基于网络药理学的miRNA和环境因子相互作用分析与建模

近年来，越多越多的研究表明，microRNA（miRNA）作为一类重要的小分子miRNA和包括药物在内的许多环境因子有功能相互作用。然而，这两者的相互作用目前仍缺乏系统的分析和建模，而相关研究对于理解miRNA和环境因子相互关系，对于疾病的预防、诊断、治疗和预后具有潜在价值。在本文中，我们系统整理和注释了具有实验证据支持的miRNA一环紧因子相互作用数据，并基于网络药理学方法对上述数据进行了系统分析和建模。

小鼠抗人FOXO3保守区多克隆抗体的制备和鉴定

目的纯化叉头盒蛋白O3(FOXO3)基因保守区蛋白,并制备其多克隆抗体。方法利用生物信息学分析预测FOXO3蛋白的保守区,通过PCR扩增编码FOXO3蛋白第290~472位氨基酸DNA片段并克隆至pET28a原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21,诱导表达并获得可溶性蛋白,经镍离子柱亲和纯化,免疫小鼠制备抗血清,随后采用ELISA、Western blot法和免疫沉淀实验检测抗体的效价、特异性以及应用范围。结果成功构建表达载体pET28a-FOXO3(aa290-472),实现可溶性FOXO3蛋白的表达和抗体制备。SDS-PAGE和Western blot实验结果证实,FOXO3蛋白与预期结果一致,抗血清能够特异性地识别原核、真核FOXO3蛋白以及其天然抗原表位。结论成功制备了小鼠抗人FOXO3的多克隆抗体,且抗体对内源性FOXO3具有较好的反应性和特异性。

C19ORF12对胃癌MKN45细胞增殖和化疗药敏感性的影响及其机制

目的:探讨19号染色体开放读码框12(C19ORF12)对胃癌MKN45细胞增殖和化疗药物敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:将胃癌MKN45细胞分为对照组和C19ORF12组。CCK-8法检测2组胃癌MKN45细胞的增殖活性,克隆形成实验检测2组胃癌MKN45细胞克隆形成数,CCK-8法检测加入化疗药物阿霉素或过氧化氢(H2O2)后2各组胃癌MKN45细胞存活率,流式细胞术检测2组胃癌MKN45细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜技术检测C19ORF12在胃癌MKN45细胞中的亚细胞定位,GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)中C19ORF12 mRNA在正常胃组织和胃癌组织中的表达差异,KM-plot回顾性分析不同表达水平C19ORF12对胃癌患者预后的影响。结果:与对照组比较,C19ORF12组胃癌MKN45细胞增殖活性明显升高(P<0.05),克隆形成数升高(P<0.01)。阿霉素或H2O2作用后,与对照组比较,C19ORF12组胃癌MKN45细胞存活率升高(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01)。激光共聚焦显微镜下,C19ORF12主要定位于胃癌MKN45细胞的线粒体中。与正常胃组织比较,胃癌组织中C19ORF12 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与低表达C19ORF12的胃癌患者比较,高表达C19ORF12的胃癌患者总体生存期明显缩短(P<0.01)。结论:C19ORF12能够促进胃癌细胞的增殖,并且降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性。C19ORF12可以作为肿瘤治疗的潜在靶标。

DNA损伤标志物γH2AX及其在临床肿瘤研究中的应用

DNA双链断裂是一种可以引发染色体不稳定性（genome instability）并最终导致肿瘤发生的严重损伤[1.细胞内染色体稳定性的维持与DNA双链断裂的识别和修复密切相关.DNA双链断裂被识别后,细胞周期发生阻滞,从而完成对DNA双链断裂的修复[2].而在DNA双链断裂的识别和修复这一系列过程中存在缺陷的人往往易发肿瘤[3].组蛋白H2AX在DNA双链断裂的修复过程中至关重要[4].

微丝的基本性质与细胞核肌动蛋白

微丝,作为细胞骨架的重要成员,普遍存在于所有的真核细胞中。构成微丝的肌动蛋白,与肌球蛋白一起作用,使细胞产生和传导机械力,并促进细胞运动。尽管人们很早就已经认识到体细胞核中存在单体肌动蛋白,但细胞核中聚合的微丝如何动态调控及行使何种功能,仍存在争议。该文概述了微丝细胞骨架的基本性质和成核过程,并讨论细胞核内肌动蛋白的功能。