肝X受体的激活对小鼠糖尿病肝脏脂肪酸合成酶表达的调节

目的探讨肝X受体（LXR）对糖尿病肝脏脂肪酸合成酶（FAS）表达的影响及机制。方法将16周龄、雄性、C57BL／6背景下瘦素受体基因缺陷的db／db小鼠和对照的db／m小鼠，分别予以LXR激动剂T0901317（T0）（3mg·kg^-1·d^-1）或DMSO灌胃处理7d；T0（10μmol／L）刺激人肝癌细胞系HepG2细胞24h。此外，HepG2细胞转染小鼠FAS启动子报告基因表达质粒，同时转染pcDNA3．1表达载体或LXR或活化型固醇调节元件结合蛋白（SREBP—1c）表达质粒12h；采用免疫组织化学方法检测FAS蛋白在肝脏上的表达，实时荧光定量PCR和蛋白印迹方法分别在mRNA和蛋白水平检测FAS和SREBP-1的表达及TO对其表达的影响，荧光素酶报告基因方法检测LXR激动剂和SREBP-1c对小鼠FAS启动子活性的影响。结果免疫组化结果显示FAS蛋白在肝脏广泛表达，主要位于肝细胞胞质内。TO可显著降低db／db小鼠空腹血糖水平[由（12．00±1．06）mmol／L下降到（7．73±0．69）mmol／L，P〈0．01]和糖化血红蛋白水平（由5．67％±0．10％下降到4．87％±0．08％，P〈0．01）。db／db小鼠肝脏FASmRNA水平明显高于db／m小鼠，约为5．5倍（P〈0．01）；在蛋白水平，db／db小鼠肝脏上的FAS也明显高于db／m小鼠。TO处理可使db／m小鼠肝脏FASmRNA表达升高约3．5倍（P〈0．05），可使db／db小鼠肝脏FASmRNA升高约1．7倍（P〈0．05）；TO处理可使db／m小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2．4倍（P〈0．05），使db／db小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2．1倍（P〈0．01）。TO能够上调HepG2细胞FAS的mRNA表达水平，升高约1．9倍（P〈0．05）；LXR的激活还能显著增加HepG2细胞中FAS基因启动子活性，约为对照组的1．5倍；过表达LXR或SREBP-1c也能增加HepG2细胞FAS基因启动子活性，分别为对照组的1．9倍和1．6倍（均P〈0．01）。结论LXR可能通过其本身的直接作用和SREBP-1c的间接作用上调肝脏FAS的表达，LXR可能介导了糖尿病肝脏的脂质生成过程。

肝X受体上调糖尿病小鼠肾脏脂肪酸合成酶的表达

目的探讨肝X受体（liver X receptor，LXR）对糖尿病小鼠肾脏脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FAS）表达的影响及可能机制。方法在体研究部分：糖尿病db／db小鼠和对照的db／m小鼠分别予以LXR激动剂T0901317（3mg·kg^-1·d^-1）灌胃处理7d，采用免疫组织化学、实时荧光定量PCR、蛋白印迹法检测FAS和活化型固醇调节元件结合蛋白（sterol regulatory element—binding protein-1，SREBP-1）的表达水平。离体研究部分：T0901317（10μmol／L）刺激小鼠近曲小管上皮细胞系（MCT细胞）24h，或转染SREBP-1c表达质粒。LXR或SREBP-1c表达质粒转染人胚。肾细胞系（HEK293细胞）12h，分别采用实时荧光定量PCR、转染荧光素酶报告基因等方法，检测FAS表达和FAS启动子活性水平。结果免疫组化结果显示FAS蛋白主要表达在肾皮质，肾小球表达量较少。同对照组db／m小鼠相比．db／db小鼠肾脏FASmRNA和蛋白水平均明显降低（P〈0．05）；T0901317处理可使db／db小鼠。肾脏FASmRNA表达升高1．3倍（P〈0．01）；db／m小鼠肾脏SREBP-1的mRNA升高5．1倍（P〈0．01），db／db小鼠肾脏SREBP．1的mRNA升高17倍（P〈0．01）；T0901317也能上调MeT细胞FAS的mRNA表达水平，升高1．5倍（P〈0．05）；过表达SREBP-1c也可使MCT细胞中FASmRNA的表达量增加1．8倍（P〈0．05）：不仅如此，LXR的激活、过表达LXR或SREBP-1c能增加HEK293细胞FAS基因启动子活性（P〈0．01）。结论LXR能够通过其本身的直接作用和SREBP-1c的间接作用上调肾脏FAS的表达，LXR可能介导了糖尿病肾脏的脂质代谢紊乱过程。