全内反射双通道观察双标记荧光染色的非洲绿猴肾细胞

在像增强型电荷耦合器件(ICCD)荧光显微成像装置上用双通道成像方法观察了非洲绿猴肾细胞(COS-7)中由EGFP转染的肌球蛋白Myosin 15a,以及Rhodamine标记的细胞微丝。为观察微丝尖端的肌球蛋白Myosin 15a,采用了高灵敏、低损伤的全内反射激发荧光显微成像技术,并在双通道中选用合适滤光片组合消除两种荧光染料间的光谱串扰。实验观测到非洲绿猴肾细胞内过表达的肌球蛋白Myosin 15a和伸长的微丝的分布情况,尤其是清晰观察到Myosin 15a在微丝上的分布。为全内反射双通道荧光成像技术在生命科学中的应用展示了广阔的前景。

双光子成像观测衰老对小鼠卵母细胞内DNA甲基转移酶表达的影响

量子点(QD)具有抗漂白能力强、量子产率高、激发谱宽和发射谱窄等优点,在生物荧光标记领域有较广泛的应用。利用QD 585和Hoechst 33342(H342)双标记小鼠卵母细胞中DNA甲基转移酶(Dnmt)和染色体,通过双光子成像同时双通道探测它们的荧光图像,获得了Dnmt蛋白表达的三维空间分布。发现老龄小鼠卵母细胞不适合体外培养成熟:该成熟方式不仅引起老龄小鼠卵母细胞Dnmt蛋白含量的变化,而且还改变了它们在胞质中的空间分布。这些改变可能与异常的甲基化修饰有关。

Kindler综合征蛋白Kindlin-1在人体内、外胚层来源的组织中表达

整合素相互作用蛋白Kindlin-1的基因突变可导致Kindler综合征.在肿瘤中,Kindlin-1的表达会发生失衡.Kindlin-1相关疾病通常只发生于一些特定的组织器官中.迄今,关于Kindlin-1的组织分布规律及正常人体如何控制Kindlin-1表达的规律还不清楚.本研究在正常成人器官以及人和鼠胚胎器官中采用免疫组织化学方法检测了Kindlin-1的蛋白表达,发现一个普遍存在的规律:Kindlin-1在组织中的表达水平与这一组织的胚层来源密切相关.通过比较Kindlin-1与Kindlin-2的表达,发现Kindlin-1在内、外胚层来源的上皮组织中高表达,而Kindlin-2则在中胚层来源的组织器官中高表达.在人胚和鼠胚中Kindlin-1的表达也呈现相同的规律.本研究提示Kindlin-1在内、外胚层的发育过程和相应的成体组织器官中起重要作用.