量子点对体外培养细胞影响的实验观察

目的观察量子点(QDs)对体外培养细胞的影响。方法选用小鼠巨噬细胞、人肝癌Bel-7402细胞株进行体外培养并实验,设空白对照组和5个剂量实验组,QDs终浓度为3.125、6.25、12.5、25和50μg/mL,采用MTT法观察QDs作用体外培养细胞后细胞成活情况,于酶标仪上测定OD值,并以均数进行F检验。结果量子点浓度小于6.25μg/mL时,实验组与对照组OD值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论量子点在一定剂量内不影响体外培养细胞的生长。

量子点在小鼠腹腔巨噬细胞内的定位及对其超微结构的影响

目的观察体外实验量子点在小鼠腹腔巨噬细胞内的分布和对其超微结构的影响。方法利用量子点与小鼠腹腔巨噬细胞体外共孵育和电子显微镜技术,观察量子点在小鼠腹腔巨噬细胞内的分布及对其超微结构的影响。结果透射电镜下,量子点被小鼠腹腔巨噬细胞内吞入细胞质内,形成单位膜包被的空泡样结构。扫描电镜下,可见与量子点体外共孵育的小鼠腹腔巨噬细胞的表面有较多的片状细胞突起。结论量子点可使巨噬细胞活化,并使其表面突起增多;量子点被巨噬细胞内吞后,分布在细胞质内,并形成单位膜包被的空泡样结构。

人树突状细胞摄取量子点后的表面标志与超微结构

目的：观察人树突状细胞体外摄取量子点后,其形态、表面标志、超微结构的变化.方法：两种量子点与人未成熟树突状细胞体外共孵育,荧光显微镜下观察量子点在树突状细胞内的分布;免疫细胞化学方法检测树突状细胞表面标志;扫描电镜及透射电镜观察树突状细胞超微结构的改变.结果：与量子点共培养的树突状细胞的细胞质内充满了较强荧光颗粒,共培养前后的树突状细胞表面标志均呈阳性反应.扫描电镜下可见树突状细胞表面有丰富的典型树枝样的突起.透射电镜下可见树突状细胞以胞饮的方式摄入量子点,形成有膜包被的囊泡分布在细胞质内.结论：树突状细胞是通过胞饮作用摄取量子点,且量子点对树突状细胞的形态、表面标志及超微结构没有影响,生物相容性好.

量子点体外对小鼠腹腔巨噬细胞细胞化学的影响

目的探讨量子点(QDs)体外对巨噬细胞细胞化学及酶活性的影响。方法用倒置相差显微镜、荧光显微镜、细胞化学方法,在细胞水平观察QDs对巨噬细胞的生物相容性及对PAS反应、Feulgen反应、ATP酶、酸性磷酸酶(AcP)、碱性磷酸酶(ALP)、α-醋酸萘酚酯酶(ANAE)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响。结果3.125mg/L剂量的QDs对巨噬细胞的结构没有影响,但细胞内的细胞化学及酶活性发生了不同的变化,即PAS反应、Feulgen反应、AcP、ALP、ANAE和Mg2+-ATP酶表现为阳性,而SDH、LDH则为阴性。阳性结果中,Feulgen反应、ANAE、ALP和Mg2+-ATP组中QDs组与空白组比较,有统计学意义(P<0.05),而PAS反应、AcP组中QDs组与空白组比较,无统计学意义(P>0.05)。结论在细胞学水平上,QDs虽然可以使巨噬细胞内的某些酶发生变化,但不影响其结构及吞噬功能。3.125mg/L剂量的QDs可以很好地应用于生物医学领域标记活细胞,对细胞没有明显的影响。

固定剂、封片剂、温度及除菌方式对量子点标记细胞的影响

目的:观察不同固定剂、封片剂、温度及除菌方式对3种量子点标记小鼠腹腔巨噬细胞和正常皮肤的影响。方法:利用发射波长为610、523和576nm的3种量子点,以具有吞噬能力的小鼠腹腔巨噬细胞及正常皮肤为载体,观察不同的固定剂、封片剂、温度及除菌方式对量子点标记细胞及组织的影响。结果:3种量子点对小鼠腹腔巨噬细胞和皮肤组织没有明显的毒性,并且在6～72h内保持荧光不衰减。高于56℃的温度会使量子点失去发射荧光的特性。较好的除菌方式为^(60)Co照射和微孔滤膜过滤。最稳定的封片剂为水溶性的ClearmountTM。吞噬了量子点523的巨噬细胞,可使用多种固定液固定。结论:不同波长量子点标记小鼠腹腔巨噬细胞和皮肤组织的效能受固定剂、封片剂、温度和除灭菌方式的影响。

固定剂、封片剂、温度及除菌方式对量子点标记细胞的影响

为了为利用量子点标记细胞、组织，进一步研究其功能提供新的方法，本实验观察了3种发射波长的量子点（quautum dost，QDs）对所标记的小鼠腹腔巨噬细胞和正常皮肤的影响。利用发射波长610mm的红色荧光水溶液（量子点610）、发射波长为523mm的绿色荧光水溶液（量子点523）和发射波长576nm的黄色荧光脂溶性溶液（量子点576）的3种量子点（5mg／ml）以及具有吞噬能力的小鼠腹腔巨噬细胞、正常皮肤为载体，观察不同的除菌方式、温度、封片剂及固定剂对量子点标记细胞、组织的影响，为量子点在生物体内的应用及在生物制片过程中对其性能的影响等研究奠定基础。