GFRa1不同剪接变异体mRNA在胃癌及结肠癌组织中的表达

为检测正常胃粘膜及胃癌组织和正常结肠及结肠癌组织中GFRa1 m RNA表达量,以及两种剪接体GFRa1a和GFRa1b的m RNA含量。初步明确胃及结肠组织中GFRa1剪接体存在形式以及与胃癌、结肠癌发生的相关性。采用收集23例正常胃粘膜/胃炎组织、20对胃癌及其切缘组织和6例非癌患者正常结肠活检组织、20对结肠癌及其切缘组织的方法。选择并提取结肠癌细胞系RKO,正常人胃粘膜上皮细胞系GES-1和人胃癌细胞SGC-7901这3种细胞系的RNA。以Alu m RNA为内参照,用定量RT-PCR的方法对胃组织、结肠组织以及所选的细胞系中GFRa1总m RNA含量进行分析。运用DHPLC技术区分GFRa1不同的剪接体,定量测定两种转录本剪接体的比值。结果显示,胃及结肠组织中,与正常及癌组织相比,切缘组织GFRa1总m RNA、剪接体a及剪接体b的m RNA相对拷贝数均显著增加(P<0.05)。所有组织中GFRa1剪接体b的m RNA相对拷贝数均高于剪接体a。细胞系RKO、GES-1和SGC-7901均检测到GFRa1剪接体b的表达,而未检测到剪接体a。由此可知,胃和结肠组织以及相应的细胞系中GFRa1主要以剪接体b的形式存在;GFRa1剪接体b的高表达可能在胃及结肠组织癌变过程发挥作用。

人群胃黏膜不确定性异型增生和异型增生组织p16甲基化及与幽门螺杆菌等暴露因素相关分析

目的：比较胃黏膜不确定异型增生和异型增生组织p16基因甲基化状态，分析其与幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染等暴露因素的相关关系。方法：选取我国北方胃癌高发区（山东省临朐县）223例不确定性异型增生和130例异型增生胃黏膜，采用甲基化特异性聚合酶链反应和变性高效液相色谱技术，测定p16基因CpG岛甲基化状态，并与年龄、性别、吸烟、饮酒、Hp感染进行多因素分析。结果：胃黏膜不确定性异型增生和异型增生p16甲基化阳性率分别为28．3％和24．6％（P=0．46）。p16甲基化与年龄、性别、吸烟、饮酒均不存在相关关系（P〉0．10）。单因素分析发现，在异型增生组织中p16甲基化与Hp感染接近统计学相关（P=0．07），Hp阳性者（93例）甲基化相对危险度高于阴性者（37例）（OR=2．62，95％CI：0．92—7．43），多因素分析则二者无统计学关联（P=0．11）。结论：胃黏膜不确定性异型增生与异型增生p16甲基化频率相似；p16甲基化与年龄无相关关系：Hp感染可能与p16甲基化密切相关。