硫化氢对吸烟诱导的肺动脉平滑肌细胞表型转化及自噬的影响

目的探究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对吸烟诱导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cell,PASMC)表型转化及自噬的影响。方法在PASMC上,加入不同浓度(1%~10%)香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE),用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞增殖,用蛋白质印迹法测定增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),测定平滑肌蛋白22α(smooth muscle protein 22α,SM22α)水平反映细胞表型转化,测定微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)水平反映自噬变化;加入不同浓度(50~400μmol/L)的硫氢化钠(sodium hydrosulfide,Na HS),研究H2S对CSE诱导的细胞增殖、表型转化及自噬的影响。结果与对照组相比,5%CSE组细胞增殖增加了77.6%(P<0.01);与5%CSE组相比,10%CSE组细胞增殖下降了60.7%(P<0.01)。与对照组相比,5%CSE组PCNA表达增加了90.9%(P<0.05),SM22α表达下降了48.9%(P<0.05),5%CSE组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著升高(P<0.05)。与对照组相比,5%CSE组、5%CSE+50μmol/L Na HS组、5%CSE+100μmol/L Na HS组、5%CSE+200μmol/L Na HS组PASMC增殖均显著增加(P_均<0.01)。与5%CSE组相比,5%CSE+100μmol/L Na HS组CSE诱导的PASMC增殖显著减少(P<0.05);5%CSE+400μmol/L Na HS组对CSE诱导的PASMC增殖抑制作用最强,较5%CSE组下降29.4%(P<0.01)。H2S对CSE诱导的PASMC PCNA表达增加具有抑制作用,5%CSE+200μmol/L Na HS组较5%CSE组抑制了40.9%(P<0.05);5%CSE+400μmol/L Na HS组H2S抑制PCNA表达增加的作用最显著,抑制了59.5%(P<0.01)。5%CSE+400μmol/L Na HS组SM22α表达较5%CSE组增加了53.4%(P<0.05);与对照组相比,5%CSE组PCNA表达显著增加(P<0.05),SM22α表达显著减少(P<0.05)。与5%CSE组相比,5%CSE+400μmol/L Na HS组CSE诱导的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高抑制了45.7%(P<0.01);与对照组相比,5%CSE组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著升高(P<0.05)。结论 H2S能够抑制CSE引起的PASMC增殖和表型转化,其作用机制可能与自噬相关。

硫化氢对吸烟所致慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺血管重塑的作用及机制

目的探讨硫化氢对吸烟所致慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠模型肺血管重塑的作用及机制。方法24只清洁级雄性SD大鼠，按简单随机法分为4组：对照组、吸烟组、吸烟＋硫氢化钠（NaHS）组、吸烟＋炔丙基甘氨酸（PPG）组。对照组正常喂养，呼吸清洁空气，其余组均采用被动香烟烟雾吸入法构建慢阻肺模型，8周后对相应组的大鼠给予NaHS或PPG药物干预。16周后测定各组肺小动脉血管重塑指标；免疫组织化学方法检测各组肺血管中增殖指标增殖细胞核抗原（PCNA）以及氧化应激指标3－硝基酪氨酸（3－NT）的表达。结果吸烟组气道阻力显著高于对照组（0.859±0.283比0.578±0.088，P〈0.05），小气道病理评分明显增高，模型构建成功。吸烟组肺小动脉中膜厚度和完全肌化程度均显著高于对照组、吸烟＋NaHS组（0.54±0.20比0.37±0.12、0.39±0.08和0.61±0.16比0.20±0.12、0.34±0.13，均P〈0.01），而吸烟＋PPG组与吸烟组差异无统计学意义。吸烟组肺血管中PCNA表达均显著高于对照组、吸烟＋NaHS组（0.27±0.08比0.12±0.06、0.14±0.06，均P〈0.05），吸烟＋PPG组与吸烟组差异无统计学意义；与形态学结果相一致。吸烟组3－NT表达显著高于对照组、吸烟＋NaHS组（0.26±0.08比0.18±0.04、0.19±0.06，均P〈0.01），吸烟＋PPG组与吸烟组差异无统计学意义；且肺小动脉中膜厚度与3－NT表达水平呈强相关（r＝0.906，P〈0.001）。结论硫化氢可显著改善吸烟所致慢阻肺模型的肺血管重塑，可能与其能够减轻氧化应激损伤有关。

皮质抑素在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的变化及其意义

目的 探讨皮质抑素在慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）大鼠中的变化及其意义.方法 16只健康雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为对照组、慢阻肺组各8只;慢阻肺组给予被动烟雾吸入,对照组呼吸清洁空气.4个月后测定大鼠肺功能,支气管肺泡灌洗进行细胞学分类计数,取肺组织切片进行HE染色,观察肺组织病理形态改变.采用放免法检测大鼠血浆、支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织中皮质抑素的表达水平.结果 慢阻肺组气道阻力、BALF嗜中性粒细胞百分比均显著高于对照组[（0.584±0.021）比（0.653 ±0.062） mmHg·ml-1·s-1、1.49％比0.41％]（均P＜0.05）;慢阻肺组呈现明显的气道炎症和肺气肿改变;慢阻肺组血浆、BALF、肺组织中皮质抑素均显著高于对照组[（526 ±76）比（453±41） pg/ml、（819±100）比（619±101） pg/ml、（41±10）比（20±7）pg/mg]（均P ＜0.05）.结论 皮质抑素在慢阻肺大鼠中表达增加,参与其气道炎症反应,可能具有抗炎保护作用.