脊髓血管胚胎发生发育的解剖学研究

目的 :观察人胚胎脊髓血管的发生发育过程 ;分析胚胎脊髓血管的结构特征以及与成人脊髓血管结构的关系。方法 :采用胎龄 30d～ 2 8周的胚胎及胎儿、新生儿和成人尸体标本 ,进行解剖学观察。结果 :对脊髓血管胚胎各期的发育特征进行了描述。神经管未闭合时 ,周围的间充质内已出现了毛细血管网 ,逐渐向基板和翼板集中 ,并沿神经根走行 ,进出椎管 ,每一节段均有两对 ,左右对称。表面的毛细血管垂直向脊髓内发出分支 ,部分分化成各级动、静脉 ,并在髓内发出分支 ,构成毛细血管网。原基板外周的毛细血管网随脊髓的生长 ,形成了脊髓前动脉纵轴。颈髓前动脉多保持双干结构。脊髓后动脉为双干 ,在外侧方。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓血管已与成人大致相仿。结论 :脊髓前动脉在胎龄 8周时 ,胸腰段就已经融合为一条。颈髓的脊髓前动脉多为双干 ,有相互靠近的趋势。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓表面血管形态已经与成人大致相仿。脊髓血管是神经管周围间充质中的毛细血管网随着脊髓的生长 ,通过相互融合和不均衡退化等机制 。

SD大鼠腰骶部脊神经前根显微外科解剖学观察

目的:为实验性高选择性腰骶神经前根小束切断术治疗圆锥上损伤的痉挛性膀胱提供可靠的神经根分束的形态学依据。方法:对6只雄性SD大鼠L1-S4节段的脊神经前根自然分束进行形态学观察和显微测量。结果:粗细不一的神经小束从脊髓发出,几个神经小束形成一个神经亚束。2～6个神经亚束构成一个神经束,或由神经小束直接形成神经束。腰骶部脊神经前根一般含有1股神经束,3～13支神经小束。L5～S2节段前根的小束数目在5支以上。每一前根内有一支神经小束较粗大,直径0.1～0.2mm左右,其余较细小,最小可至0.01mm左右,粗细程度存在较大差异。结论:实验性高选择性腰骶部前根神经小束切断术的分束可达到神经小束水平,以7～8支为宜。

视神经管内结构的显微解剖学研究

目的 为视神经减压术和进一步探索视神经间接损伤的病理机制提供形态学依据。方法 在手术显微镜下对 18例 (3 6侧 )成人颅底湿标本视神经管进行了解剖观测 ,测量了管内段视神经的口径、视神经硬膜鞘各壁的厚度、眼动脉与视神经的位置关系以及眼动脉与视神经管下壁的关系。结果 ①从视神经管颅口到眶口硬膜鞘的各壁逐渐增厚 ;②在视神经管颅口处 ,61 2 %眼动脉位于视神经的内下方 ,到了眶口处 ,81 9%眼动脉绕到视神经的外下方 ;③眼动脉在视神经管内行走于视神经硬膜鞘下壁内。所得数据用SPSS10 0软件进行统计学处理。结论 视神经间接损伤后 ,硬膜鞘在眶口处对视神经的束缚作用最强。由于管内段视神经被牢固地定于视神经管内 ,在外力作用下 ,管内段视神经能承受位移的潜力有限。

胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌注损伤的干预作用

目的研究胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,经尾静脉注射胡黄连苷Ⅱ(10mg/kg)和丹参素钠(10mg/kg)干预治疗,Bederson法评价动物的神经行为功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,组织病理学观察神经细胞结构,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果脑缺血再灌注损伤后,大鼠均表现神经行为功能障碍,缺血侧出现脑梗塞病灶,神经细胞凋亡数量均高于假手术组。胡黄连苷Ⅱ和丹参素钠治疗后,神经细胞凋亡数量明显减少、脑梗塞体积显著缩小,动物神经行为功能明显改善,与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。胡黄连苷Ⅱ组脑梗塞体积显著小于丹参素钠组(P<0.05)。结论胡黄连苷Ⅱ可能通过抑制细胞凋亡,缩小梗死体积而改善大鼠的神经行为功能。

神经调节素-1β对小鼠脑缺血再灌注损伤的干预作用及可能的机制

目的研究神经调节素-1β(NRG-1β)对小鼠脑缺血再灌注后神经行为功能,脑梗死体积,脑组织含水量,神经细胞凋亡以及胶质细胞水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响和神经保护的作用机制。方法应用线栓法建立小鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,经颈内动脉微量注射NRG-1β(2μg/kg)干预治疗,Bederson法评价动物的神经行为功能;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,观察脑梗死体积;干湿重法测定脑组织含水量;免疫荧光染色检测神经细胞凋亡;免疫组织化学检测AQP-4的表达。结果脑缺血再灌注损伤后,动物均表现神经行为功能障碍,缺血侧出现脑梗塞病灶,脑组织含水量、神经细胞凋亡数量和胶质细胞AQP-4表达均高于假手术组。与对照组相比较,NRG-1β治疗组缺血24h,动物神经行为功能损伤明显改善,凋亡神经细胞数明显减少,脑梗塞体积显著缩小(P<0.05);但脑组织含水量和AQP-4表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。缺血再灌注22h、46h和70h组,上述5项指标较相应的对照组均有显著性差异(P<0.05)。结论NRG-1β可能通过下调脑缺血再灌注损伤诱导的胶质细胞AQP-4表达和抑制细胞凋亡,减轻脑水肿和缩小梗死体积,从而改善动物的神经行为功能。

海带多糖在高脂血症大鼠中的降血脂和抗氧化作用

目的探讨海带多糖对高脂血症大鼠血脂的调节作用机制。方法健康雌性Wistar大鼠32只,应用高脂饲料喂养方法建立高脂血症动物模型,海带多糖干预治疗。血生化法检测大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平,硝酸还原酶法检测血清和肝组织一氧化氮(NO)含量,黄嘌呤氧化酶法测定血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,酶联免疫吸附法检测血清和肝组织中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,免疫组织化学技术检测肝细胞SOD和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达。结果海带多糖治疗后,大鼠血清TG、TC和LDL水平较模型组显著下降,而HDL显著升高(P<0.05)。肝组织匀浆ox-LDL和NO水平较模型组显著降低,而SOD活性显著升高。肝细胞iNOS表达较模型组显著降低,SOD表达显著增强(P<0.05)。结论海带多糖可通过抗氧化机制而发挥调节血脂水平的作用。

神经调节素对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡和STAT3及GFAP表达的影响

目的探讨神经调节素-1β(NRG-1β)对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡、信号转导和转录激活因子3(STAT3)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法成年雄性Wistar大鼠,用线拴法经颈外-颈内动脉插线建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)动物模型,经颈内动脉单剂量注射1.5NRG-1β5μl干预治疗。荧光DendEndTUNEL法检测神经细胞凋亡;免疫组织化学和免疫荧光染色检测脑组织STAT3和GFAP表达。结果脑缺血再灌注损伤可诱导脑组织细胞凋亡和STAT3及GFAP表达。对照组随缺血时间延长,皮质、纹状体和海马区细胞凋亡逐渐增多,STAT3和GFAP表达逐渐增强。治疗组在缺血不同时间点细胞凋亡较对照组相应脑区显著减少(P<0.05),STAT3和GFAP表达水平较对照组相应脑区显著增强(P<0.05)。结论NRG-1β可能通过激活细胞JAK/STAT信号传导途径,促进星形细胞胶质化,启动神经细胞抗凋亡机制,对缺血性脑损伤起保护作用。

He-Ne激光照射对大鼠心肌微动脉内皮细胞和心肌组织内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨He Ne激光照射大鼠心前区对心肌微动脉内皮细胞和心肌组织内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)表达的影响。方法 将 12只Wistar大鼠随机分为对照组和激光照射组 ,每组 6只。激光照射组的照射剂量为 6 0 5J cm2 ,每天照射 1次 ,连续 10天。最后一次激光照射后 ,两组大鼠均于左心室前壁取材 ,采用免疫组织化学染色方法 ,观察心肌组织各层eNOS表达的变化。结果 激光照射组eNOS表达的平均光密度值为 0 2 6 3± 0 0 15 ,高于对照组的 0 2 2 7± 0 0 16 (t=17 35 ,P <0 0 1) ;并且在各级心肌微动脉内皮细胞核的一端可见eNOS表达的阳性颗粒 ,而对照组不明显。结论 以剂量为 6 0 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,可使心肌微动脉内皮细胞中eNOS的表达增强 ,为阐明He Ne激光照射扩张微血管、改善微循环的作用机制 。

He-Ne激光照射对大鼠心肌毛细血管通透性影响的实验研究

目的 探讨He Ne激光照射大鼠心前区对心肌毛细血管通透性及毛细血管内皮细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为对照组和激光照射组 ,每组各 8只 ,其中照射组He Ne激光照射剂量为 60 5J cm2 ,垂直照射大鼠心前区 ,每日 1次 ,共 1 0次。采用铁蛋白大鼠静脉灌注示踪 ,心肌标本于透射电镜下观察和免疫组织化学染色图像分析的方法 ,观察心肌毛细血管通透性及VEGF变化。结果 电镜下 ,激光照射组心肌内层毛细血管管壁内、外以及心肌细胞的线粒体内均可见大量的高密度铁蛋白颗粒 ,较对照组明显增多 ;免疫组化染色示照射组心肌内层毛细血管内皮细胞的着色明显加重 ,其平均光密度值为 0 2 63± 0 0 1 5 ,明显高于对照组的 0 2 2 7± 0 0 1 6 (P <0 .0 1 )。结论 以剂量为 60 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,可使心肌毛细血管的通透性和VEGF的表达明显增强 ,为He Ne激光照射能改善心肌微循环提供了实验形态学依据。

He-Ne激光照射大鼠心前区对心肌毛细血管开放率的影响

目的 探讨低强度He Ne激光照射大鼠心前区对心肌毛细血管开放情况的影响。方法 雌性Wistar大鼠 6只 ,随机等分为对照组和激光照射组。以 6 0 5J/cm2 的He Ne激光垂直照射激光照射组大鼠心前区 ,每天 1次 ,连续照射 10天。超薄切片透射电镜下观察左心室近心内膜侧、近心外膜侧心肌中直径 <10 μm微血管的开放情况。结果 照射组心肌内层毛细血管开放率 (70 3% )明显高于对照组 (5 5 6 % ) ,P <0 0 5。结论 以剂量为 6 0 5J/cm2 的He Ne激光照射心前区 。

自体嗅黏膜移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究

目的 观察自体嗅黏膜植入大鼠脊髓后的变化及其对轴突再生的修复作用。探索临床自体嗅黏膜移植修复脊髓损伤的可能性。 方法 成年雄性Wistar大鼠随机分为嗅黏膜移植组和对照组各 2 0只。嗅黏膜移植组取鼻中隔后部的嗅黏膜组织 (1mm2 )植入自体大鼠脊髓颈 1节段后索内的皮质脊髓束缺损处 (2mm× 1 5mm) ;对照组取鼻腔呼吸区黏膜植入脊髓同样的损伤处。 4～ 6周处死动物 ,移植区冰冻水平切面 ,免疫荧光双标神经丝蛋白 (NF)和神经生长因子受体蛋白 (NGFRp75 ) ,Confocal显微镜下观察 ,另行免疫组织化学染色观察移植嗅黏膜与周围组织的生长情况。 结果 对照组大鼠的损伤处有明显空洞 ,呼吸区黏膜内未见p75染色 ;嗅黏膜移植组可见p75标记的植入的嗅黏膜与周围组织愈合良好 ,空洞明显减少 ,被标记的嗅成鞘细胞向神经组织浸润生长 ,在移植物内有大量被标记的纤细的不分叉的NF纤维穿过。

细胞因子信号转导抑制蛋白SOCS-3在成年大鼠脑内的基础表达

采用免疫组织化学方法 ,探讨细胞因子信号转导途径抑制蛋白 SOCS-3在大鼠脑内的基础表达与细胞定位。结果显示 :SOCS-3免疫阳性细胞在脑内分布广泛 ,阳性产物主要分布在神经元核内 ;部分神经元的胞浆、神经纤维、胶质细胞及血管内皮细胞也呈 SOCS-3免疫阳性。结果表明 :SOCS-3蛋白在脑内具有广泛的基础表达 。

神经调节素对实验性痴呆大鼠的干预作用和可能机制

目的探讨神经调节素1β(NRG1β)对实验性老年痴呆大鼠神经元凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响。方法成年健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、治疗组各10只,经左侧脑室微量注射淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)建立实验性痴呆模型,经右侧脑室注射NRG1β干预治疗,Y型电迷宫检测大鼠的认知功能,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法检测Bcl-2和Bax表达。结果造模成功后,模型组大鼠较对照组认知能力明显下降,TUNEL阳性细胞数明显增多,神经细胞Bcl-2和Bax蛋白表达增强(P<0.05)。经NRG1β治疗后,治疗组大鼠较模型组认知能力显著改善,TUNEL阳性细胞显著减少,Bcl-2表达增强,Bax表达减弱(P<0.05)。结论 NRG1β可能通过调节Bcl-2和Bax表达而抑制神经细胞凋亡,从而改善实验性痴呆大鼠学习记忆能力。

脊髓损伤后大鼠阴茎组织中神经型一氧化氮合成酶的变化

目的:观察SD大鼠脊髓损伤(SCI)后阴茎组织中神经型一氧化氮合成酶(nNOS)的变化。方法:12只雄性SD大鼠分为SCI组与对照组。采用改良的重物坠落法(Allen法)制作大鼠T9-T10脊髓节段不完全损伤模型。伤后7天行阴茎勃起功能检测和nNOS免疫组化,观察脊髓损伤后阴茎勃起潜伏期、勃起次数以及阴茎组织中nNOS神经纤维的变化。结果:SCI组大鼠阴茎勃起潜伏期明显缩短,阴茎勃起次数明显减少(P<0.05);对照组和SCI组大鼠阴茎中nNOS阳性神经纤维数目分别为90.42±3.66、10.13±1.78;平均光密度分别为0.18±0.01、0.11±0.01;积分光密度分别为2.37±0.08、1.08±0.13。与对照组相比较,SCI组大鼠阴茎内nNOS阳性纤维的数量及光密度明显降低,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:SD大鼠脊髓损伤后阴茎内nNOS表达减弱,导致勃起功能障碍。

信号转导子与转录激活子3蛋白在金黄地鼠视网膜生后早期发育过程中的表达

目的 观察信号转导子与转录激活子 3(STAT3)蛋白在金黄地鼠视网膜生后早期发育过程中的表达。 方法 STAT3蛋白免疫细胞化学染色和Western免疫印迹方法 结果 生后发育早期整个视网膜神经层均有STAT3阳性产物分布 ,以视网膜节细胞层 (GCL)、内网层 (IPL)和成神经细胞层 (NBL)的内层更明显 ,随着发育进程 ,其阳性产物逐渐局限于视网膜节细胞的胞浆和胞核 ;蛋白半定量结果显示 ,生后 1周内STAT3蛋白表达水平较高 ,之后逐渐降低 ,成年后最低。 结论 STAT3蛋白的表达及变化可能与视网膜生后早期发育密切相关。

原代培养大鼠嗅球成鞘细胞Nogo(N-18)的共聚焦激光扫描显微镜观察

目的 观察原代培养的成年大鼠嗅球成鞘细胞 (OECs)Nogo(N 18)蛋白的表达 ,探讨Nogo与成鞘细胞促进神经再生作用的关系。 方法 原代培养嗅球OECs,采用免疫组织化学和双标免疫荧光细胞化学技术 ,结合激光共聚焦扫描显微镜观察。 结果 原代培养的嗅球OECs的Nogo(N 18)免疫细胞化学反应呈阳性 ,Nogo(N 18)蛋白主要分布于胞浆 ,而在胞膜及突起分布较少。 结论 嗅球 (OECs)含有Nogo A蛋白 ,提示Nogo

与阿尔茨海默病有关的淀粉样蛋白及代谢型谷氨酸受体的研究进展

阿尔茨海默病是老年性痴呆中最常见的类型 ,近年来研究发现 ,淀粉样蛋白可能与本病的发生有关。阿尔茨海默病患者脑中有大量淀粉样蛋白沉积 ,而代谢型谷氨酸受体等一些因素能影响淀粉样蛋白的产生 。

细胞因子信号转导抑制因子SOCS-3在成年大鼠视网膜内的定位分布

目的分析JAK STAT信号转导途径抑制蛋白SOCS-3在大鼠视网膜内的基础表达和细胞内定位分布。方法免疫细胞化学技术。结果SOCS-3免疫阳性反应细胞广泛分布在视网膜节细胞层和内核层。在节细胞层,SOCS-3免疫阳性反应产物主要分布在节细胞核;在内核层,部分阳性细胞为Mｌｌｅｒ细胞。结论OCS-3在正常大鼠视网膜神经元及胶质细胞内有较为广泛的基础表达,并以核蛋白为其主要存在形式。

碱性成纤维细胞生长因子对成年大鼠嗅黏膜成鞘细胞增殖的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对于纯化后的嗅黏膜成鞘细胞 (OECs)增殖的促进作用 ,探讨嗅黏膜OECs的增殖特性。 方法 应用差速贴壁和酶消化法对原代培养的嗅黏膜OECs进行纯化 ,用BrdU掺入法观察bFGF对嗅黏膜OECs增殖率的影响。 结果 在没有特定刺激因子作用时 ,嗅黏膜OECs本身有一定的增殖率 ,而加入 10 μg/L的bFGF对嗅黏膜OECs有一定的促增殖作用。 结论 在体外培养条件下 ,bFGF能提高嗅黏膜OECs的增殖率。

信号转导子与转录激活子3和细胞因子信号转导抑制因子-3蛋白在成年大鼠脊髓内的表达与定位

目的 分析JAK STAT信号转导途径重要成员STAT3蛋白和该途径抑制蛋白SOCS 3在大鼠脊髓内的表达和细胞内定位分布。 方法 免疫细胞化学技术和形态计量学方法。 结果 STAT3免疫阳性产物主要分布于脊髓前角运动神经元的胞浆内 ;SOCS 3免疫阳性产物广泛分布于脊髓前角及后角神经元内、部分胶质细胞及神经纤维内。在前角运动神经元内 ,SOCS 3免疫阳性产物主要分布于核内 ,有时也可分布于胞浆中。 结论 STAT3和SOCS 3广泛表达于正常大鼠脊髓内 ,其中SOCS 3具有核蛋白或胞浆蛋白两种存在形式。