视神经切断术后视网膜内信号转导子与转录激活子STAT3蛋白的表达变化

目的 探讨视神经损伤后 ,信号转导子与转录激活子 (STAT3)蛋白在视网膜内表达和分布的变化。方法 免疫细胞化学、Westernblot及计算机图像分析技术。 结果 视神经切断术后 ,视网膜内STAT3表达水平上调 ,术后 1d达到高峰 ,并出现核转位增多现象。 5d后STAT3水平逐渐下降至正常。 结论 Janus激酶 信号转导子与转录激活子 (JAK STAT)信号转导途径可能通过STAT3蛋白的活化 。

束缚应激上调小鼠脾脏淋巴细胞钾离子通道(Kv1·3)的表达

目的观察束缚应激条件下小鼠脾脏细胞Kv1.3表达的变化。方法采用RT-PCR、Western blot等分子生物学及免疫组化实验方法,分别从基因和蛋白质水平揭示束缚应激对小鼠脾脏细胞Kv1.3表达的调节。结果束缚应激16 h后小鼠脾脏细胞Kv1.3 mRNA和蛋白质表达水平明显上调(P<0.05)。但是,相同束缚应激条件下小鼠脑组织Kv1.3表达无明显变化(P>0.05)。结论束缚应激状态下小鼠脾脏细胞Kv1.3 mR-NA和蛋白质表达水平呈明显组织特异性上调,提示束缚应激条件下免疫功能的调节可能与钾通道有关。这为进一步研究神经内分泌系统调节淋巴细胞功能的机制提供了新的思路。

成人、成年狗鼻腔嗅黏膜成鞘细胞的纯化、培养与鉴定

目的研究成人和成年狗嗅黏膜成鞘细胞(OECs)的分离与培养的方法,为探索在人体和大型动物模型的自体嗅黏膜OECs移植修复脊髓损伤奠定基础。方法采用差速贴壁方法分别从成人和成年比格狗的嗅黏膜分离出OECs,分别培养25 d,在第6 d1、0 d和25 d进行形态学观察,最后进行OECs特异标记物NGFRp75的免疫细胞化学染色,鉴定成鞘细胞。结果原代培养的成人和成年狗嗅黏膜OECs在培养10 d后明显增多,25 d的OECs成熟,具有很长的突起,其形态多为双极和三极,NGFRp75的免疫组织化学染色呈阳性。本实验条件下,狗嗅黏膜OECs的生长状态比成人的好。而未进行差速贴壁的培养细胞则几乎均呈成纤维样细胞。结论差速贴壁的方法可以分离出较为纯化的成人、成年狗鼻腔嗅黏膜OECs。

视神经切断诱导金黄地鼠脑内视觉通路小热休克蛋白27的表达

目的 观察成年金黄地鼠左侧视神经眶内切断术后 ,视交叉、视束、外侧膝状体以及上丘内小热休克蛋白 2 7(smallheatshockprotein ,HSP2 7)表达的变化。 方法 免疫组织化学染色法及光密度测定。 结果 在正常对照和手术对照组 ,双侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘未见明显免疫反应物 ,光密度值之间亦无显著差异。而在实验组 ,与左侧相比 ,右侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘免疫组织化学染色明显增强。术后 1周 ,右侧脑内视觉通路可见免疫反应物明显沉着的阳性细胞 ,形态类似星形胶质细胞。统计学分析显示 ,视交叉、外侧膝状体和上丘左、右两侧的光密度差值在术后 1周时最大 ,至术后第 2周迅速降低 ,以后下降趋势减缓 ,到术后 8周仍可见右侧光密度值高于左侧。 结论 一侧视神经切断后 ,对侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘等区域均有HSP2 7表达的增强 ,并可持续至术后 8周之久。提示上述区域HSP2 7表达增强与视觉通路的损伤有关 ,但其发生机理及生物学意义尚待进一步研究。

Nogo-A在小鼠胚胎新生视网膜节细胞及其轴突的表达

目的研究小鼠胚胎阶段Nogo-A在视网膜节细胞（RGCs）及其轴突上的表达及时程变化。方法取不同发育阶段的小鼠胚胎,采用免疫荧光染色,以激光扫描共焦显微镜观察Nogo-A在视觉传导通路中的表达。并采用免疫双标染色确定视网膜中表达Nogo-A蛋白的细胞类型。结果在视网膜发育的早期阶段（E12）,Nogo-A密集表达于具有放射状形态的细胞上,Nogo-A免疫阳性产物出现在胞质、胞膜以及轴突上。Nogo-A与Tuj-1双标染色显示,此阶段的视网膜中几乎所有RGCs及其轴突都表达有Nogo-A;在稍晚的发育阶段（E13）,视网膜中表达Nogo-A的RGCs数量明显减少,且仅出现在节细胞层以外的室周带和睫状体边缘区。在视网膜的神经纤维层,大部分RGCs轴突不再表达Nogo-A,仅有少量视觉纤维为Nogo-A免疫阳性;RGCs的神经发生基本完成后（E15）,视网膜中几乎检测不到Nogo-A免疫阳性的细胞,但视网膜纤维层仍有少量表达Nogo-A的节细胞轴突。与之类似,视神经盘、视茎、视交叉和视束都观察到少量Nogo-A免疫阳性的轴突。值得注意的是,视束中表达Nogo-A的纤维集中位于表浅部位,而此处恰为新近到达轴突的通过部...