疫组大鼠血清Ig G分别与佐剂对照组、PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多肽免疫组唾液的s Ig A的A450nm值为(0.514±0.056),佐剂对照组唾液的s Ig A的A450nm值为(0.120±0.028),PBS对照组唾液的s Ig A的A450nm值为(0.121±0.021),多肽免疫组唾液s Ig A分别与佐剂对照组、PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论多肽免疫提高大鼠血清及唾液的抗体水平,其免疫策略为牙周炎的免疫研究提供了基础。

SFRP2对脂肪干细胞成骨分化的作用研究

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)对脂肪干细胞(ADSC)成骨分化的影响。方法:利用重组慢病毒载体的SFRP2 shRNA基因敲除ADSC中SFRP2进行丧失性功能研究;利用HA-SFRP2逆转录病毒载体过表达SFRP2进行获得性功能研究;定量RT-PCR和Western Blot检测基因表达;碱性磷酸酶活性(ALP)测定、茜素红染色、钙离子定量以及定量RT-PCR检测脂肪干细胞的体外成骨分化能力。结果:定量RT-PCR和Western Blot显示SFRP2sh可以在ADSC中有效的抑制SFRP2的表达;ALP、茜素红和钙离子定量结果显示敲除SFRP2能明显抑制ADSC体外成骨分化能力;定量RT-PCR结果显示敲除SFRP2抑制骨涎蛋白(BSP)、Osterix(Osx)和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达;定量RT-PCR和Western Blot显示HASFRP2可以在ADSC中有效的过表达;ALP、茜素红和钙离子定量结果显示过表达SFRP2能明显促进ADSC体外成骨分化能力;定量RT-PCR显示过表达SFRP2明显促进BSP的表达。结论:SFRP2促进脂肪干细胞的体外成骨分化功能。

基于可溶性胶原的牙周缓释剂体外抑菌对照实验研究

目的:研究可溶性胶原作为缓释材料的牙周缓释剂对4种牙周致病菌的抑菌作用,为研制安全有效的牙周缓释剂提供实验基础。方法:制备可溶性胶原二甲胺四环素、环丙沙星缓释剂,并将药物等比稀释至10个浓度。测量缓释剂对牙龈卟啉单胞菌、中间型普氏菌、具核梭杆菌、粘性放线菌的最低抑菌浓度(MIC),用钢管法测量缓释剂的抑菌环直径。结果:环丙沙星组对4种菌株的最低抑菌浓度小于0.009mg/mL,二甲胺四环素组对4种菌株的最低抑菌浓度小于0.003mg/mL,且在药物浓度较低时(<0.009mg/mL),胶原浓度相同(2%)的环丙沙星组和二甲胺四环素组相比,二甲胺四环素组对4种牙周致病菌的抑菌能力普遍要高于环丙沙星组。对于牙龈卟啉单胞菌,药物浓度小于0.781mg/mL时,可溶性胶原缓释剂组的抑菌能力高于盐酸米诺环素软膏(派丽奥)(P<0.05)。对于中间型普氏菌,当药物浓度大于2.344 mg/mL时,胶原浓度为3.5%的二甲胺四环素组抑菌作用最强,且在药物浓度逐渐降低后(<0.086mg/mL),盐酸米诺环素组的抑菌能力低于可溶性胶原二甲胺四环素组(P<0.05)。对于具核梭杆菌和粘性放线菌,也出现了在药物浓度较低时(<0.009mg/mL),可溶性胶原二甲胺四环素组的抑菌作用要高于盐酸米诺环素组(P<0.05)的现象。结论:可溶性胶原二甲胺四环素组具有比可溶性胶原环丙沙星组更强的抑菌作用。可溶性胶原缓释剂具有良好的抑菌作用,且在药物浓度降低时,可溶性胶原良好的缓释作用保证了牙周缓释剂稳定的抑菌效能。

SIRT6在骨代谢中的作用研究进展

Sirtuin6(SIRT6)属于Sirtuin家族,具有去乙酰化酶和ADP-核糖基转移酶活性,在骨代谢、基因稳定、葡萄糖代谢、脂质代谢、炎性介质调控、肿瘤发生中发挥关键作用。本综述主要总结了SIRT6在骨代谢中的作用及其相关的分子信号通路。

乳牙急性根尖周脓肿细菌的DGGE分析

目的用PCR-DGGE方法分析乳牙急性根尖周脓肿细菌,以期进一步阐明乳牙急性根尖周脓肿细菌病因学特点。方法采取乳牙急性根尖周脓肿脓液,提取细菌总DNA,采用通用引物对细菌16S rRNA基因的V2-V3区进行扩增,PCR产物进行变性梯度凝胶电泳,切取电泳的条带进行DNA回收,PCR再次扩增后进行克隆测序,鉴定细菌,分析细菌组成。结果乳牙急性根尖周脓肿优势菌的检出从高到低依次是普雷沃菌90.9%,梭杆菌81.8%,消化链球菌63.6%,卟啉单胞菌45.5%,链球菌45.5%,真杆菌45.5%,乳酸杆菌27.3%,弯曲菌27.3%,密螺旋体27.3%,布雷德菌27.3%。结论乳牙急性根尖周脓肿细菌存在个体差异,某些特定细菌以较高频率存在。细菌16S rRNA基因PCR-DGGE,切胶,克隆测序方法除检测出培养法检出的细菌外,还检出难培养的和未预料到的细菌。

大黄甲壳胺牙周缓释膜抑菌作用的实验室观察

目的观察大黄甲壳胺牙周缓释膜的抑菌、缓释和解吸附功能。方法选择与牙周及龋病相关致病菌,用杯碟法进行细菌敏感稳定性试验和用附着板法观察大黄甲壳胺牙周缓释膜抑菌作用的稳定性及解吸附作用。结果大黄甲壳胺药膜对牙龈卟啉单胞菌等几个菌种有明显抑菌作用;药膜4℃存放半年后,仍有明显的抑菌作用。0.16%～0.48%药膜完全溶解有抗变形链球菌附着作用。结论大黄甲壳胺牙周缓释膜对牙周致病菌有稳定的抑制作用,对变形链球菌有解吸附作用。

甲硝唑含漱剂体外抗菌活性试验和临床疗效观察

选择以甲硝唑为主药制成抗厌氧菌感染的含漱剂，较口服甲硝唑片副作用低，用量小，作用迅速；其体外抗菌活性试验表明对口腔内有关厌氧菌有效强的抑菌作用；在临床验证中对牙龈炎、牙周炎治疗效果总有效率达９１．１％。冠周炎有效率１００％；细菌学效果观察表明厌氧菌及兼性厌氧菌数明显下降。

构建逆转录病毒pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及稳定转染细胞

目的:构建pQCXIH-HA-FBXL11逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11的稳定转染细胞。方法:以牙髓干细胞的cDNA为模板,利用PCR方法扩增目的基因FBXL11,PCR产物纯化回收、连接、酶切、测序鉴定,构建pQCXIH-HA-FBXL11质粒。利用FuGENE6转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法和实时荧光定量PCR法在蛋白及mRNA水平检测HA-FBXL11的表达。利用逆转录病毒感染牙髓间充质干细胞。结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pQCXIH-HA-FBXL11,蛋白及mRNA水平检测证实其在293T细胞可以有效的表达。成功建立了过表达HA-FBXL11的牙髓间充质干细胞稳定转染细胞。结论:通过构建pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11稳定转染细胞,为进一步研究FBXL11对间充质干细胞的功能调控奠定了基础。

过表达BCOR基因抑制根尖牙乳头干细胞成肌分化

目的:研究B细胞淋巴瘤因子6共抑制因子(BCL6co-repressor,BCOR)对根尖牙乳头干细胞成肌分化能力的影响。方法:利用HA-BCOR逆转录病毒载体过表达BCOR进行获得性功能研究;Western Blot检测HA-BCOR的过表达效果;重组人肿瘤生长因子β1(TGF-β1)蛋白诱导根尖牙乳头干细胞体外成肌分化;通过检测成肌分化相关基因smoothened(SMO)、smooth muscle actin alpha2(ACTA2)和caldeson(CALD1)的表达研究根尖牙乳头干细胞体外成肌分化能力。结果:Western Blot结果显示HA-BCOR可以在根尖牙乳头干细胞有效的过表达;过表达BCOR抑制根尖牙乳头干细胞成肌分化相关基因SMO和CALD1的表达。结论:过表达BCOR基因抑制根尖牙乳头干细胞体外成肌分化,证实BCOR是根尖牙乳头干细胞成肌分化的抑制基因。

低氧对间充质干细胞线粒体能量代谢影响的研究进展

低氧是细胞常见的一种氧化应激状态,影响细胞的能量代谢过程,而线粒体是细胞内能量产生的重要部位。近来研究还发现线粒体在调控间充质干细胞(MSCs)功能方面具有重要作用。本文就低氧对MSCs线粒体能量代谢的影响及相关机制进行综述。