人肝癌细胞膜离子通道特性研究

目的：研究人肝癌细胞系ＢＥＬ７４０２细胞膜离子通道特性。方法：膜片钳技术的全细胞记录方式。结果：人肝癌细胞系ＢＥＬ７４０２细胞获得稳定高阻封接的最佳培养时间是细胞传代培养７２ｈ，细胞的静息膜电位为（－２２．２±－２．８）ｍＶ，几乎每一次记录都发现相似的跨膜电流，该跨膜电流具有电压依赖及不失活特性，翻转电位在－８０～－６０ｍＶ，能被已知的Ｋ＋通道阻断剂阻断。结论：在人肝癌细胞系ＢＥＬ７４０２细胞膜上存在类似于神经元和肌肉细胞的延迟整流性Ｋ＋通道。

厚朴酚对脑缺血的保护作用

目的 研究厚朴酚对脑缺血的保护作用。方法 采用小鼠常压耐缺氧实验 ,测定小鼠氧耗量及存活时间 ;小鼠双侧颈总动脉结扎引起急性不完全脑缺血模型 ,测定小鼠死亡时间 ;大鼠大脑中动脉阻塞法 (MCAO)造成局灶性脑缺血模型 ,评价动物行为功能 ,测定脑梗死范围及脑组织中SOD、MDA及LDH的含量 ,并进行病理学组织检查。结果 厚朴酚能剂量依赖性地延长小鼠缺氧缺血的存活时间 ;改善大鼠脑缺血造成的行为缺陷 ,提高脑组织中SOD和LDH活性 ,减少MDA含量 ,缩小梗死范围 ,降低脑含水量。病理学组织检查显示 ,厚朴酚能改善脑缺血造成的大鼠神经细胞的损伤 ,减少组织坏死。结论 厚朴酚对脑缺血有保护作用 。

甲状腺素诱导的豚鼠肥厚心肌中延迟整流钾电流离子通道特征

目的在甲状腺素诱导的豚鼠心肌肥厚模型上，研究肥厚心肌细胞延迟整流钾电流（ＩＫ）中快激活成份（Ｉｋｒ）及慢激活成份（Ｉｋｓ）离子通道特征。方法采用全细胞膜片钳技术。结果在甲状腺素诱导的肥厚心肌细胞中，Ｉｋｒ及Ｉｋｓ的电流幅度随去极化电压的增加较正常心肌细胞明显增大，且Ｉｋｒ ｔａｉｌ及Ｉｋｓ的增加程度分别大于Ｉｋｒ及Ｉｋｓｔａｉｌ°心肌肥厚使Ｉｋｓ激活曲线向负的电压方向偏移，对Ｉｋｒ激活曲线无明显影响。结论甲状腺素诱导的肥厚心肌使Ｉｋｒ及Ｉｋｓ明显增加。

芍药苷对大鼠心肌细胞L钙通道的阻断作用

目的 在单个大鼠心肌细胞上 ,研究芍药苷对L型钙通道的阻断作用。方法 采用全细胞膜片钳技术。结果 芍药苷浓度依赖性阻断ICa ,L,其IC50 为 387μmol·L- 1 。应用 40 0 μmol·L- 1 芍药苷后 ,ICa,L最大电流幅度下降 51 % ,但I U曲线的形态和反转电位没有变化 ,激活曲线也没有明显的改变 ;失活曲线向较负电压的方向偏移约 8 3mV ,通道从失活中恢复的时间明显延长 ,由给药前的 (96± 1 7)ms增至 (1 85± 2 8)ms ;芍药苷的阻断作用没有显示出频率依赖性。结论 芍药苷对心肌细胞ICa 。

甲状腺素诱导的豚鼠肥厚心肌中快速激活的延迟整流钾电流和内向整流钾电流离子通道特征

在甲状腺素诱导的豚鼠心肌肥厚模型上，采用膜片钳全细胞技术，研究病变心肌细胞APD，Ikr及Ik1离子通道特征，以及药物治疗后其离子通道的改变。结果表明，肥厚心肌细胞APD明显缩短，静息电位及动作电位幅度不变，Ikr及Ik1均显著增加，反转电位不变。经propranolol治疗后，心肌APD，Ikr及Ik1均有明显改善，不影响Ikr的反转电位，但使Ik1反转电位向负的方向偏移。以上结果提示，甲状腺素诱发的心肌肥厚加重心律失常的严重性与增加Ikr及Ik1有关，作用多通道的复合型抗心律失常药有较好的治疗作用。

大白鼠海马CA_1区锥体细胞的急性分离及其电生理学特性

目的：建立适用于膜片组技术（Patchclamptechnigue，PCT）的大白鼠海马CA_4区锥体细胞（rathippocampalCApyramidalneuron，RHCPN）的急性分离方法，并测定该细胞的电生理学特性。方法：用7～21d大鼠，以链霉蛋白酶E酶解加吸管吹打法制备RHCPN，用全细胞PCT测定其电生理学特性。结果：分离的RHCPN易用于PCT，且具有正常的电生理学特性，并保存了主要的电压依赖性和受体门控性高于通道特性。结论：本法分离的RHCPN适用于PCT电生理学研究。

苄普地尔对豚鼠甲亢性肥厚心肌中延迟整流钾电流的抑制作用

目的 研究苄普地尔 (bepridil)对肥厚心肌细胞延迟整流钾电流 (IK)中快激活成份 (IKr)和慢激活成份(IKs)及内向整流钾电流 (IK1 )的作用。方法 全细胞膜片钳技术。结果 在肥厚心肌细胞中 ,Bepridil 30 μmol·L- 1 对IKr及IKs有阻断作用 ,抑制率分别为 2 0 9% (0mV)和 2 7 2 % (+5 0mV)。“Envelopeoftail”显示bepridil对IKs的阻断作用大于IKr。Bepridil(1- 10 0 μmol·L- 1 )浓度依赖性的阻断IKs及IKr,其IC5 0 分别为 2 3 8μmol·L- 1 和 46 7μmol·L- 1 。Bepridil30 μmol·L- 1 也能阻断IK1 ,抑制率为 15 1% (- 10 0mV) ,但不影响其反转电位。结论 Bepridil对甲亢性豚鼠肥厚心肌中IKs,IKr及IK1

小鼠心室肌细胞外向电流的特征分析

用全细胞膜片箝技术研究了小鼠心室肌细胞去极化激活的非钙依赖性外向电流的特征。短时去极化至－５０ｍＶ以上电位可引发快速上升的外向钾电流，之后缓慢衰减至一平台。在改变保持电位时，该峰电流与平台电流的比值也发生改变，并测得两者翻转电位分别为－６４．３±３．９和－５３．３±２．９ｍＶ。外向电流的衰减过程可用双指数方式很好拟合，而在５００ｍｓ预脉冲刺激后再经去极化刺激的电流时程适合单指数方式。结果提示：小鼠心室肌细胞的外向电流包括两种失活成分（Ｉｋｆ，和Ｉｋｓ），它们对４－氨基吡啶具有相似的敏感性。Ｉｋｆ的稳态失活在测试电位范围内（－８０－＋３０ｍＶ）均不完全，这可能与小鼠心肌动作电位时程很短有关联。

谷氨酸对大鼠海马CA_1区锥体细胞电压依赖性Na^+电流的影响

本实验采用全细胞膜片钳技术，观察了谷氨酸对急性分离的海马ＣＡ_１区神经元的电压依赖性ＮＡ~＋通道的影响， 结果发现谷氨酸对电压依赖性Ｎａ~＋电流有明显抑制作用，其抑制方式呈电压依赖性、浓度依赖性和时间依赖性，表明 谷氨酸对电压依赖性钠通道有抑制作用。

四氢小檗碱衍生物86035对豚鼠心室肌L型钙通道的抑制作用

目的 研究氯苄基四氢小檗碱 (CPU) 86 0 35对豚鼠单个心室肌细胞L型钙通道的抑制作用 ,分析对L型钙通道相互作用的状态依赖性。方法 采用膜片钳全细胞技术 ,记录不同浓度(5 0～ 2 5 0 μmol/L)CPU86 0 35作用前后的L型钙电流 (ICa L)。结果 (1)CPU86 0 35呈剂量依赖性地抑制L型钙电流 ,半数抑制浓度 (IC50 )为 75 μmol/L。(2 )CPU86 0 35对L型钙电流的抑制依赖于保持电位(HP)。HP =- 4 0mV时 ,75 μmol/LCPU86 0 35的抑制率为 4 9%± 2 % ,HP =- 80mv时 ,抑制率为6 4 %± 4 %。 (3)CPU86 0 35作用后 ,稳态激活曲线右移 ,V1/ 2 由对照的 6 7mV± 1 6mV变为 15 4mV±0 8mV。 (4)CPU 86 0 35作用后 ,稳态失活曲线右移 ,V1/ 2 由对照的 - 19 1mV± 2 5mV变为 - 12 6mV± 2 7mV。 (5 )用药后L型钙通道从失活状态恢复的时间变长。结论 CPU86 0 35对L型钙通道有较强的抑制作用 。

心肌细胞钙火花

心肌细胞钙火花是肌浆网上一个或几个成簇状分布的RyR所产生的局部钙释放,可通过单个L 型钙通道开放所触发或自发发放。钙火花呈随机发放,出现在Z线附近,其动力学特征受多种因素的调节。此外,T 型钙电流、Na+ /Ca2+交换、ICa(TTX)和IP3 等也是钙火花触发的来源。

延迟整流性K^+通道在人肝癌细胞增殖中的作用

目的：研究延迟整流性Ｋ＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用。方法：采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录人肝癌细胞在不同浓度ＥＧＦ中延迟整流性Ｋ＋通道的跨膜电流。利用氚标记的胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入技术观察ＥＧＦ和Ｋ＋通道阻断剂（ＴＥＡ）对人肝癌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：发现表皮生长因子（ＥＧＦ）促进肝癌细胞增殖的同时使肝癌细胞膜离子通道的跨膜Ｋ＋电流增加。Ｋ＋通道阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）能显著抑制ＥＧＦ促进ＤＮＡ合成的作用，具有明显的量效关系和时间依赖性，但对细胞的活力无明显影响。结论：人肝癌细胞的增殖活动需要延迟整流性Ｋ＋通道参与。

一种快速的小鼠心室肌细胞分离方法

报道一种快速简便的小鼠心室肌细胞分离方法，获得形态结构完整、电生理学特性正常的钙耐受性单个心肌细胞。

Ras类原癌基因产物Ran GTPase在细胞增殖调控中的作用

Ran是一种大量分布于细胞核内的GTP酶，是Ras类原癌基因大家族中的一员．Ran的功能多种多样，有许多证据表明Ran及其结合蛋白参与调控细胞周期中的多个过程。目前比较确认的功能主要包括：通过调节核质物质转运而调控细胞周期调控因子的定位、调控核膜装配、调控DNA复制、调控纺锤体组装等。此外，还有资料显示Ran参与细胞核结构的维持、mRNA转录和剪接、RNA由核内向胞质中转运等．本文主要对Ran调控核膜装配、DNA复制、纺锤体组装等机理进行评述．

肝性脑病大鼠海马CA1区锥体细胞氨基酸激活电流改变

探讨氨基酸受体门控性离子通道电流改变在肝性脑病（ＨＥ）发生中的作用。方法用快速加药装置将５０μｍｏｌ／Ｌγ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）或１ｍｍｏｌ／ＬＮ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）＋１０μｍｏｌ／Ｌ甘氨酸（Ｇｌｙ）加于急性分离的大白鼠海马ＣＡ１区锥体细胞周围，用全细胞膜片钳技术记录ＧＡＢＡ或ＮＭＤＡ激活的电流。结果ＨＥ大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞ＧＡＢＡ激活的内向电流的强度为４１３．３±４３６．８ｐＡ（３１例），比对照大鼠（２３３．４±１７９．７ｐＡ，２８例）有较大增强（ｔ＝２．１０４９，Ｐ＜０．０５）。并观察到ＨＥ大鼠ＧＡＢＡ激活电流的出现频率较对照大鼠高。ＨＥ大鼠ＮＭＤＡ激活的内向电流的强度为４０８．５±３１７．２ｐＡ（３７例），比对照大鼠（８８２．６±８９６．５ｐＡ，２６例）弱（ｔ＝２．５８５１，Ｐ＜０．０５）。两组大鼠ＮＭＤＡ激活电流的出现频率无明显差异。结论氨基酸受体门控性离子通道电流改变在肝性脑病发生中起一定作用。

延迟整流性K^+通道在肿瘤坏死因子α抑制人肝癌细胞增殖中的作用

目的 研究延迟整流性 Ｋ＋ 通道在肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα） 抑制人肝癌细胞增殖中的作用。方法 采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录人肝癌细胞的跨膜电流，氚标记的胸腺嘧啶核苷掺入技术测定人肝癌细胞的 Ｄ Ｎ Ａ 合成能力。结果 Ｔ Ｎ Ｆα抑制肝癌细胞增殖的同时，未能使肝癌细胞膜离子通道的跨膜 Ｋ＋ 电流和细胞膜电导降低。 Ｋ＋ 通道阻断剂四乙胺不能进一步增加 Ｔ Ｎ Ｆ 抑制 Ｄ Ｎ Ａ 合成的作用，且无明显量效关系和时间依赖性。结论 Ｔ Ｎ Ｆα抑制人肝癌细胞增殖不是通过对细胞膜 Ｋ＋通道的干扰来实现。

肝性脑病大白鼠急性分离的海马CA_1区锥体细胞K^+、Na^+电流改变

研究表明，肝性脑病（ｈｅｐａｔｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ，ＨＥ）动物模型或人脑内调控离子通道的受体，如中枢型苯二氮艹卓受体、生长抑素受体，结合特性有改变［１，２］。这些改变有可能引起中枢神经元的电压依赖性离子通道和跨膜Ｎａ＋、Ｋ＋电流的改变，...

苄普地尔抑制大鼠海马CA1区锥体细胞钠电流(英文)

目的:研究苄普地尔对大鼠海马CA1区锥体细胞钠电流的影响。方法:膜片箝全细胞记录技术。结果:苄普地尔显著降低大鼠海马CA1区锥体细胞钠电流,作用呈时间及浓度依赖关系。苄普地尔10μmol·L^(-1)的半阻断时间约为10min。IC_(50)为2.6(2.3-2.9)μmol·L^(-1)。苄普地尔10μmol·L^(-1)右移最大电流的激活电位10mV,左移半失活膜电位18mV,表明其电压依赖地影响钠通道的激活和失活过程。结论:苄普地尔阻断大鼠海马CA1区锥体细胞钠电流,可能是其抗脑缺血机制之一。