外源性H2S吸入对大鼠肢体缺血／再灌注后心肌损伤的保护作用研究

目的研究外源性H2S吸入对大鼠双下肢缺血/再灌注后心肌损伤的保护作用。方法雄性Wistar大鼠23只,随机分为三组:①正常对照组(C组,8只);②缺血/再灌注组(I/R组,8只):应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血/再灌注模型,缺血4 h再灌注4 h。③H2S吸入组(H2S组,7只):大鼠双下肢缺血4 h,再灌注时给予含80 ppm H2S的合成空气持续吸入4 h。观察各组大鼠心肌病理、血浆H2S、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白-T(TnT)、髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化及心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性、MPO、TNF-α水平的变化。以免疫组化法观察心肌细胞TNF-α的表达。结果与C组比较,I/R组血浆CK-MB、TnT、MPO、TNF-α及心肌MPO、TNF-α水平明显上升(P<0.05),血浆H2S及心肌CSE活性明显下降(P<0.05),H2S吸入后血浆H2S及心肌CSE活性明显升高;同时,血浆CK-MB、TnT、MPO、TNF-α及心肌MPO、TNF-α水平明显降低(P<0.05)。心肌病理提示I/R组心肌明显肿胀、血管充血,心肌细胞间可见明显分叶核粒细胞浸润,红细胞漏出增多,H2S吸入后心肌损伤明显减轻。心肌TNF-α免疫组化提示I/R组心肌胞浆棕色染色颗粒较C组明显增多,H2S吸入后心肌胞浆棕色染色颗粒明显减少。结论外源性H2S吸入可以通过降低炎细胞浸润及炎性细胞因子激活而对骨骼肌缺血/再灌注的心肌损伤发挥保护作用。

内源性H_2S在大鼠骨骼肌缺血/再灌注所致心肌损伤中的变化及意义

目的研究内源性血浆硫化氢（H2S）／心肌胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）体系在骨骼肌缺血／再灌注所致心肌损伤中的变化及作用：方法雄性Wistar大鼠62只，应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血／再灌注模型。按照缺血及再灌注不同时间点随机分为9组：①正常对照组（C组，8只）；②缺血2h组（I2组，4只）；③缺血4h组（I4组，8只）；④再灌注0．5h组（R0.5组，8只）；⑤再灌注2h组（R2组，8只）；⑥再灌注4h组（R4组，8只）；⑦再灌注6h组（R6组，8只）；⑧再灌注12h组（R12组，4只）；⑨再灌注24h组（R24组，6只）。各再灌注组均为缺血4h。观察各组大鼠心肌病理改变、血浆H2S、肌酸激酶同T酶（CK—MB）、肌钙蛋白T（TnT）水平的变化及心肌CSE活性的变化。结果光镜下观察可见，缺血4h后大鼠心肌细胞略肿胀，肌间隙可见少量红细胞漏出；再灌注4h及6h后，心肌细胞损伤改变最重；再灌注24h后，上述改变有所减轻。与正常对照组比较，缺血2h后，血浆CK—MB的水平即开始明显上升，血浆TnT的水平在缺血4h后明显上升（P〈0．05）。各缺血组血浆H2S的水平及心肌CSE的活性有下降趋势，但无明显统计学差异：与缺血4h组比较，再灌注0．5h后血浆CK—MB的水平明显升高，再灌注4h达高峰；血浆TnT的水平再灌注6h达高峰；血浆H2S的水平及心肌CSE的活性再灌注2h后则明显下降，再灌注4h达最低值；再灌注24h后，血浆H2S的水平及心肌CSE的活性逐渐回升，血浆CK—MB的水平明显下降（P〈0．05）。CK—MB、TnT水平的变化与血浆H：S水平的变化呈明显的负相关：结论骨骼肌缺血／再灌注可造成心肌损伤，缺血／再灌注4～6h，心肌损伤最重。内源性血浆H2S／心肌CSE体系的下调可能在骨骼肌再灌注期心肌损伤的病理生理改变中具有重要作用．