青光眼小鼠Thy1-CFP-DBA／2J表达melanopsin蛋白的视网膜节细胞的丢失及小鼠行为学分析

为了研究表达melanopsin蛋白的视网膜神经节细胞在青光眼小鼠的抑郁性行为中所起的作用,本文使用不同年龄的青光眼小鼠Thy1-CFP-DBA/2J(CFP-D2)2,5,8,11,14个月龄各5只,对照组为C57BL/6小鼠2,8,14个月龄各5只.对视网膜平铺片进行免疫组织化学染色、细胞计数及形态学分析;旷场实验分析小鼠的行为学特征.实验结果显示,CFP-D2小鼠其眼内压随着年龄的增加逐渐升高,视网膜也发生了相应改变,包括表达CFP细胞数量的减少(细胞/mm2;2mo(月龄):1309±26,14mo:878±30,P<0.01),视网膜神经节细胞的减少(2mo:48±3,14mo:19±4,P<0.001),表达Brn-3b的视网膜神经节细胞数量的减少(2mo:1283±80,14mo:950±31,P<0.001),以及视网膜神经节细胞中Brn-3b阳性细胞所占比例的下降(5mo:50.17%±5.5%,14mo:12.61%±3.8%,P<0.001),形态学定量分析表明视网膜神经节细胞的树突野面积也逐渐减小(mm2;2mo:0.077±0.015,14mo:0.065±0.015,P<0.05).旷场实验指标分析(包括总的运动距离,进入中央区域的次数,在中央的时间占总的时间的比例)表明不同月龄的CFP-D2小鼠始终处于一种高活动度的状态.综合上述实验结果,本文证实,CFP-D2小鼠青光眼所致的高活动度状态与视网膜神经节细胞相关,尤其是与Brn-3b阳性的视网膜神经节细胞的功能异常有关.