健康男性和弱精子症患者精液精子中GP130的表达

目的观察在正常和活动力低下的人精液精子中白细胞介素-6(IL-6)及其受体(IL-6R)和GP130的表达差异。方法收集活动力正常的人精液精子和A、B级精子低于20％的弱精子症患者的精液精子,采用逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)和免疫细胞化学的方法检测IL-6及其受体和GP130的表达水平。结果与活动力正常的精液精子比较, GP130在活动力低下患者精液精子的表达显著降低(P<0．01),本实验未检测到IL-6和IL-6R在人精液精子的表达。结论精液精子GP130的表达减少与人精子活动力低下相关,提示GP130表达减少可能是精子活动力低下的原因之一。

睾丸组织异体异位移植生成成熟精子的动物模型建立

目的：采用免疫缺陷小鼠作为孵化器，建立小鼠睾丸组织异体异位移植生成精子的实验模型。方法：以新生小鼠睾丸组织为供体，免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植；采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase pol-ymerase chain reaction，RT-PCR)对移植物中睾丸特异蛋白激酶(testis-specific protein kinase 1，TESK1)mRNA 表达进行检测，并应用组织形态学分析法对生精细胞的发育作进一步的验证。结果：分子生物学及组织学观察显示，移植物组织不仅可像正常小鼠睾丸组织一样表达 TESK1 mRNA，并且富含与正常成年小鼠睾丸组织中类似的精曲小管结构以及各级生精细胞和精子。结论：移植后的生精细胞可在异体异位继续发育生长，完成整个生精过程，最终发育精曲小管及成熟精子。

人睾丸圆形精子细胞在体外向长形精子细胞分化

目的:探讨人睾丸生精细胞在体外培养条件下发生的分化。方法:取梗阻性无精子症患者睾丸活检标本,机械法离散睾丸细胞。①睾丸细胞混合培养,每24 h观察,计数分析长形精子细胞比率的变化;②显微操作挑取圆形精子细胞,观察单个细胞在微滴培养过程中变形分化的情况。结果:在添加卵泡刺激素、睾酮的HTF培养液中进行睾丸细胞混合培养,24 h后长形精子细胞比率较培养前显著增加(P<0.05);单个圆形精子细胞培养,可见到圆形精子细胞长出鞭毛转化为长形精子细胞,48 h的转化率为3.54%。Vero细胞条件培养液中人睾丸生精细胞的分化与HTF培养液中相同,两者无显著差异。结论:人睾丸组织的圆形精子细胞在体外可分化为长形精子细胞,Vero细胞条件培养液对此分化无促进作用。

28例罕见的染色体异常核型遗传学研究

目的通过对3 858例不孕不育、自然流产和死胎、生育异常患儿的患者染色体分析,探讨平衡易位与相应临床效应的关系。方法取患者外周血进行淋巴细胞培养,按常规方法制备染色体,应用G显带和C显带技术进行核型分析。结果在3 858例中发现异常核型435例,其中平衡易位73例,包括世界首报染色体平衡易位异常核型28例,占平衡易位异常的38％(28／73)。结论染色体平衡易位是引起不孕不育、自然流产及死胎、生育异常儿的重要原因,对有相关临床症状的患者进行染色体检查是非常必要的。

人睾丸中各级生精细胞的鉴定

目的:建立人睾丸生精细胞鉴定方法。方法:用机械法离散人睾丸细胞,涂片,用D iff-Qu ik法染色显示细胞形态。在Hoffm an光学镜头下根据细胞形态进行活细胞分类,选取各类细胞分别涂片,行17号染色体着丝粒探针化学显色原位杂交和c-k it抗原表达免疫细胞化学染色。结果:在配置Hoffm an镜头的倒置显微镜下人睾丸圆形细胞主要可分为4群:支持细胞(Sertoli)细胞,粗线期初级精母细胞,精原细胞,圆形精子细胞。原位杂交结果为:Sertoli细胞、粗线期初级精母细胞、精原细胞均显示2个着丝粒信号,圆形精子细胞及精子显示单个着丝粒信号。抗c-k it抗体免疫化学染色显示:粗线期初级精母细胞、精原细胞反应呈阳性,Sertoli细胞、圆形精子细胞、精子反应呈阴性。结论:人睾丸各类细胞在活体形态、染色形态、染色体倍性、抗原表达上均有各自显著的特征,其中据Hoffm an成像形态区分各级生精细胞是在活体状态下一种简便有效的鉴别人生精细胞的方法。