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不断总结经验教训推动我国人工关节外科的健康发展
被引量:
5
1
作者
吕厚山
《中华外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第20期1297-1298,共2页
关键词
人工关节外科
健康
国际会议
人工关节材料
术后并发症
中国医生
发达国家
设计理念
围手术期
演示会
原文传递
人类白细胞抗原B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达
被引量:
1
2
作者
陈占昆
吕厚山
+2 位作者
王东
蒋东芳
丁海明
《中华风湿病学杂志》
CAS
CSCD
2005年第6期321-324,共4页
目的研究人类白细胞抗原(HLA)-B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达。方法应用显微注射技术将HLA-B2704基因注入C57BL/6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F0代受精卵,出生动物进行聚合酶链反应(PCR)筛选及Southern杂交鉴定。阳性者进...
目的研究人类白细胞抗原(HLA)-B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达。方法应用显微注射技术将HLA-B2704基因注入C57BL/6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F0代受精卵,出生动物进行聚合酶链反应(PCR)筛选及Southern杂交鉴定。阳性者进行反转录(RT)-PCR和流式细胞光度术检测其在mRNA和蛋白水平的表达。结果101只F0代仔鼠中,10只F0代仔鼠基因组中有HLA-B2704基因整合。其中昆明鼠×昆明鼠F0代3只,整合率为4.7%,C57BL/6×昆明鼠F0代7只,整合率为18.9%(字2检验,P<0.05)。阳性小鼠的皮肤、结肠、睾丸和脾脏组织中均有HLA-B2704基因的mRNA水平表达,其外周血淋巴细胞膜上HLA-B2704基因的蛋白表达为7.87%(直方图统计表,5%以上为阳性)。结论尽管受精卵的注射成活率差异无统计学意义,在注射浓度相同的情况下,含有C57BL/6基因背景的受精卵更易整合外源基因,而单纯昆明鼠的受精卵不易接受外源基因。C57BL/6×昆明鼠F0代比单纯昆明鼠F0代更适合于转基因动物的制备。HLA-B2704的重链分子与小鼠茁2微球蛋白结合的复合物不稳定,不易于在细胞表面表达。
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关键词
人类白细胞抗原
4基因
转基因小鼠
聚合酶链反应(PCR)
C57BL/6
Southern杂交
流式细胞光度术
外周血淋巴细胞
显微注射技术
mRNA水平
细胞表面表达
昆明鼠
外源基因
HLA
X^2检验
转基因动物
受精卵
方法应用
蛋白水平
基因整合
原文传递
题名
不断总结经验教训推动我国人工关节外科的健康发展
被引量:
5
1
作者
吕厚山
机构
北京大学关节病诊疗研究中心
出处
《中华外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第20期1297-1298,共2页
关键词
人工关节外科
健康
国际会议
人工关节材料
术后并发症
中国医生
发达国家
设计理念
围手术期
演示会
分类号
R687.4 [医药卫生—骨科学]
R161 [医药卫生—公共卫生与预防医学]
原文传递
题名
人类白细胞抗原B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达
被引量:
1
2
作者
陈占昆
吕厚山
王东
蒋东芳
丁海明
机构
北京大学关节病诊疗研究中心
出处
《中华风湿病学杂志》
CAS
CSCD
2005年第6期321-324,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(3007064)
文摘
目的研究人类白细胞抗原(HLA)-B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达。方法应用显微注射技术将HLA-B2704基因注入C57BL/6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F0代受精卵,出生动物进行聚合酶链反应(PCR)筛选及Southern杂交鉴定。阳性者进行反转录(RT)-PCR和流式细胞光度术检测其在mRNA和蛋白水平的表达。结果101只F0代仔鼠中,10只F0代仔鼠基因组中有HLA-B2704基因整合。其中昆明鼠×昆明鼠F0代3只,整合率为4.7%,C57BL/6×昆明鼠F0代7只,整合率为18.9%(字2检验,P<0.05)。阳性小鼠的皮肤、结肠、睾丸和脾脏组织中均有HLA-B2704基因的mRNA水平表达,其外周血淋巴细胞膜上HLA-B2704基因的蛋白表达为7.87%(直方图统计表,5%以上为阳性)。结论尽管受精卵的注射成活率差异无统计学意义,在注射浓度相同的情况下,含有C57BL/6基因背景的受精卵更易整合外源基因,而单纯昆明鼠的受精卵不易接受外源基因。C57BL/6×昆明鼠F0代比单纯昆明鼠F0代更适合于转基因动物的制备。HLA-B2704的重链分子与小鼠茁2微球蛋白结合的复合物不稳定,不易于在细胞表面表达。
关键词
人类白细胞抗原
4基因
转基因小鼠
聚合酶链反应(PCR)
C57BL/6
Southern杂交
流式细胞光度术
外周血淋巴细胞
显微注射技术
mRNA水平
细胞表面表达
昆明鼠
外源基因
HLA
X^2检验
转基因动物
受精卵
方法应用
蛋白水平
基因整合
Keywords
Mice, transgenic
β_2 microglobulin
Gene expression
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
不断总结经验教训推动我国人工关节外科的健康发展
吕厚山
《中华外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
5
原文传递
2
人类白细胞抗原B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达
陈占昆
吕厚山
王东
蒋东芳
丁海明
《中华风湿病学杂志》
CAS
CSCD
2005
1
原文传递
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