“反转实习课”教学模式在组织胚胎学实习教学中的应用及评价

目的为了对组织胚胎学实习教学进行改进,开展"反转实习课"教学模式研究并对其进行评估。方法对2015级临床及基础医学专业五个班级共140位学生进行教学改革,其中临床5班和基础2班采取"反转实习课"教学模式,另三个班级为对照组,采取传统教学方式。应用学生主讲、教师补充、师生互动的教学模式进行组织胚胎学实习教学;应用考试成绩统计对比及问卷调查方法对教学效果进行评价。结果 "反转实习课"组的理论及实习成绩均显著高于传统教学组,总成绩高分比例大于传统教学组。问卷调查显示,93%参加"反转实习课"的同学表示喜爱这种教学模式,68%未参加"反转实习课"的同学表示接受并希望组胚实习课实行该改革。结论"反转实习课"教学模式有助于激发学生的学习兴趣,提高学习能力和学习成绩。

脊髓血管胚胎发生发育的解剖学研究

目的 :观察人胚胎脊髓血管的发生发育过程 ;分析胚胎脊髓血管的结构特征以及与成人脊髓血管结构的关系。方法 :采用胎龄 30d～ 2 8周的胚胎及胎儿、新生儿和成人尸体标本 ,进行解剖学观察。结果 :对脊髓血管胚胎各期的发育特征进行了描述。神经管未闭合时 ,周围的间充质内已出现了毛细血管网 ,逐渐向基板和翼板集中 ,并沿神经根走行 ,进出椎管 ,每一节段均有两对 ,左右对称。表面的毛细血管垂直向脊髓内发出分支 ,部分分化成各级动、静脉 ,并在髓内发出分支 ,构成毛细血管网。原基板外周的毛细血管网随脊髓的生长 ,形成了脊髓前动脉纵轴。颈髓前动脉多保持双干结构。脊髓后动脉为双干 ,在外侧方。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓血管已与成人大致相仿。结论 :脊髓前动脉在胎龄 8周时 ,胸腰段就已经融合为一条。颈髓的脊髓前动脉多为双干 ,有相互靠近的趋势。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓表面血管形态已经与成人大致相仿。脊髓血管是神经管周围间充质中的毛细血管网随着脊髓的生长 ,通过相互融合和不均衡退化等机制 。

膝关节前交叉韧带后外束股骨止点位置的解剖

目的通过对膝关节前交叉韧带后外束股骨止点的解剖测量,找到确定前交叉韧带后外束股骨止点的简单可行的方法,为双束重建前交叉韧带手术中的骨道定位提供理论依据。方法解剖20例新鲜膝关节标本(25～45岁)。在屈膝90°位,测量前交叉韧带后外束股骨止点中心点距股骨髁间窝外侧壁前方、后方和下方软骨缘的距离,再对测量数据进行评估和对比。结果前交叉韧带后外束股骨止点中心点距离股骨前方软骨缘(8.74±1.39)mm,距离后方软骨缘(8.69±1.57)mm(P=0.926)。后外束止点中心点距离股骨下方软骨缘(5.06±0.77)mm。结论膝关节屈膝90°位时,前交叉韧带后外束的股骨止点中心点位于股骨髁间窝外侧壁,距离下方软骨缘5mm,距离前方和后方软骨缘的距离相等。在前交叉韧带双束重建的手术中,应用本研究的结果能够简单、快捷地确定前交叉韧带后外束股骨骨道位置。

二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的毒性作用

目的探讨二甲苯对妊娠小鼠及胚胎发育的影响。方法对妊娠初期的雌性小鼠采用静式吸入染毒法进行二甲苯染毒,观察胎鼠体重变化;原子吸收分光光度测定法(atomic absorption spectroscopy,AAS)检测妊娠母鼠血清Fe2+、Mg2+含量;单细胞凝胶电泳法(single cell gel electrophoresis,SCGE)检测妊娠母鼠外周血有核细胞DNA损伤程度。结果染毒各组妊娠母鼠血清Fe2+、Mg2+含量下降(P<0.01,P<0.05),并具有统计学意义;染毒组妊娠母鼠外周血有核细胞发生DNA断裂并形成彗尾图像;染毒各组胎鼠体重较正常组相比均显著下降,且存在显著性差异(P<0.05);部分胎鼠表现为胚胎被吸收、脑膜脑膨出、椎骨发育不全等。结论二甲苯可造成妊娠母鼠血清Fe2+、Mg2+含量下降、外周血有核细胞DNA损伤并致使流产发生;二甲苯引起胎鼠体重下降,并影响生长发育。

小檗碱对局部脑缺血组织中HIF-1α表达的影响

目的研究大鼠局部性脑缺血再灌注损伤时,小檗碱(BE)对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及脑神经元凋亡的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻塞再灌注组(MCAO/R组)、假性治疗组(DMSO组)、小檗碱10mg/kg治疗组(BE10组)、小檗碱20mg/kg治疗组(BE20组)、小檗碱40mg/kg治疗组(BE40组)。治疗组在术前48h、24h及术后6h腹腔注射相应剂量药物,观察各组大鼠神经行为学缺陷;再灌注7d,TTC染色观察脑梗死体积变化;再灌注24h,制备脑组织切片分别作Nissl染色、免疫组织化学染色、TUNEL标记及免疫荧光双标记。结果BE20、BE40组神经功能较MCAO/R组有明显改善(P<0.05),但BE10组神经学评分与MCAO/R组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同剂量BE治疗均可以减小梗死灶体积(P<0.05),且呈现剂量依赖性。Nissl染色可见BE治疗组皮质神经元结构较清晰,胞体肿胀、核固缩、核溶解程度较模型组及假性治疗组明显减轻,淡染区域减小;免疫组织化学法观察到,BE组HIF-1α、Caspase-3、BNIP3、VEGF及TUNEL标记的阳性细胞数减少;免疫荧光双标记显示HIF-1α与BNIP3、Caspase-3及TUNEL阳性颗粒共表达于细胞中。结论BE可能通过降低HIF-1α水平并下调其下游的BNIP3和VEGF的表达,从而减少凋亡因子Caspase-3的作用而发挥神经元保护作用。

背阔肌肌皮瓣的血管解剖及其临床应用

目的探讨背阔肌肌皮瓣与血供的关系,为肌皮瓣的再划分、转位及移植提供解剖学基础。方法用大体解剖学、血管X线造影方法,对48例尸体背阔肌进行观察,并回顾背阔肌肌皮瓣进行临床应用31例的效果。结果背阔肌肌皮瓣有多个血供来源,其中胸背动脉主干分布于背阔肌外上部。恒定地分出内侧支和外侧支,具有各自分布区域。背阔肌内下部由肋间动脉和腰动脉供应。据X线造影所见,它们与胸背动脉分支间吻合明显,口径在320~550μm之间。背阔肌表面皮肤血供均来自深方肌皮穿支,越向内下方,穿支间吻合稀疏,口径亦细小。临床应用肌皮瓣做肿物切除后创面修复,乳房再造,修复小腿缺损等共31例,术后肌皮瓣30例完全成活,1例肌皮瓣远端早期出现部分血运障碍征象,经对症处理后,血运逐步改善,伤口延期愈合。结论背阔肌肌皮瓣,按其动脉分支及其吻合特点可分为3个部分,为整体或部分分离、转位或移植,保持肌功能提供血管解剖基础。

四氯化碳诱导性肝硬化大鼠肝组织葡萄糖调节蛋白78表达的研究

目的研究四氯化碳(CCl4)诱导性肝硬化大鼠肝组织内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的变化。方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=5)和肝硬化组(n=5),对照组皮下注射植物油0.12ml/100g体重,肝硬化组以0.3ml/100g体重皮下注射60%CCl4植物油。在实验第21周的第1d杀死鼠,右心室取血检测肝功能指标。鼠肝中叶取材,石蜡切片行苏木精-伊红(HE)染色和天狼猩红组织化学染色,光镜观察形态学改变,行GRP78免疫组织化学显色,无菌下取肝组织行Western blotting及RT-PCR检测肝组织GRP78的表达。结果肝硬化组的血清ALT含量(278.2±88.42)明显高于对照组(154.8±9.94,t=3.10,P<0.05);ALB含量(1.68±0.62)明显低于对照组(3.02±1.96,t=2.62,P<0.05)。对照组肝小叶结构和肝细胞状态正常,仅在中央静脉及汇管区可见少量胶原纤维。20周肝硬化组的肝细胞脂肪变性明显,胶原纤维大量增生,假小叶形成。GRP78免疫组织化学呈色显示,肝硬化组肝组织中阳性细胞数明显多于对照组,棕黄色着色定位于细胞质中。Western blotting和RT-PCR显示肝硬化组肝组织GRP78的表达明显增强。结论在CCl4诱导性肝硬化的肝组织中,GRP78表达明显增强,这可能与肝细胞的内质网应激有关。

人羊膜基质细胞作为骨组织工程种子细胞的应用

目的:初步探索人羊膜基质细胞(hAMC)作为骨组织工程种子细胞的潜力。方法:分离培养hAMC,将第3代hAMC在含有地塞米松(0.1μmol/L)、维生素C(50mg/L)和β-磷酸甘油钠(10mmol/L)的DMEM培养液中进行成骨诱导培养1周,行茜素红染色,计数钙化结节形成的数量,并进行免疫荧光细胞化学染色以检测Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶的表达。利用免疫组织(细胞)化学染色检测羊膜及hAMC中FasL的表达。结果:hAMC经过成骨诱导后,可见明显钙化结节形成,平均每孔18个,钙化结节处细胞Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶表达阳性。人羊膜组织中细胞及体外培养的hAMC均可检测到FasL的阳性表达。结论:hAMC有潜力成为一种比较理想的骨组织工程的种子细胞。

Nogo(N-18)在正常大鼠脊髓和坐骨神经的分布及损伤后变化的免疫组织化学研究

目的 研究Nogo蛋白在大鼠脊髓的正常分布及损伤后的变化 ,探索其在脊髓运动神经元表达的意义和作用。 方法 大鼠分脊髓夹伤组、坐骨神经夹伤组及正常对照组。损伤动物存活 1d和 3d后 ,分别进行Nogo(N 18)抗体的免疫组织化学染色。 结果 正常大鼠脊髓灰质腹角的运动神经元出现强烈的Nogo(N 18)免疫反应 ;而在脊髓白质呈阴性反应 ;寡突胶质细胞呈明显的阳性反应 ;在脊髓全段未发现Nogo染色的星形胶质细胞。在脊髓夹伤区域以外的上下部分 ,灰质和白质对Nogo(N 18)的表达与对照组的脊髓相同 ,在损伤部位的白质 ,出现明显的Nogo(N 18)免疫反应物。在正常和损伤的大鼠坐骨神经均未发现阳性反应的施万细胞。 结论 Nogo蛋白在正常大鼠脊髓运动神经元的分布和在损伤部位的积聚 。

人肿瘤坏死因子-α基因转导绒癌耐药细胞系体外耐药逆转的研究

目的 将人肿瘤坏死因子 alpha(hTNF α)基因导入已建立的绒癌耐药细胞系 ,观察hTNF α基因转导后对绒癌细胞耐药性逆转的体外作用。方法 通过阳离子脂质体将hTNF α基因转导绒癌耐药细胞系 ,用新霉素筛选含hTNF α片段的单细胞克隆 ,用RT PCR方法和细胞免疫组织化学方法 ,检测转导hTNF α基因的耐药细胞中MDR1mRNA和MDR1蛋白 (P gp)表达水平的改变。采用四甲基偶氮唑蓝比色法 ,检测转导hTNF α基因的耐药细胞对足叶乙甙 (VP 16 )的耐药指数。结果 转导hTNF α基因后 ,绒癌耐药细胞中检测出hTNF αmRNA表达 ,转导hTNF α基因在mRNA水平能一定程度的逆转绒癌耐药细胞的MDR1,而在P gp蛋白水平几乎能完全逆转绒癌耐药细胞的MDR1。转导hTNF α基因的细胞的耐药指数明显降低。结论 hTNF α基因转导后 ,可通过调节MDR1的表达 。

He-Ne激光照射对大鼠心肌微动脉内皮细胞和心肌组织内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨He Ne激光照射大鼠心前区对心肌微动脉内皮细胞和心肌组织内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)表达的影响。方法 将 12只Wistar大鼠随机分为对照组和激光照射组 ,每组 6只。激光照射组的照射剂量为 6 0 5J cm2 ,每天照射 1次 ,连续 10天。最后一次激光照射后 ,两组大鼠均于左心室前壁取材 ,采用免疫组织化学染色方法 ,观察心肌组织各层eNOS表达的变化。结果 激光照射组eNOS表达的平均光密度值为 0 2 6 3± 0 0 15 ,高于对照组的 0 2 2 7± 0 0 16 (t=17 35 ,P <0 0 1) ;并且在各级心肌微动脉内皮细胞核的一端可见eNOS表达的阳性颗粒 ,而对照组不明显。结论 以剂量为 6 0 5J cm2 的He Ne激光照射大鼠心前区 ,可使心肌微动脉内皮细胞中eNOS的表达增强 ,为阐明He Ne激光照射扩张微血管、改善微循环的作用机制 。

四氯化碳诱导性肝纤维化大鼠肝组织骨形态发生蛋白-7的表达

目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导性肝纤维化大鼠的肝组织纤维化与骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的相互关系。方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和肝纤维化组。对照组大鼠每周一、四背部皮下注射橄榄油(0.12ml/100g),肝纤维化组每周一、四背部皮下注射60%CCl4橄榄油(0.3ml/100g),连续注射6、10、16和21周。实验结束时处死大鼠,取肝中叶,石蜡包埋、切片。行天狼猩红染色,观察肝组织胶原纤维的增生情况;行BMP-7免疫组织化学染色和Western blotting检测,观察肝组织BMP-7的表达。结果天狼猩红染色显示对照组大鼠仅在肝门静脉及门管区看到少量的胶原纤维,各肝纤维化组大鼠均可见肝组织呈明显的胶原纤维增生,且随着时间的延长,肝纤维化程度逐渐加重;免疫组织化学染色显示,对照组大鼠肝组织中可见极少量的BMP-7表达阳性的细胞,6周肝纤维化组大鼠可见较多的BMP-7阳性表达细胞,但随着实验时间的延长,BMP-7阳性细胞呈递减的趋势,至21周肝纤维化组大鼠肝组织中基本呈阴性表达;Western blotting法检测大鼠肝组织BMP-7的表达结果与免疫组织化学的结果基本一致。结论CCl4诱导性肝纤维化大鼠肝组织BMP-7的表达与肝纤维化的程度呈负相关的趋势,推测BMP-7可能对肝纤维化具有一定的保护作用。

新型CKLF1对家兔红系造血祖细胞增殖分化的影响

目的 探讨新型趋化因子CKLF1对家兔骨髓单个核细胞形成红系集落的影响 ,并初步探讨其作用机制。 方法 采用尼龙毛去除骨髓基质细胞法、甲基纤维素半固体培养法检测新型趋化因子CKLF1对家兔红系形成的影响。 结果 新型趋化因子CKLF1具有促进家兔骨髓单个核细胞形成红系克隆的作用 ,并且该作用与CK LF1的浓度呈正相关 ;去除骨髓基质细胞后 ,CKLF1对红系克隆的形成无明显影响 ;另外 ,CKLF1刺激制备的基质细胞上清也具有促进红系克隆形成的作用。 结论 新型趋化因子CKLF1可能是通过调控骨髓基质细胞而间接促进红系克隆的形成。

细胞因子信号转导抑制蛋白SOCS-3在成年大鼠脑内的基础表达

采用免疫组织化学方法 ,探讨细胞因子信号转导途径抑制蛋白 SOCS-3在大鼠脑内的基础表达与细胞定位。结果显示 :SOCS-3免疫阳性细胞在脑内分布广泛 ,阳性产物主要分布在神经元核内 ;部分神经元的胞浆、神经纤维、胶质细胞及血管内皮细胞也呈 SOCS-3免疫阳性。结果表明 :SOCS-3蛋白在脑内具有广泛的基础表达 。

唇部动脉构型与唇瓣血液供应的关系

目的 :阐明唇部动脉的配布类型、微血管构筑 ,为唇瓣移转提供血管解剖学基础。方法 :用血管造影、解剖、铸型方法研究 31例 ( 6 2侧 )尸体头部的唇动脉 ;另 1例 ( 2侧 )灌注墨汁对微血管构筑进行组织学观察。结果 :( 1)上唇动脉出现率为 81.1%。它与对侧上唇动脉吻合 ,或一侧动脉占优势而另侧缺失。 ( 2 )下唇动脉出现率为6 3 .8% ,其余由副下唇动脉参与下唇血供。 ( 3)唇动脉弓恒定存在 ,弯曲行于唇部近红唇缘。按上唇动脉弓的构成 ,分为 3型 :Ⅰ型由两侧上唇动脉吻合而成 ,均衡分布或一侧占优势 ( 12 / 31) ;Ⅱ型一侧上唇动脉缺失 ,仅由另一侧上唇动脉单独构成 ( 10 / 31) ;Ⅲ型上、下唇动脉共干发出 ( 9/ 31) ,上唇外侧部分由绕行于口角附近的下唇动脉分布。按下唇动脉弓的构成分为 6种类型 :Ⅰ型由两侧下唇动脉吻合构成 ( 6 / 31) ;Ⅱ型由一侧下唇动脉与另侧下唇动脉、副下唇动脉吻合而成 ( 6 / 31) ;Ⅲ型由一侧下唇动脉单独构成 ( 2 / 31) ;Ⅳ型由一侧下唇动脉和另一侧副下唇动脉共同组成 ( 11/ 31) ;Ⅴ型由一侧副下唇动脉行向下唇缘中线附近呈T型分支构成 ( 3/ 31) ;Ⅵ型由两侧下唇动脉、副下唇动脉共同组成 ( 3/ 31)。 ( 4)微血管构筑 :唇动脉发出分支分别组成唇黏膜、皮肤致密血管网。结论 :由?

脊髓损伤后大鼠阴茎组织中神经型一氧化氮合成酶的变化

目的:观察SD大鼠脊髓损伤(SCI)后阴茎组织中神经型一氧化氮合成酶(nNOS)的变化。方法:12只雄性SD大鼠分为SCI组与对照组。采用改良的重物坠落法(Allen法)制作大鼠T9-T10脊髓节段不完全损伤模型。伤后7天行阴茎勃起功能检测和nNOS免疫组化,观察脊髓损伤后阴茎勃起潜伏期、勃起次数以及阴茎组织中nNOS神经纤维的变化。结果:SCI组大鼠阴茎勃起潜伏期明显缩短,阴茎勃起次数明显减少(P<0.05);对照组和SCI组大鼠阴茎中nNOS阳性神经纤维数目分别为90.42±3.66、10.13±1.78;平均光密度分别为0.18±0.01、0.11±0.01;积分光密度分别为2.37±0.08、1.08±0.13。与对照组相比较,SCI组大鼠阴茎内nNOS阳性纤维的数量及光密度明显降低,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:SD大鼠脊髓损伤后阴茎内nNOS表达减弱,导致勃起功能障碍。

JAK-STAT信号转导途径与中枢神经系统

作为一条新型信号转导通路 ,JAK STAT广泛参与细胞的生长、分化等过程。但目前对该通路的研究主要集中在造血及免疫系统 ,对其在中枢神经系统 (CNS)内的功能及作用机制尚没有完全阐明。本文对JAK STAT途径各成员在CNS内的表达、分布情况 。