厌氧菌检测技术在口腔颌面部感染治疗中的应用

目的:探讨口腔颌面部感染患者的厌氧菌病原菌分布及耐药情况,以指导临床治疗。方法:对北京大学口腔医学院口腔颌面外科收治的61例口腔颌面部感染患者的脓液标本进行需氧菌和厌氧菌培养,应用API 20A试剂盒对耐氧试验阴性菌株进行菌种鉴定,采用Etest方法检测菌株进行药敏试验,确定病原菌类型及厌氧菌耐药情况。收集61例患者的临床治疗及抗菌药物应用情况,记录临床治疗效果。结果:61例脓液标本均培养分离出细菌,其中单纯需氧菌感染6例(9.8%),单纯厌氧菌感染7例(11.5%),厌氧菌与需氧菌混合感染48例(78.7%)。厌氧菌感染总例数为55例(90.2%),共分离出81株厌氧菌。分离率最高的革兰阳性厌氧菌为消化链球菌属(Peptostreptococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和疮疱丙酸杆菌(Pemphigus propionbacterium),上述3类革兰阳性厌氧菌均未出现对头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸耐药菌株;分离率最高的革兰阴性厌氧菌为卟啉单胞菌属(Porphyromonas)和普雷沃菌属(Prevotella),上述两类革兰阴性厌氧菌均未出现对甲硝唑、头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸耐药菌株。根据药敏试验结果指导临床治疗48例口腔颌面部感染患者,临床治愈率达到81.3%。结论:口腔颌面部感染多为需氧菌和厌氧菌混合性感染,其中厌氧菌占有较高比例,厌氧菌的培养及药敏试验结果对临床治疗具有良好的指导作用。

口腔鳞状细胞癌患者修复重建术后感染的病原学特征及感染风险预测模型的构建

目的:旨在发现行根治性肿瘤切除、颈淋巴结清扫并游离皮瓣修复重建术的原发性口腔鳞状细胞癌患者术后感染的病原学特征,并构建感染风险预测模型。方法:选取2018年1月至2020年12月在北京大学口腔医院行根治性肿瘤切除并游离皮瓣修复重建术的口腔鳞状细胞癌患者1596例为研究对象,按照患者术后感染发生情况分为感染组(n=154)和未感染组(n=1442),分析感染组患者的病原菌特征。以患者是否发生术后感染作为结果变量,采用单因素和多因素Logistic回归分析来确定术后感染的相关因素,并用于构建感染风险预测模型,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估模型的预测效能。结果:1596例口腔鳞状细胞癌患者行修复重建术后发生感染154例,感染率为9.65%,感染部位以手术切口和呼吸道为主;共培养分离病原菌268株,其中革兰阴性菌240株,占89.55%,以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)为主;革兰阳性菌23株,占8.58%,以粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为主;真菌5株,占1.87%。分离出的铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率较高,对环丙沙星等比较敏感;分离出的金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素耐药率较高,对万古霉素敏感。N分期≥1、美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists,ASA)分级≥Ⅱ级、气管切开、住院天数>13 d是患者术后感染的独立危险因素(P<0.05),据此构建感染风险预测模型的表达式为:预测概率值P=1/(1+e^(-a)),a=-0.803+0.674×(N分期≥1)+0.518×(ASA分级≥Ⅱ级)+0.918×(气管切开)+1.581×(住院天数>13 d),Hosmer-Lemeshowχ^(2)=10.647,P=0.223,提示模型的拟合度较好。模型预测患者术后感染的ROC曲线下面积为0.818,95%CI为0.789~0.846。结论:口腔鳞状细胞癌修复重建术后感染发生率较高,主要致病菌为革兰阴性菌。多因素Logistic回归分析构建的感染预测模型可以有效预测口腔鳞状细胞癌修复重建术后感染的发生,使临床能够有针对性地采取监测和干预措施,合理使用抗菌药物,有利于预防和减少术后感染。

舌鳞状细胞癌根治性切除术后患者预后预测列线图的构建与验证

目的:评估术前炎症生物标志物、预后营养指数和临床病理特征对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)患者行根治性切除术后生存结局的预后价值,并以此构建患者预后预测列线图模型。方法:回顾性收集2017年1月至2018年7月于北京大学口腔医院接受根治性肿瘤切除术的297例TSCC患者的病例资料,随机按照7∶3比例分为训练集和验证集。分析患者术前全身炎症反应标志物中性粒细胞/淋巴细胞比率(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、淋巴细胞/单核细胞比率(lymphocyte-to-monocyte ratio,LMR)、血小板/淋巴细胞比率(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)、系统免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)、系统性炎症评分(systemic inflammation score,SIS)及预后营养指数(prognostic nutritional index,PNI)与TSCC患者术后总生存期(overall survival,OS)和疾病特异性生存期(disease-specific survival,DSS)的相关性。使用X-tile软件确定连续变量的最佳截断值作为分界点。采用Kaplan-Meier生存分析和多变量Cox回归模型分析影响TSCC患者的独立预后预测因素,据此构建OS和DSS的生存相关列线图预测模型,通过训练集和验证集进行模型内部交叉验证和外部验证,具体通过一致性指数、时间依赖性受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线、曲线下面积(area under the curve,AUC)、校准曲线和决策曲线分析对列线图的准确性进行验证。结果:单因素Cox回归分析显示,TNM分期、T分期、N分期、分化程度、侵袭深度(depth of invasion,DOI)、肿瘤直径和治疗前PNI水平为影响TSCC预后危险因素;多因素Cox回归分析显示,治疗前PNI水平、N分期、DOI和肿瘤直径为患者5年OS或DSS的独立预后因素(P<0.05)。治疗前N分期≥1、PNI≤50.65和DOI>2.4 cm与较差的5年OS显著相关,而N分期≥1、PNI≤50.65、肿瘤直径>3.4 cm与较差的5年DSS显著相关。基于独立预后因素构建的TSCC术后患者OS和DSS的列线图预测模型的一致性指数分别为0.708(95%CI,0.625~0.791)和0.717(95%CI,0.600~0.834),验证集验证结果显示,OS和DSS列线图预测模型的一致性指数为0.659(95%CI,0.550~0.767)和0.780(95%CI,0.669~0.890)。OS列线图模型和DSS列线图模型的1年、3年和5年的时间依赖性ROC分析(AUC分别为0.66、0.71、0.72和0.68、0.77、0.79)表明模型具有稳定的判别能力。校准曲线显示OS和DSS预测估值与实际观察值之间具有良好的一致性,决策曲线分析反映模型具有较好的临床应用价值。结论:治疗前PNI、N分期、DOI和肿瘤直径可能对TSCC患者的OS和DSS有可靠的预测价值,基于这些参数构建的预后预测列线图在预测TSCC根治性切除术后患者的OS和DSS方面表现出良好的准确性和有效性,是评估生存结局的有效工具,有助于选择有针对性的联合治疗来改善患者预后。

口腔颌面外科住院患者术前血清感染性指标检测研究

目的检测口腔颌面外科住院患者术前血清感染性指标,了解感染状况。方法对2009年1月至2016年12月,北京大学口腔医院住院的41 305例患者进行术前血清感染性指标检测。结果 41 305例患者术前血清感染指标阳性有2 061例,阳性检出率4.99%。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性率3.36%,丙型肝炎抗体(Anti-HCV)阳性率0.95%,梅毒血清特异性抗体(Anti-TP)阳性率0.67%,人类免疫缺陷病毒抗体(Anti-HIV)阳性率0.02%。不同性别HBsAg(χ~2=25.04,P<0.05);Anti-HIV(χ~2=5.95,P<0.05)阳性检出率差异均有统计学意义;不同年龄术前HBsAg(χ~2=15.36,P<0.05);AntiHCV(χ~2=39.20,P<0.05);Anti-TP(χ~2=91.86,P<0.05)阳性率差异均有统计学意义。结论口腔颌面外科住院患者术前血清感染性指标均存在一定阳性率,为了降低医源性感染,加强医务人员的职业防护,应广泛开展术前血清感染性指标的检测工作。

CENP-B抗体阳性的原发性干燥综合征患者的临床和免疫学特征

目的:探讨着丝点蛋白B(centromere protein B,CENP-B)抗体阳性的原发性干燥综合征(primary Sj9gren’s syndrome,pSS)患者的临床和免疫学特征。方法:采用横断面研究的研究设计,回顾性纳入2016年1月至2022年8月就诊于北京大学口腔医院并确诊为pSS的患者,收集分析患者的一般及临床特征、唾液腺造影、唇腺活检病理、血清免疫学及生化检查等资料。将pSS患者分为CENP-B抗体阳性组和阴性组,用SPSS 23.0软件对数据进行描述性分析、单因素及相关性分析,并将CENP-B抗体阳性组分为CENP-B抗体单阳性组及合并其他抗体阳性组进行亚组分析。结果:共纳入288例pSS患者,其中CENP-B抗体阳性组75例(26.0%),阴性组213例(74.0%)。CENP-B抗体阳性组的发病年龄较大,罹患自身免疫性肝病的比例较高,唾液腺肿大的比例较低,SSA/Ro60、Ro52、SSB抗体的阳性率均较低,免疫球蛋白G、类风湿因子的水平较低,免疫球蛋白M的水平较高,总蛋白水平较低,而白蛋白/球蛋白比值、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、乳酸脱氢酶的水平较高。亚组分析显示,CENP-B抗体单阳性组的总蛋白、免疫球蛋白A水平低于合并其他抗体阳性组。结论:CENP-B抗体阳性的pSS患者具有独特的临床和免疫学特征,表现为疾病活动性较低,较少发生唾液腺肿大,但易罹患自身免疫性肝病,肝功能生化指标水平偏高,提示CENP-B抗体可能是pSS亚型分类的特异性标志物。

自然沉降法分离抗凝全血建立生物样本库的特点

目的：评估用自然沉降法分离EDTA抗凝外周静脉全血（抗凝全血）建立血浆、白细胞、基因组DNA生物样本库的特点.方法：采集符合纳入标准的29名志愿者抗凝全血,进行血常规检测作为对照组;然后将抗凝全血分装到4支EP管中,每支1 mL,分为0.5、1、2、3 h 4个试验组,于室温静置自然沉降0.5、1、2、3 h后吸取血浆层,测量其体积,检测血浆层中白细胞总数及中性粒细胞、淋巴细胞的百分比;将含有白细胞的血浆层离心后,分装为无细胞血浆管和白细胞沉淀管,用部分白细胞提取DNA,建立血浆、白细胞、DNA 3种生物样本库.结果：0.5 h组血浆体积（241.72±101.52）μL显著低于1 h组（317.24±97.50）μL、2 h组（371.03±91.66）μL和3 h组（408.97±97.43）μL,P〈0.05.1 h组血浆体积显著低于2 h组和3 h组,P〈0.05;2 h组显著低于3 h组,P〈0.05.0.5 h组白细胞总数[（2.50×106）±（1.48×106）]显著高于2 h组[（1.47×106）±（7.19×105） ]和3 h组[（1.21×106）±（7.41×105）]的白细胞总数,P〈0.05,与1 h组[（2.29×106）±（1.17×106）]比较差异无统计学意义,P〉0.05;1 h组显著高于2 h和3 h组,P〈0.05;2 h组与3 h组差异无统计学意义,P〉0.05.4个试验组白细胞总数均显著低于对照组.中性粒细胞百分比：0.5 h组（54.14%±11.65%）显著高于1、2、3 h组（46.66%±12.70%,39.17%±12.33%,43.25%±14.54%）,P〈0.05,显著低于对照组（60.53%±8.46%）,P〈0.05;1 h组显著高于2 h组,P〉0.05; 1 h组与3 h组比较差异无统计学意义,P〉0.05;3 h组与1 h、2 h组比较差异无统计学意义,P〉0.05.淋巴细胞百分比：0.5 h组（35.09%±10.84%）显著低于1、2、3 h组（41.48%±12.20%、47.96%±12.27%、45.50%±13.71%）,显著高于对照组（30.98%±7.33%）,P〈0.05;1 h组显著高于对照组、0.5 h组,显著低于2 h、3 h组,P〈0.05;2 h组显著高于对照组、0.5 h、1 h组,P〈0.05,与3 h组之间差异无统计学意义,P〉0.05.结论：抗凝全血自然沉降法是一种无化学试剂干扰、低物理因素影响、低消耗、操作简单的分离白细胞血浆层的方法;0.5~1 h是抗凝全血自然沉降获取含白细胞血浆层的最佳时间段;利用一份抗凝全血可以分离出血浆、白细胞和DNA 3种生物样本,建立3种生物样本库.

奥硝唑辅助治疗中重度慢性牙周炎的疗效和不良反应

目的评价奥硝唑治疗慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)和其辅助机械治疗(scaling and root planing,SRP)的短期和6个月的疗效及不良反应。方法 32位中重度慢性牙周炎患者口服奥硝唑片,0.2g,Bid,5d。用药前后分别记录PLI(plaque index)、PD(probing depth)、BI(bleeding index)、牙龈退缩(GR,gingival recession)及溢脓。19位患者完成SRP后1、3、6个月的疗效观察。用药前后、SRP后1个月、6个月行血常规及生化检查。结果①用药前、用药后2d,32位患者的临床指标改善,PD为(6.32±1.20)mm vs.(5.04±1.37)mm,BI:(3.94±0.34)vs.(2.24±0.97),溢脓位点数:79 vs.2,P<0.01;GR:(0.1±0.7)mm vs.(0.4±0.7)mm。②SRP后1、3、6个月,PD、AL、BI较用药后14d均有进一步改善(P<0.01)。③32人中有3人发生轻微不良反应,发生率为9.4%。结论奥硝唑辅助治疗中重度慢性牙周炎安全、有效。

海藻糖快速鉴定光滑念珠菌方法评价

目的:以分子生物学鉴定结果为"金标准",通过两种不同方法对疑为光滑念珠菌(Candida glabrata)进行鉴定及检测结果比对,探讨一种便于临床采用、快速且廉价的检测光滑念珠菌的方法。方法:收集近3年真菌培养阳性菌株,选出在科玛嘉(CHROMagar)显色培养基孵育48 h后疑为光滑念珠菌200株,比较科玛嘉显色结果,经过37℃和42℃分别孵育3 h、6 h、24 h海藻糖发酵试验和分子生物学鉴定待测菌株到种。分析不同待测菌株对于发酵海藻糖的能力,评价海藻糖快速鉴定光滑念珠菌方法的最佳时间和温度,评估并比较科玛嘉显色和海藻糖发酵试验对于鉴定光滑念珠菌的诊断效能。结果:200株待测菌株中,仅有光滑念珠菌有快速发酵海藻糖的能力,42℃孵育3 h为海藻糖发酵试验的最佳条件。快速海藻糖发酵试验的正确率为99.00%(198/200),敏感性和特异性可以达到98.66%(147/149)和100.00%(51/51),相比较而言,科玛嘉显色对于鉴定光滑念珠菌的正确率为79.50%(159/200),敏感性和特异性仅为89.93%(134/149)和49.02%(25/51)。与目前国内经常使用的方法比较,海藻糖发酵试验具有更好的时间-效益比值。结论:快速海藻糖发酵试验操作简便,并且可以在3 h获得鉴定结果,费用低廉,具有在临床实验室推广开展的价值。

伴牙周炎的代谢综合征者动脉硬化早期指标的检测

目的:探索慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)和代谢综合征(metabolic syndrome,MS)对动脉粥样硬化的协同作用。方法:口腔门诊就诊的CP患者59人,由内科医师依据病史、物理和血清检测结果,按照MS最新诊断标准分组,其中MS组26人,非MS对照组33人。同一名牙周医师记录口内缺失牙,存留牙近中颊和远中舌2个位点菌斑指数、出血指数、探诊深度和附着丧失(attachment loss,AL)。彩色多普勒超声分别检测双侧颈总动脉内中膜厚度(intima-media thickness,IMT)和血流介导的血管舒张反应(flow-mediated dilatation,FMD),以这两项反映动脉粥样硬化早期血管改变。结果:MS组的AL显著高于对照组[(2.91±1.84)vs.(1.97±1.74)mm,P=0.03],MS组颈动脉IMT及粥样斑块检出率高于对照组,左侧差异达到统计学意义[左侧IMT(1.00±0.45)vs.(0.80±0.26)mm,P=0.04,右侧IMT(0.87±0.44)vs.(0.78±0.31)mm,P=0.23;左侧斑块检出率34.62%vs.9.09%,P=0.02,右侧斑块检出率19.23%vs.9.09%,P=0.26]。MS组FMD较对照组差,经检验差异有统计学意义[(7.67±5.06)vs.(11.82±7.00),P=0.02)。随着全身情况和CP程度加重,IMT呈增加趋势,FMD呈降低趋势,但差异无统计学意义。多因素分析显示调整性别、吸烟后,年龄是影响颈动脉IMT的重要因素(OR=0.016,95%CI0.01~0.02,P<0.01),在调整性别、年龄和吸烟因素后,CP程度(OR=-2.67,95%CI-4.70^-0.62,P=0.01)和患MS(OR=-3.36,95%CI-6.61^-0.10,P=0.04)均是影响FMD的重要因素。结论:CP和MS可能协同影响FMD,从而对动脉粥样硬化病变的发生起作用。

赤藓糖醇喷砂辅助牙周炎患者维护期治疗的疗效及对环境污染的评估

目的遵循以菌斑控制为导向的牙周治疗理念,对牙周维护期复诊患者,赤藓糖醇喷砂、传统超声清除菌斑及残存牙石治疗,比较治疗时间、舒适度、患者感受及治疗后临床疗效。同时,探讨喷砂和超声洁治过程中产生的环境污染状况。方法20名全身健康且不吸烟的牙周维护期患者,采取左、右侧自身对照的分口设计,治疗前菌斑染色,试验侧及种植体采用赤藓糖醇喷砂、对照侧采用传统超声清除菌斑,两种方法彻底清除菌斑和记录治疗时间,并比较舒适度及患者感受。最后超声清除牙面残存牙石,橡皮杯+抛光膏抛光牙面。治疗前及治疗后3个月、6个月测量天然牙及种植体的牙周临床指标(菌斑指数、探诊深度、出血指数、牙龈退缩)。使用100个培养基,在治疗过程中通过平板暴露法(沉降法)检测患者、医生和助手胸前30 cm的菌落数目。治疗前10 min、喷砂时和超声洁治时及治疗后10 min,检测距患者150 cm边台面的菌落数。结果两组治疗后3个月及6个月的牙周临床指标较基线均有改善,但两组间各项临床指标的差异均无统计学意义。喷砂治疗后3个月种植体的探诊深度、改良龈沟出血指数较基线减小,治疗后6个月改良龈沟出血指数仍较基线减小。喷砂组医生侧及患者侧的空气平均菌落数分别为46.08±28.33 CFU、19.75±13.38 CFU,超声组为6.00±4.56 CFU、3.73±6.57 CFU,差异有统计学意义(P<0.001)。喷砂组环境中空气平均菌落总数为77.67±34.85 CFU,超声为14.10±10.28 CFU,差异有统计学意义(P<0.001)。喷砂清除菌斑的平均治疗时间为260.05±103.7 s,显著低于超声409.05±121.13 s。喷砂的舒适度评分亦显著优于超声(P<0.001)。结论以菌斑为导向的赤藓糖醇喷砂治疗应用于维护期的牙周炎患者,可同时清除天然牙和种植体周菌斑,减轻炎症,治疗时间更短、患者更舒适。但喷砂过程中对医、患均可能有一定的环境污染,需科学防护。

有龋和无龋儿童四种唾液蛋白成分的比较

目的比较3～4岁有龋儿童和无龋儿童非刺激性和刺激性唾液中 IgA、乳酸脱氢酶、溶菌酶和碱性磷酸酶含量的差异。方法分别采集98例有龋儿童和94名无龋儿童非刺激性和刺激性唾液,测定上述各成分含量。结果非刺激性和刺激性唾液中 IgA、乳酸脱氢酶和溶菌酶含量有龋组均显著高于无龋组(P<0.01),非刺激性唾液中碱性磷酸酶含量有龋组显著高于无龋组(P<0.05);但刺激性唾液中碱性磷酸酶含量两组问差异无统计学意义(P>0.05)。结论非刺激性和刺激性唾液中 IgA、乳酸脱氢酶和溶菌酶升高可能与婴幼儿龋的发生、发展有关。

抗着丝点蛋白B抗体阳性的原发性干燥综合征的实验室特征分析

目的分析原发性干燥综合征(primary Sj9gren′s syndrome,pSS)抗着丝点蛋白B(CENP B),CENP B抗体阳性与抗CENP B抗体阴性的pSS病例实验室检查特点,为pSS的诊治提供更好的帮助。方法选取2013—2017年在北京大学口腔医院就诊的298例pSS患者的临床和实验室检查资料,分为抗CENP B抗体阳性组(87例)和抗CENP B抗体阴性组(211例)进行回顾性分析。结果抗CENP B抗体阳性的pSS患者发病年龄大于阴性组(64.20±10.67)岁vs(55.35±13.72)岁,差异有统计学意义(t=5.964,P<0.01)。血清ALP(95.32±56.78)U/L vs(74.16±22.78)U/L、GGT(74.05±157.33)U/L vs(27.43±40.98)U/L和IgM(2.04±1.85)g/L vs(1.50±1.17)g/L水平高于阴性组,AMAM2的检出率较高16.09%vs 8.06%,差异均有统计学意义(ALP:t=3.262,P<0.05;GGT:t=2.645,P<0.05;IgM:t=2.515,P<0.05;AMA-M2:χ2=4.27,P<0.05)。结论抗CENP B抗体阳性的pSS患者实验室检查特点与抗CENP B抗体阴性患者有差异,部分患者肝脏受累明显,可能是pSS中的一个类型。