CD4＋CD25＋调节性T细胞参与大鼠角膜移植免疫耐受的研究

目的探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受时CD4＋CD25＋调节性T细胞在眼局部及全身的表达情况。方法本实验采用对照设计，以13只SD大鼠作为供体，26只Wistar大鼠作为受体建立高危穿透性角膜移植模型。所有受体大鼠抽签法随机分为2组，对照组和SEB组分别腹腔注射生理盐水和SEB（75μg/kg体重），1次／4d，共3次，末次注射后1d行右眼穿透性角膜移植术。术后观察大鼠角膜植片的存活时间，并采用免疫荧光染色分析CD4＋CD25＋T细胞在大鼠角膜植片和虹膜的表达，使用流式细胞学方法分析外周血中的CD4＋CD25＋T细胞百分数。结果对照组大鼠角膜植片平均存活时间为（11．63±2．83）d，SEB组为（14．13±0．99）d，两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。组织病理学检查可见发生排斥的角膜植片有大量炎性细胞浸润，炎性细胞数量与排斥反应程度呈正相关性。直接免疫荧光染色检查可见术前两组角膜组织均不表达CD4＋CD25＋T细胞，而术后20d两组均有表达。虹膜铺片直接免疫荧光染色检查术前对照组未见CD4＋CD25＋T细胞表达，而SEB组（首次注射SEB后第10天）虹膜片可见CD4＋CD25＋T细胞表达，术后第20天两组大鼠虹膜铺片均可见CD4＋CD25＋T细胞表达，并且SEB组阳性细胞数更多。流式细胞学方法分析显示手术前后、对照组大鼠外周血中CD4＋CD25＋T细胞的百分数无变化，而SEB组呈先升高、后降低的变化趋势。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞参与超抗原SEB诱导大鼠高危角膜移植术后免疫耐受的形成。