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尤文肉瘤基因免疫治疗的研究 被引量:8
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作者 郭义 郭卫 +2 位作者 汤小东 高占成 何湘君 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期848-851,F003,共5页
目的检测尤文肉瘤融合基因EWSFLI1和人粒单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用。方法利用hGMCSF腺病毒(AdhGMCSF),在1000U/mlIL4作用下,从外周血单个核细胞(PBMC)诱生树突细胞(DC)并... 目的检测尤文肉瘤融合基因EWSFLI1和人粒单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用。方法利用hGMCSF腺病毒(AdhGMCSF),在1000U/mlIL4作用下,从外周血单个核细胞(PBMC)诱生树突细胞(DC)并对其表型进行流氏细胞仪(FCM)分析,通过同种混合淋巴细胞反应以检测其免疫刺激活性。在lipofectamine的介导下,将含有尤文肉瘤融合基因EWSFLI1的真核表达质粒pCA13/EWSFLI1转染DC,通过RTPCR检测EWSFLI1的表达,并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测其对A673细胞的杀伤作用。结果应用AdhGMCSF从PBMC成功诱生出CD83、CD80、CD86及HLADR高表达,CD14低表达的DC,其对同种淋巴细胞有很强的免疫刺激活性。pCA13/EWSFLI1转染DC后,RTPCR检测DC中有EWSFLI1mRNA的表达。杀伤试验结果表明,AdhGMCSF诱生、EWSFLI1修饰的DC,体外诱导抗原特异的CTL,效靶比为20∶1时对A673细胞杀伤率为(29.9500±0.0117)%,高于对照组(P<0.01)。结论AdhGMCSF能够成功地从PBMC中诱生出有功能的DC。真核表达质粒pCA13/EWSFLI1在lipofectamine的介导下转染AdhGMCSF诱生的DC,能在DC中有效地表达。此EWSFLI1基因修饰的、AdhGMCSF诱生的DC体外致敏自体T淋巴细胞,生成抗原特异CTL。 展开更多
关键词 尤文肉瘤 基因治疗 树突细胞 腺病毒
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紫杉醇诱导骨肉瘤细胞系凋亡的体外研究 被引量:7
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作者 曾春 郭卫 冯传汉 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期675-679,共5页
目的研究抗微管新药紫杉醇对成骨肉瘤细胞系U-2OS的生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨其诱导凋亡作用的机制。方法将不同浓度的紫杉醇作用于成骨肉瘤细胞系U-2OS,应用形态学观察、台盼蓝染色、流式细胞术、电镜、原位末端标记(TUNEL)等方法... 目的研究抗微管新药紫杉醇对成骨肉瘤细胞系U-2OS的生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨其诱导凋亡作用的机制。方法将不同浓度的紫杉醇作用于成骨肉瘤细胞系U-2OS,应用形态学观察、台盼蓝染色、流式细胞术、电镜、原位末端标记(TUNEL)等方法,检测其诱导骨肉瘤细胞凋亡的时间效应和剂量效应,并与其它化疗药物比较。结果紫杉醇对U-2OS细胞具有生长抑制及诱导凋亡作用,且呈时间依赖和剂量依赖性。表现为细胞G2/M期阻滞、出现明显的凋亡峰;有核碎裂、染色体凝集、DNA断裂等凋亡特征,并出现大量多核细胞。经其它化疗药物诱导的U-2OS细胞未出现多核现象。结论紫杉醇通过抑制细胞有丝分裂,对骨肉瘤细胞有明显的生长抑制及促凋亡作用,且其作用有独特的机制。 展开更多
关键词 紫杉醇 骨肉瘤 细胞凋亡 体外研究
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Paclitaxel-induced apoptosis in osteosarcoma cell line U-2 OS
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作者 郭卫 曾春 +1 位作者 董风权 雷伟 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第12期1796-1801,共6页
Objective To observe the in vitro growth inhibitory and apoptosis inducing effects of paclitaxel on the human osteosarcoma cell line U 2 OS Methods U 2 OS cells were treated with various concentrations of paclit... Objective To observe the in vitro growth inhibitory and apoptosis inducing effects of paclitaxel on the human osteosarcoma cell line U 2 OS Methods U 2 OS cells were treated with various concentrations of paclitaxel Proliferation was determined by cell count in a neubauer cytometer chamber Viability was assessed by trypan blue dye exclusion Paclitaxel induced morphologic alterations were visualized using light and transmission electron microscopy The extent of paclitaxel induced apoptosis was determined by flow cytometry and immunohistochemical detection (TdT mediated dUTP nick end labeling technique, TUNEL) Results The cells treated with paclitaxel initially showed G 2/M arrest, which was followed by apoptosis The characteristic apoptotic changes, including nuclear disintegration and chromatin agglomeration, were displayed Large amounts of micronuclei cells appeared, something not observed in those cells treated with cisplatin and adriamycin for contrast Also, extensive DNA cleavage was detected using TUNEL Conclusion This study demonstrates that paclitaxel has an apoptotic inducing effect on osteosarcoma cells through the initiation of G 2/M arrest and inhibiting mitosis in both a time dependent and dose dependent manner 展开更多
关键词 paclitaxel · osteosarcoma ·apoptosis
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