自发性高血压大鼠和Wistar-Kyoto大鼠心血管组织肾上腺髓质素和肾上腺髓质素原N-末端20肽的水平(英文)

本工作观察了自发性高血压大鼠 (SHRs)和Wistar kyoto (WKY)大鼠心肌和主动脉肾上腺髓质素 (a drenomedullin ,ADM)和肾上腺髓质素原N 末端 2 0肽 (proadrenomedullinNterminal 2 0peptide ,PAMP)的水平。以放射免疫分析方法测定血浆、心肌和主动脉ADM含量。用竞争性定量逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法测定心肌和主动脉ProADMmRNA含量。结果发现 ,SHRs心肌和主动脉ProADMmRNA水平分别比WKY大鼠高 66 7%和 73 % (均P <0 0 1)。SHRs血浆、心肌和主动脉ADM ir含量分别较WKY大鼠高 2 9%、76 7%和 79% (均P <0 0 1)。SHRs血浆、心肌和主动脉PAMP ir水平分别较WKY大鼠高 42 5 % (P <0 0 1)、47 2 % (P <0 0 1)和 2 7 3 % (P <0 0 5 )。另外 ,SHRs的ADM和PAMP的比值较WKY大鼠明显增高 (心肌和主动脉分别为 2 0± 0 2 5vs 1 64± 0 3和 2 2± 0 18vs 1 5 6± 0 2 8)。结果提示 ,SHRs心肌和主动脉ProADM基因表达上调 ,ADM和PAMP水平升高 ,但二者升高的比例不一致。

儿茶酚抑素的心血管作用

儿茶酚抑素(catestatin)是由21个氨基酸组成的内源性多肽,来源于肾上腺嗜铬细胞和肾上腺能神经元胞浆中的嗜铬颗粒蛋白A。儿茶酚抑素能够有效抑制交感肾上腺系统儿茶酚胺的释放,刺激肥大细胞释放组胺,趋化单核细胞,发挥扩张血管、降低血压、降低心肌收缩力的作用。人类儿茶酚抑素的三种变异体(Gly364Ser、Pro370Leu及Arg374Glu)具有不同的调节自主神经活性和心脏反应性的作用。越来越多的证据表明,儿茶酚抑素是调节血压及心脏功能的新的神经内分泌多肽。

重视心血管活性多肽的炎症和免疫调节作用

心血管活性多肽是指由心血管细胞自身或其它细胞合成和分泌的,心血管组织细胞富含的受体、并可以与其结合而发挥相应生物学活性功能的肽类物质。大多数心血管活性多肽由4～50个氨基酸残基组成,其种类繁多,具有分子量小、作用快捷、代谢迅速、效应广泛等生物学特征。心血管活性多肽是调节肽,主要以旁分泌或自分泌方式作用于心血管组织,与特定受体结合后,对心脏和血管呈现细胞收缩、舒张、增生、肥大迁移。

尾加压素II及其心血管效应

尾加压素II(urotensinII,UII)最早是从鱼尾部下垂体中分离出的神经环肽 ,目前已从人体克隆出来 ,主要分布于神经和心血管组织 ,人体内一种孤立的G蛋白偶联受体GPR14是其特异性受体 ,主要分布于心血管和神经系统。当UII与GPR14结合后 ,引起细胞外Ca2 +内流 ,介导一系列生物学效应。在心血管系统 ,小剂量UII引起血流阻力轻度降低 ,心输出量轻度增加 ;大剂量引起心输出量明显减少 ,动脉血管强烈收缩 ,其缩血管效应是内皮素 1的 10余倍 ,是迄今所知最强的缩血管活性肽。

心脑血管疾病发病和防治的基础研究

近10年来中国心脑血管病发病率、死亡率和危险因素仍呈直线上升趋势,而西方国家已呈平缓下降趋势.心脑血管病构成我国40.72%的死亡（头号杀手）,为国人造成了巨大的健康威胁与经济负担.目前,心脑血管疾病防治的进展,还不能从根本上解决国人心脑血管疾病发病率和死亡率逐年上升的问题.国家科技部批准“心脑血管疾病发病与防治的基础研究”为国家重大基础发展规划“973”资助项目（2000～2005年）,旨在建立心脑血管疾病发病的分子机理和整合研究的新观念,形成具有中国特色的心脑血管病基础研究体系,以期在心脑血管疾病发病的共同机制和防治的理论研究上取得突破.经项目组成员五年的共同努力,在下述重要科学问题的研究上取得了一批自主创新的科研成果.

尾加压素Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究体内新发现的缩血管活性肽尾加压素Ⅱ（ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ， Ｕ Ⅱ）对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖作用的影响以及ＵⅡ作用的细胞内信号转导机制。方法在培养的大鼠主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）上，采用［３Ｈ］－胸腺嘧啶（［３Ｈ］－ＴｄＲ）参入法，观察 ＵⅡ对细胞 ＤＮＡ合成的刺激作用；加入不同的细胞内信号转导阻断剂，观察对ＵⅡ效应的影响。结果 Ｉ× １０－９～ １× １０－７ ｍｏｌ·Ｌ－１ ＵⅡ以浓度依赖方式促进 ＡＳＭＣ［３Ｈ］－ＴｄＲ参入增加， １× １０－９、１× １０－８和 １×１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ＵⅡ组［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量分别较对照组增加２２％（Ｐ＜０．０５），５７％（Ｐ＜０，０１）和６５％（Ｐ＜０．０１）。ＵⅡ的效应能被钙通道阻断剂尼卡地平、ＰＫＣ阻断剂Ｈ７、钙调素激酶（ＣａＭ－ＰＫ）阻断剂 Ｗ７和 ＭＡＰＫ阻断剂 ＰＤ９８０５９所阻断，抑制率分别为５５％（Ｐ＜０．０１），２７％（Ｐ＜０．０１），１８％（Ｐ＜０．０５）和１６％（Ｐ＜０．０５）。结论 ＵⅡ是一种新发现的强烈的促ＡＳＭＣ增生的内源性丝裂原，其促丝裂效应可能通过Ｃａ２＋、ＰＫＣ、ＣａＭ－ＰＫ和ＭＡＰＫ来介导。

高肺血流量对肺血管结构及胱硫醚-γ-裂解酶基因表达的影响

目的 :探讨高肺血流量所致肺动脉高压大鼠肺血管结构和内源性硫化氢体系的变化。方法 :SD大鼠共1 6只 ,随机分为分流组及对照组。对分流组大鼠行腹主动脉 -下腔静脉分流术。 1 1周后以右心导管法测定肺动脉平均压 (pulmonaryarterymeanpressure ,mPAP)。检测右心室 /体重 (rightventricle/bodyweight,RV/BW )和右心室 /左心室 +室间隔 (rightventricle /leftventricleplusseptum ,RV/LV +S)比值。并且以光学显微镜和电子显微镜观测肺血管结构的变化。以分光光度法测定血浆硫化氢 (hydrogensulfide,H2 S)含量。化学法测定肺组织硫化氢产出率 ,以原位杂交的方法检测肺动脉胱硫醚 γ 裂解酶 (cystuthionine γ lyase ,CSE)mRNA表达。 结果 :分流组大鼠mPAP、RV/BW及RV/ (LV +S)比值明显高于对照组 ,光镜下肺小血管肌化程度明显增强 ,肺中、小肌型动脉相对中膜厚度明显增加。电镜下 ,肺中、小肌型动脉内皮细胞增生、肥厚、肿胀 ,平滑肌细胞增生、肥厚 ,并由收缩表型向合成表型转化。分流组大鼠的血浆H2 S含量及肺组织CSE活性 (肺组织H2 S产出率 )明显低于对照组 ,肺动脉mRNA表达明显降低。结论 :肺血管结构重建是高肺血流量所致肺动脉高压的重要病理基础 ,内源性H2 S体系———mRNA表达、CSE活性及血浆H2

L-精氨酸调节大鼠低氧性肺血管结构重建与肺动脉平滑肌细胞凋亡

目的 :探讨L 精氨酸 (L arginine ,L Arg)对低氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响及其机制。方法 :将 17只Wistar大鼠随机分为对照组 (n =7)、低氧组 (n =5 )和低氧 +L Arg组 (n =5 )。对大鼠肺血管进行显微形态学观测。通过末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法 (TUNEL)检测肺动脉平滑肌细胞凋亡 ,并以免疫组织化学方法研究肺动脉平滑肌细胞Fas表达。结果 :低氧 2周后出现大鼠肺血管结构重建。同时 ,肺中、小型动脉凋亡平滑肌细胞百分数均明显低于对照组 (P均 <0 .0 5 ) ,平滑肌细胞Fas表达明显降低。然而 ,L Arg缓解了低氧性肺血管结构重建的形成。低氧 +L Arg组大鼠肺中、小型动脉凋亡平滑肌细胞百分数均明显高于低氧组 (P均 <0 .0 5 )。L Arg使低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞Fas表达明显增强。 结论 :L Arg通过使肺动脉平滑肌细胞Fas表达上调 ,促进肺动脉平滑肌细胞的凋亡 。

高肺血流量对肺血管结构及内源性硫化氢影响

目的 探讨高肺血流量所致肺动脉高压(PH)大鼠肺血管结构和血浆硫化氢的变化。方法 雄性SD大鼠共16只。对分流组大鼠行腹主动脉、下腔静脉分流术;11周后以右心导管法测定肺动脉平均压(mPAP);检测右心室/体重(RV/BW)和右心室/左心室+室间隔(RV/LV+S)比值;并以光学显微镜和电子显微镜观测肺血管结构变化;以分光光度法测定血浆硫化氢含量。结果 分流组大鼠mPAP、RV/BW及RV/(LV+S)比值均明显高于对照组(P均<0.01);光镜下肺小血管肌化程度明显增强,肺中、小肌型动脉相对中膜厚度明显增加;电镜下,肺中、小肌型动脉内皮细胞增生、肥厚、肿胀,平滑肌细胞增生、肥厚,并由收缩表型向合成表型转化。分流组大鼠的血浆H_2S含量明显低于对照组,肺动脉平均压与血浆硫化氢含量呈负相关。结论 肺血管结构重建是高肺血流量所致PH重要病理基础,内源性H_2S下调可能在其形成中起重要作用。

一氧化氮诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡机制研究

目的 :研究一氧化氮 (NO)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)凋亡的作用机制。方法 :体外培养Wistar大鼠PASMC ,加入NO供体硝普钠 (SNP)于常氧和低氧条件下孵育 12h或 2 4h ,通过流式细胞术碘化丙啶染色法观察PASMC细胞周期时段及凋亡亚二倍体峰变化 ,应用细胞免疫化学法检测PASMCcaspase - 3和NF -κB的表达 ,同时行DNA断裂琼脂糖凝胶电泳。结果 :SNP作用后PASMC出现剂量 -依赖性促凋亡作用 (P <0 .0 1) ,表现为凋亡指数与caspase - 3表达的不同程度的增强。随凋亡的进展 ,出现PASMC凋亡核小体DNAladder,同时PASMCNF-κB阳性核表达较对照组少 (P <0 .0 1)。结论 :外源性NO诱导大鼠PASMC凋亡 ,caspase - 3与NF

L-精氨酸对高肺血流所致肺血管结构重建的调节

目的 探讨L 精氨酸 (L Arg)对高肺血流所致肺血管结构重建的作用及其机制。方法 2 0只Sprague Dawley大鼠随机分为对照组 (n =6 )、分流组 (n =7)和分流 +L Arg组 (n =7)。对分流组和分流 +L Arg组大鼠行腹主动脉 -下腔静脉分流术。对分流 +L Arg组大鼠每天予L Arg 1g·kg-1灌胃。 11wk后 ,以右心导管法测定肺动脉平均压(mPAP) ;检测右心室 /左心室 +室间隔 (RV/LV +S)比值 ;观测肺血管显微和超微结构的变化 ;免疫组织化学方法检测肺动脉人类尾加压素II(hUII)的表达。结果 分流组大鼠mPAP和RV/LV +S比值明显高于对照组 (P均 <0 0 1) ,并且肺动脉显微和超微结构发生明显改变。分流组大鼠肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞hUII表达明显增强。分流 +L Arg组大鼠mPAP和RV/LV +S比值明显低于分流组 (P均<0 0 5 )。L Arg缓解了肺血管结构重建的形成 ,同时明显抑制了分流大鼠肺动脉hUII的表达。结论 L Arg抑制肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞新型血管活性肽hUII表达 。

高肺血流量所致肺动脉高压大鼠肺血管结构和气体信使分子的变化

目的 :探讨高肺血流量所致肺动脉高压大鼠肺血管结构和两种气体信使分子的变化。方法 :对大鼠行腹主动脉 -下腔静脉分流术。 1 1周后 ,以右心导管法测定肺动脉平均压 (PAMP)。检测右心室 /体重 (RV/BW )和右心室 /左心室 +室间隔 (RV/LV +S)比值。观测肺血管显微及超微结构的变化。并且以分光光度计测定血浆一氧化氮 (NO)和一氧化碳 (CO)含量 ,以免疫组织化学方法检测肺动脉内皮细胞内皮型NO合酶 (eNOS)和平滑肌细胞血红素加氧酶 - 1 (HO - 1 )的表达。结果 :分流组大鼠PAMP、RV/BW及RV/ (LV +S)比值明显高于对照组 (P均<0 0 1 )。光镜下 ,肺小血管肌化程度明显增强 ,肺中、小型肌型动脉相对中膜面积及厚度明显增加。电镜下 ,肺腺泡内动脉内皮细胞增生、变性 ,内弹力层粗细不均 ,平滑肌细胞肥厚、向合成表型转化。并且分流组大鼠血浆NO含量明显高于对照组 (P <0 0 1 ) ,肺动脉内皮细胞eNOS表达明显增强。而分流组大鼠血浆CO含量和肺动脉平滑肌细胞HO - 1表达与对照组相比无明显变化。结论 :肺血管结构重建是左向右分流所致肺动脉高压的重要病理基础 。

牛磺酸拮抗溶血磷脂酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖作用

目的 观察牛磺酸 (Tau)对溶血磷脂酸 (LPA)诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖作用的影响。方法 在培养的大鼠血管平滑肌细胞上 ,测定3 H 胸腺嘧啶核苷(3 H TdR)参入和丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性 ;硫代巴比妥酸盐 (TBA)法测脂质过氧化终产物丙二醛 (MDA)含量。结果 LPA (1× 10 -9～ 1× 10 -7mol·L-1)呈浓度依赖性增加VSMC 3 H TdR参入 ,5、10和 2 0mmol·L-1Tau及MAPK抑制剂PD0 980 59预孵育后分别使LPA (1× 10 -7mol·L-1)诱导的3 H TdR参入较单独LPA组减少 15 %、34%、4 8%和 5 4 % (P <0 0 5或P <0 0 1)。LPA增加VSMCMAPK活性 ,5、10和 2 0mmol·L-1Tau预孵育降低LPA(1× 10 -7mol·L-1)刺激的MAPK活性 ,较单纯LPA孵育低14 %、35 %和 4 4 % (P <0 0 5或P <0 0 1)。随着加入LPA的浓度增加 ,细胞MDA含量增加。与 1× 10 -7mol·L-1LPA组比较 ,5、10和 2 0mmol·L-1Tau预处理的细胞较LPA单独孵育组细胞MDA含量分别低 18%、2 7%、4 5 % (P<0 0 5或P <0 0 1) ,LPA诱导细胞MDA生成的作用不受PD0 980 59预孵育的影响 (P >0 0 5 )。结论 LPA呈浓度依赖性促进VSMC增殖和脂质过氧化 ,前者与其细胞内信号传导MAPK途径有关 ,Tau可有效拮抗LPA诱导的VSMC增殖、MAPK激活和脂质过氧化损伤 。

内皮素参与溶血磷脂酸促血管平滑肌细胞的增殖

目的 :观察内皮素 (endothelin ,ET)对溶血磷脂酸 (lysophosphatidicacid ,LPA)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用。方法 :离体培养的VSMCs经不同浓度的LPA孵育后测定 [3 H] 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入 ,ETmRNA含量及ET的合成和释放量。结果 :LPA(5、10和 2 0 μmol·L-1)增加VSMCsETmRNA表达 ,VSMCsETmRNA含量分别较对照组高 16 %、2 1%和 2 3%。LPA亦以浓度依赖的方式增加VSMCsET的合成释放。 5～2 0 μmol·L-1LPA处理组细胞培养上清中ET含量较对照组高 14 0 %～ 2 0 0 % (P <0 .0 1)。 5～ 2 0 μmol·L-1LPA以浓度依赖的方式促进VSMCsDNA合成 ,非选择性的ETA 受体拮抗剂BQ12 3显著拮抗LPA刺激的VSMCs的DNA合成增加。结论 :LPA可促进VSMCs的ET产生 ,LPA的促VSMCs增殖效应部分是通过ET/ETA 受体途径介导。

左旋硝基精氨酸诱导的高血压大鼠心肌和血管的肾上腺髓质素与受体活性修饰蛋白2表达的变化

探讨高血压大鼠心肌和血管的肾上腺髓质素（adrenomedullin,ADM）与受体活性修饰蛋白2（receptoractivity-modifying protein 2,RAMP2）mRNA的变化。用一氧化氮合酶（NOS）竞争性抑制剂左旋硝基精氨酸（L-NNA）阻断NOS制备大鼠高血压模型。用放射免疫分析方法测定血浆、心肌和血管ADM含量,及竞争性定量RT-PCR方法测定心肌和血管ADM mRNA与RAMP2 mRNA含量。结果表明,NOS阻断剂L-NNA应用4周后动物血压明显升高、心肌肥厚。心重（mg）/体重（g）比值增加35.5％（P<0.01）。血浆、心肌和血管的ADM-ir较对照组分别增加80％、72％和57％（均P<0.01）。高血压大鼠心肌和血管ADM mRNA含量显著增加,分别较正常大鼠高50％（P<0.05）和102.9％（P<0.05）。高血压大鼠心肌和血管的RAMP2 mRNA含量均显著增加,分别较正常大鼠高132％（P<0.01）和87％（P<0.01）。高血压大鼠心肌和血管ADM的升高与RAMP2的升高程度呈明显的正相关,其相关系数分别为0.741和0.885。上述观察结果表明,高血压时血浆、心肌和血管ADM水平升高,心肌和血管ADM与RAMP2基因表达上调,提示ADM/RAMP2系统在高血压发病中可能具有重要作用。

钙调神经磷酸酶在血管紧张素Ⅱ刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节

目的 :观察钙调神经磷酸酶 (CaN)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节。方法 :建立AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大模型 ,观察CaN抑制剂对AngⅡ刺激的心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入的影响 ,以及各种因素对心肌细胞CaN酶活性的影响。结果 :10、10 0、10 0 0nmol·L-1的AngⅡ作用 12h分别使心肌细胞的CaN活性增加了 13%、5 7% (P <0 0 5 )、2 2 8% (P <0 0 1)。AngⅡ (10nmol·L-1)刺激心肌细胞 2h内 ,CaN活性与对照组无明显差异 (P <0 0 5 ) ;AngⅡ刺激心肌细胞 12h以上 ,CaN活性才明显增高 (P <0 0 5 )。Losartan(5 0 μmol·L-1)、H7(5 0 μmol·L-1)及Fura - 2 /AM(4 μmol·L-1)可明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性 ;而PD980 5 9(5 0 μmol·L-1)对AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性无明显影响。AngⅡ (10 -7mol/L)刺激的大鼠心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入明显高于对照组 (P <0 0 1) ,而CaN特异性抑制剂 -环孢素A(0 5～ 5 μg/mL)可以明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入。结论 :依赖Ca2 +/CaM活化的CaN可能在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用 ;CaN的活化可能有赖于胞内Ca2 +水平的持续升高 ,另外 。

自发性高血压大鼠心肌和血管组织牛磺酸的转运障碍(英文)

在自发性高血压大鼠 (SHR)的心肌和主动脉血管组织上观察牛磺酸 (taurine)转运和牛磺酸转运体(taurinetransporter,TAUT)mRNA的改变。结果显示 ,与对照组WKY大鼠相比 ,SHR组血浆牛磺酸水平和牛磺酸释放量增加 ,而心肌和血管组织牛磺酸水平和TAUTmRNA含量均降低 ,牛磺酸最大转运速率 (Vmax)分别低 2 4 %和 35 % (P <0 0 5 ) ,米氏常数 (Km)值分别高 16 %和 39% (P <0 0 5 )。这些结果提示 。

左向右分流大鼠肺血管超微结构的动态变化及血浆硫化氢含量观察

目的探讨左向右分流大鼠肺血管超微结构的动态变化及与内源性硫化氢(H2S)的关系。方法经下腔静脉-腹主动脉穿刺术建立左向右分流动物模型,分别在分流术后1、3d,1、4、8周各实验时间点处死大鼠,制作肺组织电镜标本,并用敏感硫电极法测量大鼠血浆H2S含量。结果肺血管超微结构动态变化为进行性加重,首先为内皮细胞改变,然后为平滑肌细胞,最后出现细胞外基质异常堆积。分流组大鼠血浆H2S含量在分流术后4周与对照组比较明显增高。结论左向右分流大鼠肺血管超微结构动态变化中伴随内源性H2S变化,提示内源性H2S可能在肺血管结构改变中发挥调节作用。

同型半胱氨酸抑制人血管内皮细胞精氨酸转运

目的 :观察同型半胱氨酸 (homocysteine,HCY )对人脐静脉内皮细胞左旋 精氨酸 一氧化氮 (L arginine NO)途径的影响及HCY致血管损伤的机制。方法 :将培养的人脐静脉内皮细胞随机分 4组 (每组n =6 ) ,加入HCY使终浓度分别为 0、0 .0 1、0 .1和 1mmol·L- 1 ,培养 12h后 ,检测内皮细胞存活率、乳酸脱氢酶 (lactatedehydro genase ,LDH)漏出及细胞L arginine转运、一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)活性和亚硝酸盐 (NO2 )生成的变化。结果 :与对照组相比 ,0 .1mmol·L- 1 HCY增加LDH漏出 ,1mmol·L- 1 HCY降低细胞存活率 ,增加LDH漏出 ;0 .1、1mmol·L- 1 组NO生成显著降低 ,但仅在 1mmol·L- 1 组才降低NOS活性。HCY呈浓度依赖地降低内皮细胞L arginine转运 ,0 .0 1mmol·L- 1 HCY即明显抑制细胞L arginine转运速率 ,0 .1、1mmol·L- 1 HCY不仅显著降低细胞L arginine最大转运速率 ,而且增高米氏常数 ,降低了转运效率。 结论 :HCY损伤人血管内皮细胞L arginine NO途径 ,尤其是抑制细胞L arginine转运 ,这可能是HCY导致心血管疾病时心血管功能和结构损伤的重要机制之一。