中药舒肝凉血方改善乳腺癌患者潮热的临床研究

目的观察中药舒肝凉血方对服用三苯氧胺的乳腺癌患者潮热的改善情况。方法选择2004年10月—2006年11月乳腺癌诊断明确,服用三苯氧胺(他莫西芬tamoxifen,TAM)出现潮热症状的患者73例,随机分为治疗组(37例)和对照组(36例),治疗组予中药舒肝凉血方,对照组予安慰剂。观察潮热及睡眠改善情况。以治疗前1周每日平均潮热次数及睡眠情况作为基线。采用国际认可的Kupperman评分方法,比较治疗前后潮热及睡眠改善情况。结果可评价病例66例,治疗组33例,对照组33例。潮热症状减轻情况:治疗组潮热症状消失5例(15.2%),减轻14例(42.4%),无变化14例(42.4%);对照组无患者症状消失,减轻10例(30.3%),无变化23例(69.7%)。两组比较,差异有统计学意义(P=0.012)。睡眠改善情况:治疗组睡眠改善21例(63.6%),无变化12例(36.4%);对照组睡眠改善13例(39.4%),无变化20例(60.6%)。两组比较,差异有统计学意义(P=0.002)。结论中药舒肝凉血方可减轻服用三苯氧胺乳腺癌患者的潮热症状并改善睡眠情况。

DNA修复基因XRCC1基因多态性与乳腺癌临床病理参数的相关性

目的:研究XRCC1基因Arg194Trp和Arg399Gln多态性与中国女性乳腺癌临床病理参数的关系,探讨其在乳腺癌预后中的潜在意义。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,对250例原发性乳腺癌患者进行XRCC1基因Arg194Trp、Arg399Gln多态性分析,用Pearsonχ2检验分析基因型与临床病理特征的关系。结果:XRCC1基因Arg194Trp和Arg399Gln多态性与乳腺癌患者的月经状态、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、TNM分期、雌激素受体均无显著相关性(P>0.05)。但该多态位点与乳腺癌患者的孕激素受体(PR)状态和C-erbB2蛋白表达显著相关。携带194纯合突变型的患者PR阴性率(81.0%)显著高于携带194野生型和杂合型患者(55.4%),(P=0.034);携带399纯合突变型的患者C-erbB2蛋白表达阳性率(61.1%)显著高于携带399野生型和杂合型的患者(29.3%),(P=0.006)。结论:PR阴性和(或)C-erbB2高表达的乳腺癌患者常提示预后不良。XRCC1基因多态性与PR阴性或C-erbB2高表达显著相关,提示携带XRCC1纯合突变(194或399)乳腺癌患者可能预后不良。

MDM2启动子区309位点基因多态性与乳腺癌风险的关系

目的:采用病例-对照研究检测MDM2启动子区309位点T>G单核苷酸多态(SNP309)在中国女性人群中的频率分布,分析其与中国女性乳腺癌发病风险的关系。方法:提取病例组698例原发性乳腺癌患者及对照组525例健康人的外周血单核细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法,检测MDM2启动子区309位点基因多态性,确定此位点三种基因型,即T/T、T/G、G/C基因型。统计分析病例组和对照组人群MDM2 SNP309各基因型频率分布,及各基因型与乳腺癌发病风险的相关性。结果:在研究的病例组与对照组整体人群中,经年龄、月经状态、家族史及生育史等因素校正后,与MDM2 SNP309 T/T基因型比较,T/G型及G/G型与乳腺癌的发病风险无显著相关性(T/G,adjusted OR=1.2,95%CI:O.8～1.6,P=0.30;G/G,adiusted OR=I.0,95%CI:0.7～1.5,P=0.88)。进一步分层分析后显示:在绝经后人群中,与T/T基因型比较,T/G基因型及G/G基因型显著增加乳腺癌的发病风险(T/G,adjusted OR=1.8,95%CI:1.2～3.0,P=0.011;G/G,adiusted OR=1.9,95%CI:1.2～33,P=0.014)。提示绝经后人群携带T/G型、G/G型者比携带T/T基因型者患乳腺癌的风险分别升高约1.8、1.9倍。在绝经前人群中,各基因型与乳腺癌的发病风险无显著相关性(P>0.05)。结论:MDM2启动子309位点突变型G等位基因携带者显著增加绝经后女性乳腺癌的发病风险。

人uPA基因克隆和单克隆抗体的制备及其在乳腺癌中表达的检测

目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,制备腹水,纯化单克隆抗体。用Western blot、免疫组织化学等方法检测了uPA在乳腺癌中的表达。结果克隆了1 227 bp的uPA基因片段,构建了可表达uPA蛋白的原核表达质粒pET-41b-uPA;获得了3株能稳定分泌针对uPA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类均为IgG2a,它们均能特异识别uPA,与其它蛋白无交叉反应。Western blot结果显示,该抗uPA单抗与GST-His-uPA融合蛋白及细胞中的天然uPA蛋白均能结合。免疫组织化学显示,该单抗在乳腺癌低侵袭低转移细胞系MCF7中呈阴性表达,而在乳腺癌高侵袭高转移细胞系MDA231中呈阳性表达,并且能与乳腺癌组织结合,呈强阳性反应。结论克隆了人uPA基因,通过原核表达体系制备并纯化了针对uPA的单克隆抗体,初步检测了uPA在乳腺癌细胞和组织中的表达,为深入研究uPA的功能和检测临床肿瘤组织及体液中的uPA奠定了可靠的基础。

肝细胞癌射频消融后局部肿瘤进展多因素分析

目的 探讨射频消融（ radiofrequency ablation,RFA）治疗肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）后局部肿瘤进展的危险因素,为进一步优化治疗提供依据.方法 回顾性分析246例患者343个肿瘤病灶行RFA规范化治疗的临床及随访资料,统计分析影响RFA局部疗效的相关因素.结果 肝细胞癌RFA治疗后局部肿瘤进展发生率为11.4％（39/343病灶）,局部肿瘤进展发生的平均时间为12.0个月（3～28个月）.单因素分析显示肿瘤大小、边界是否清晰、是否邻近血管、RFA前是否行超声造影（contrast-enhanced ultrasound,CEUS）与射频后局部肿瘤进展相关；COX多因素分析获得的独立影响因素是：肿瘤大小（P＜0.001）、是否邻近血管（P ＜0.001）和RFA前是否CEUS（P=0.018）.结论 肿瘤大小、是否邻近血管和RFA前是否CEUS是局部肿瘤进展的独立影响因素,此结果有助于采取相应措施和策略,提高RFA疗效.

乳腺导管原位癌保乳治疗的安全性研究

目的探讨乳腺导管原位癌（ductal carc in omainsitu，DCIS）施行保乳手术的安全性。方法回顾性分析经病理证实的119例DCIS患者资料，对手术方式、年龄、肿瘤直径、ER／PR状态、HER-2状态与局部复发、远处转移的关系进行单因素及多因素分析。结果119例DCIS患者中48例接受保乳手术治疗，71例接受乳房全切治疗。随访7～132个月（中位随访时间35个月），乳房全切组胸壁复发1例，保乳组无同侧乳房内肿瘤复发病例，差异无统计学意义（P=0．384）。全切组远处转移2例，保乳组远处转移1例，差异亦无统计学意义（P=0．383）。保乳组和全切组3年无病生存率（DFS）分别为100％、94。4％，差异无统计学意义（P=0．225）。单因素分析显示年龄≤40岁是出现远处转移的高危因素（P=0．035），但多因素分析未显示其为独立影响因素（P=0．086）。结论乳腺DCIS患者实施保乳或乳房全切，其术后局部复发和远处转移的风险无明显差异。

人表皮生长因子受体2表达对腋淋巴结阳性和阴性乳腺癌患者预后的不同影响

目的 探讨人表皮生长因子受体2（Her-2）表达在腋淋巴结阳性和阴性乳腺癌患者预后中的意义.方法 采用抗Her-2单克隆抗体CB11进行免疫组化,检测981例原发性乳腺癌肿瘤组织Her-2蛋白的表达,分析其与乳腺癌预后的关系.结果 981例原发性乳腺癌Her-2蛋白的阳性表达率为19.7%（193/981）,Her-2表达水平与乳腺癌患者的发病年龄、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达状态明显相关（P〈0.05）.单因素分析显示,在腋淋巴结阳性的乳腺癌患者中,Her-2表达与预后显著相关,Her-2阳性者的5年无病生存（DFS）率和5年总生存（OS）率分别为48.8%和55.2%,Her-2阴性者分别为66.9%和76.4%,差异均有统计学意义（P〈0.01）.而在腋淋巴结阴性的患者中,Her-2表达与患者的5年DFS率和5年OS率均无显著相关性（P〉0.05）.多因素分析显示,在腋淋巴结阳性的乳腺癌患者中,Her-2表达水平是影响乳腺癌OS的独立因素,但不是影响乳腺癌DF5的独立因素.结论 在腋淋巴结阳性乳腺癌患者中,Her-2表达水平是重要的预后因素.

凋亡相关基因Fas-1377和Fas-670基因多态对乳腺癌预后的影响

目的探讨Fas-1377和Fas-670基因的多态性与中国女性乳腺癌患者预后之间的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法，检测310例中位随访时间达10．5年的原发性乳腺癌患者Fas-1377和Fas-670基因的多态性，分析其与乳腺癌预后的关系。结果Fas-1377和Fas-670基因的多态性与仝组乳腺癌患者的预后尢冠著的相关性（P〉0．05）。在腋淋巴结阴性的患者中，Fas-1377基因多态性与乳腺癌患者的预后屁著相关，AA纯合突变型患者的5年总生存率（OS）显著低于GA和GG基因型者（66．7％：95．4％，P=0．03）；而Fas-670基因多态性与腋淋巴结阴性患者的预后无显著的相关性（P〉0．05）。在腋淋巴结阳性的患者中，Fas-1377和Fas-670基因的多态性与患者的5年OS均无显著的相关性（均P〉0．05）。结论在腋淋巴结阴性的乳腺癌患者中，Fas-1377基因多态具有潜在的预后价值，携带Fas-1377AA基因型的乳腺癌患者预后不良。

BRCA1和APC基因异常甲基化与乳腺癌蒽环类新辅助化疗疗效的相关性

目的探讨原发性乳腺癌肿瘤组织中BRCA1和APC基因启动子区甲基化状况与新辅助化疗疗效的相关性。方法应用甲基化特异PCR方法，对140例原发性乳腺癌患者术前穿刺样本进行BRCA1和APC基因启动子甲基化状态检测，分析其与新辅助化疗疗效的相关性。结果140例原发性乳腺癌患者接受蒽环类新辅助化疗后，病理完全缓解（pCR）率为21．4％（30／140），BRCA1和APC基因启动子甲基化率分别为21．4％（30／140）和18．3％（24／131）。在110例BRCA1基因非甲基化患者中，pCR率为25．5％（28／110）；在30例BRCA1基因甲基化患者中，pCR率为6．7％（2／30），差异有统计学意义（X^2=4．94，P=0．026）。APC基因甲基化状态与患者的pCR率之间无显著相关性（P〉0．05）。结论在原发性乳腺癌患者中，BRCA1基因非甲基化者更容易获得pCR，检测BRCA1基因甲基化状态对评判原发性乳腺癌新辅助化疗疗效可能具有一定的指导意义。

BRCA1和BRCA2的始祖突变

BRCA1和BRCA2的突变与乳腺癌和卵巢癌的发生密切相关。BRCA1和BRCA2的始祖突变多种多样，而且在不同民族、不同地域的人口中突变类型和频率不尽相同。在特定的人口中，始祖突变由于存在始祖效应，其发生率较高。与昂贵的全基因扫描相比，始祖突变检测更加方便、经济和易于普及，能为相关癌症的预防和治疗提供信息。