阿托伐他汀对小鼠实验性动脉粥样硬化病变形成的抑制作用

目的观察阿托伐他汀对载脂蛋白E基因缺陷(apoE-/-)小鼠实验性动脉粥样硬化(AS)病变形成及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨阿托伐他汀抑制AS病变形成的可能机制。方法将apoE-/-小鼠随机分为3组:阿托伐他汀高、低剂量组、模型组(等量生理盐水),每组8只,给药第8周后全部处死。酶法检测血清脂质含量;比色法检测氧化指标一氧化氮(NO)、总抗氧化能力(TAC)及丙二醛(MDA);病理图像分析法测定主动脉AS斑块面积及其与管腔面积的比值;免疫组织化学染色方法测定主动脉壁VCAM-1表达。结果阿托伐他汀高、低剂量组与模型组apoE-/-小鼠比较显示:(1)阿托伐他汀(高、低剂量)可以显著降低总胆固醇、甘油三酯水平(P<0.01),升高高密度脂蛋白胆固醇水平(P<0.01);(2)明显增加血浆NO及TAC(P<0.01),减少MDA的生成(P<0.01);(3)阿托伐他汀可减少斑块面积与管腔面积比值(P<0.01);(4)阿托伐他汀可下调VCAM-1的表达(P<0.01)。结论阿托伐他汀可能通过调节apoE-/-小鼠血脂代谢、增强其抗氧化能力及下调主动脉壁VCAM-1表达,抑制apoE-/-小鼠AS病变形成的发展。

应用体细胞基因转移技术建立的遗传性极度高血脂小鼠模型

目的 利用体细胞脂蛋白脂酶 (lipoproteinlipase ,LPL)有益变异体基因转移方法 ,救治原本在出生后两天内全部死亡的LPL基因敲除纯合子小鼠。方法 以腺病毒为载体 ,在初生小鼠肌肉内表达LPL基因有益突变体 ,观察救治存活后成年动物的表型变化。结果 本法救治纯合子小鼠的成功率达到 75 % ,大大高于以野生型LPL基因救治的国外研究。存活的成年纯合子小鼠表现为极度高脂血症。结论 利用LPL基因突变体进行体细胞基因转移可成功救治LPL基因敲除纯合子小鼠 ,并建立了极度高脂血症动物模型。

快速鉴定苯丙酮尿症模型小鼠基因型的新方法应用

目的:建立融解曲线法和变性高效液相色谱(DHPLC)法准确、快速地鉴定苯丙酮尿症(PKU)模型小鼠的基因型。方法:融解曲线法采用聚合酶链反应(PCR)扩增包含模型小鼠pah基因点突变位点序列的132bp片段,将该产物予Alw26I酶切后,加入微量SYBR Green I,在实时PCR仪上行融解曲线分析,同时,酶切产物行12%聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。DHPLC法是直接将132bp片段扩增产物采用在部分变性条件下(60.9℃)行DHPLC分析,根据不同图谱作出基因型诊断。结果:融解曲线分析表明,野生型小鼠的DNA片段在84℃和81℃出现2个融解峰,突变纯合型小鼠DNA片段在76.5～77.5℃和81℃出现2个融解峰,杂合型小鼠DNA片段则在84℃、81℃和76.5～77.5℃均出现融解峰,3种峰型明显可被区分。DHPLC优化了最佳分离效果的柱温,在优化的最佳条件下,DHPLC图谱显示杂合型小鼠DNA具有显著特色的峰型,即除同源双链峰外,出现一个异源双链峰。上述2种新方法共检测了PKU模型小鼠突变纯合型20只、杂合型22只,野生型11只,2种方法检测结果一致,并且与经典的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法结果一致(动物毛色等表型也完全一致)。结论:融解曲线法和DHPLC法均能准确、快速地鉴定模型小鼠的基因型,具有自动化、高通量等优点。

释药用壳聚糖温敏凝胶体内外形态与溶蚀降解研究

壳聚糖(CTS)/甘油磷酸钠(GP)反向温敏水凝胶,可用作药物注射埋植的控释材料。今对比研究了CTS/GP凝胶体外(PBS)和体内(SD大鼠皮下)的存在状态和溶蚀降解特征。凝胶在SD大鼠皮下被疏松纤维囊壁包裹,对周边组织未产生毒性,生物相容性良好。受体内渗透压、pH值、生理反应等影响,凝胶的体内外存在状态和溶蚀降解存在显著差异:凝胶在体内水分不断流失,无溶胀过程,注射4周后体内外凝胶的水含量分别为89%和97%;水分流失造成凝胶质量减小、结构致密、孔隙率平均降低17%。凝胶在体内与组织发生缔合,平均分子量明显大于体外,后随降解略有减小,但降解速率小于体外降解速率。上述体内外差异对指导体外试验、开展药物的控释研究有重要意义。

阿托伐他汀钙抗apoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化病变的研究

目的观察阿托伐他汀钙对载脂蛋白E基因缺陷(apoE-／-)小鼠动脉粥样硬化病变的抑制作用。方法将apoE-／-小鼠随机分为模型组和阿托伐他汀钙治疗组,每组各8只。酶法检测血清脂质含量,比色法测氧化指标一氧化氮,总抗氧化能力及丙二醛含量,病理图像分析法测定主动脉粥样硬化斑块面积及管腔面积,免疫组织化学染色方法测定主动脉壁血管细胞黏附分子-1、细胞间黏附分子-1的表达。结果阿托伐他汀钙高剂量组(5．0 mg·kg-1·d-1)、低剂量组(2．5 mg·kg-1·d-1)血浆一氧化氮含量分别为(27．3±9．1)mmol／L和(19．7±8．7)mmol／L,总抗氧化能力分别为(211．8±43．6)mmol／L和(177．4±39．6)mmol／L,比模型组[(3．5±2．4)mmol／L和(73．7±38．3)mmol／L]明显增高(P<0．01);丙二醛含量分别为(11．6±3．3)mmol／L和(14．4±3．4)mmol／L,比模型组(45．5±5．3)mmol／L明显降低(P<0．01)。阿托伐他汀钙可下调血管细胞黏附分子-1及细胞间黏附分子-1的表达(P<0．01)。结论阿托伐他汀钙能明显增强apoE-／-小鼠抗氧化能力,降低主动脉壁血管细胞黏附分子-1及细胞间黏附分子-1的表达,抑制动脉粥样硬化病变的发展。