基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱技术与网络药理学揭示金银花与忍冬叶化学成分差异及抗衰老机制

目的:探讨金银花醇提物(ethanol extract of Lonicera japonica flos,EELF)与忍冬叶醇提物(ethanol extract of L.japonica leaves,EELL)化学成分差异、抗衰老潜在活性成分及机制。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole electrostatic field orbitrap mass spectrometry,UPLC-QE-Orbitrap-MS)测定EELF和EELL,解析两者间化学成分差异。采用含不同质量浓度EELF和EELL的Escherichia coli OP50菌液喂养秀丽隐杆线虫,考察线虫寿命、运动能力、生殖能力、抗氧化应激能力等指标变化。通过网络药理学探究其抗衰老的潜在作用机制。结果:EELF和EELL中共鉴定出122种化合物,有机酸类化合物35种、黄酮类化合物27种、环烯醚萜类化合物37种、其他化合物23种。EELF和EELL化学成分组成大致相同,绿原酸、总酚酸等含量也大致相同,EELL中总黄酮、异绿原酸C和木犀草苷含量显著高于EELF,而异绿原酸A含量显著低于EELF。不同质量浓度的EELF和EELL均能提高线虫抗氧化应激及热应激能力、延长线虫的寿命、提高线虫运动与生殖能力,并降低活性氧与脂褐素水平。共筛选出EELF和EELL中16个潜在活性成分和抗衰老潜在靶点59个,核心靶点有信号转导和转录激活因子3、丝氨酸/苏氨酸激酶1、表皮生长因子受体、类固醇受体辅激活因子、胱天蛋白酶3、肿瘤坏死因子等;主要通过癌症通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路、血脂与动脉粥样硬化等通路发挥抗衰老作用。结论:EELF和EELL具有相似的化学成分,发挥着相似的抗衰老作用,具有多途径、多靶点的特性,本研究可为其深度开发利用提供参考。

重楼产地加工及切制工艺研究

目的:确定重楼适宜的产地加工及切制工艺。方法:以外观性状和重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、D、H,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷9个皂苷含量及总含量为指标,对不同批次鲜重楼分别采取自然晒干、冷冻干燥及不同温度的鼓风干燥进行加工,优选鲜重楼药材产地加工工艺;并以上述指标优化重楼饮片适宜的切制工艺。结果:鲜重楼适宜的产地加工工艺为将重楼鲜药材流水清洗,晾晒至表面无水,50~65℃鼓风干燥。其适宜的炮制切制工艺为初次向重楼药材喷洒清水65%~75%,闷润,每隔12h加水5%,待药材完全软化后,切厚片,50~65℃鼓风干燥。结论:重楼在产地加工及切制后干燥时,均应低温干燥;所优化的工艺操作简便、稳定可行,并为重楼产地加工及饮片生产提供一定的理论基础与应用价值。