皮肤真菌微生态研究进展

随着近年来分子学技术的发展,高通量测序和宏基因组学技术为研究人体皮肤微生态提供了可能。皮肤微生态的变化与银屑病、特应性皮炎、痤疮和慢性伤口等多种炎症性和感染性疾病的发生和发展相关。真菌成分在皮肤中含量远低于细菌,但会影响很多皮肤疾病和机会性感染的发生,因而皮肤微生态中真菌的构成开始逐渐引起人们重视。本文将就近年皮肤真菌微生态研究方法学以及其与皮肤疾病的关系的研究进展进行综述。

外用抗真菌药物治疗甲真菌病进展

本文就外用抗真菌药物治疗甲真菌病进展进行综述,包括在临床上已广泛应用的8%环吡酮甲涂剂及5%阿莫罗芬搽剂,美国FDA批准的两个新药10%艾氟康唑溶液及5%Tavaborole溶液,以及一些尚在研究中的卢立康唑、他扎罗汀等,并简述外用抗真菌药物治疗甲真菌病新剂型的应用。

真菌与变态反应性疾病的相关性

真菌的孢子和(或)菌丝经各种途径进入人体后,都有可能引起过敏反应,呼吸道和皮肤是真菌致敏的主要反应器官。该文就常见的致敏真菌、真菌的致敏机制、真菌所致呼吸道和皮肤变态反应性疾病等进行综述。

肺曲霉球1例及实验研究

目的对1例未进行真菌培养的肺真菌球患者术后的组织病理进行实验研究以确定病原菌属。方法 1例咯血并左肺上叶占位的患者接受了左肺上叶切除术,术后组织病理诊断肺真菌球,曲霉感染可能性大,但病变组织未进行真菌培养。本研究对其组织病理标本分别进行了真菌荧光染色、免疫组化染色和组织PCR。结果真菌荧光染色清楚地显示亮蓝色有隔菌丝,呈锐角分支;免疫组织化学染色提示病原菌为曲霉属;组织PCR检测结果阴性。结论当病变组织未进行真菌培养时,免疫组化技术有助于确定病原菌属。

皮肤癣菌假足菌肿

皮肤癣菌假足菌肿是一种罕见的深在型皮肤癣菌感染,至今国际上仅有十多例散发病例报道。该病主要由犬小孢子菌引起,组织病理特征性表现为真菌菌丝形成的假性颗粒结构。本文就皮肤癣菌假足菌肿的发病机制、临床表现、组织病理特点、致病真菌和治疗进行综述。

浅部真菌感染中的抗真菌药物治疗进展

浅部真菌感染是致病真菌侵犯皮肤的角质层、毛发和甲板所导致的感染,困扰着世界约25%的人口,导致患者生活质量下降[1-3]。浅部真菌感染可由皮肤癣菌、念珠菌属、马拉色菌属等引起,而尤以皮肤癣菌最为常见。临床上以足癣最为常见,其次为体癣、股癣以及甲真菌病[4]。除此之外,外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)也是常见的由念珠菌属引起的真菌感染,约75%的女性在其育龄期至少经历过一次VVC[5]。

舍他康唑对常见临床分离念珠菌属菌株的体外抗菌活性研究

目的 了解舍他康唑对常见临床分离念珠菌属菌株的体外抗菌活性。方法 参照美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）制定的M27-A3方案测定舍他康唑对112株念珠菌的MIC值。结果 舍他康唑对112株念珠菌在24h的MIC GM为0.18μg/mL,MIC范围为≤0.03-16μg/mL,MIC50和MIC90分别为0.125μg/mL、1μg/mL。对念珠菌属各菌种的MIC GM从低到高依次为白念珠菌0.08μg/mL,光滑念珠菌0.158μg/mL,近平滑念珠菌0.318μg/mL,热带念珠菌为0.425μg/mL,克柔念珠菌为1.414μg/mL。结论 舍他康唑对常见临床分离念珠菌属菌株均有较好的体外抗菌活性。

艾滋病合并真菌感染研究概述

真菌感染是艾滋病患者最常见、比重最大的机会性感染,是最重要致死原因之一。常见的机会性真菌感染包括:念珠菌病、卡氏肺孢子菌病、隐球菌病、马尔尼菲蓝状菌感染、组织胞浆菌病、球孢子菌病。本文介绍了机体的CD4^+T淋巴细胞与机会性真菌感染关系以及常见的真菌感染的流行病学、发病机制、临床表现、诊断、治疗、预防等方面研究进展。提高临床医生对这类真菌感染系统全面的认识,有助于做到早期诊断、早期治疗,合理选择抗真菌药物,从而提高患者生存质量,延长生存时间。

皮肤固定型孢子丝菌病1例及其相关实验检查

患者男,50岁。左上臂皮肤溃疡2年。皮损组织病理示:炎性肉芽肿改变,PAS染色可见圆形孢子和星状体。皮损真菌培养阳性,菌种鉴定为球形孢子丝菌。确诊为皮肤固定型孢子丝菌病,给予患者口服伊曲康唑和特比萘芬联合治疗3个月,皮损部分改善。之后患者间断口服特比萘芬联合碘化钾治疗,一年半后复诊仍有局灶性皮损未愈。

临床分离的携带TR34/L98H型的耐唑类药物烟曲霉的耐药机制分析

目的对临床分离的耐唑类药物烟曲霉菌株进行耐药机制等相关研究。方法自1例侵袭性曲霉病(IA)患者的肺泡灌洗液(BALF)中分离得到1株烟曲霉,采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)M38-A2微量液基稀释法测定伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、两性霉素B和卡泊芬净对该菌株的最低抑菌浓度(MIC)/最低有效浓度(MEC),并对该菌株的唑类药物靶酶基因cyp51A进行克隆和序列测定分析,扩增并检测该菌株的9个微卫星标记位点,将其与国际上已经报告的具有相同耐药基因型的烟曲霉菌株进行非加权配对算术平均法(UPGMA)聚类分析。结果伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、两性霉素B对该菌株的MIC分别为>16、2、0.5和2μg/m L,卡泊芬净对该菌株的MEC为0.25μg/m L。该菌株的cyp51A基因序列中存在启动子区-288^-322位间34 bp串联序列的插入,以及编码区T364A、T960A、T1554A的点突变,分别导致所编码蛋白98位、297位及495位氨基酸的置换(TR34/L98H/S297T/F495I)。微卫星分析显示,该菌株的微卫星分型与先前欧洲国家、亚洲其他国家分离的TR34/L98H/S297T/F495I型菌株不同。结论我们从1例IA患者BALF中分离到对唑类药物耐药的烟曲霉临床菌株,其耐药性是由cyp51A基因启动子区34 bp的串联序列插入结合基因编码区突变所致98位、297位及495位氨基酸置换(TR34/L98H/S297T/F495I)所介导,该菌株是中国所特有的、不同于国际上已描述的对唑类药物耐药的病原性烟曲霉。

白细胞介素17相关生物制剂治疗银屑病过程中浅部真菌感染的发生及应对策略

本文综述白细胞介素(IL)-17与皮肤黏膜真菌感染易感性的基本机制, 以及与IL-17相关的生物制剂, 如司库奇尤单抗、依奇珠单抗、布罗达单抗、拜莫克珠单抗和乌司奴单抗在治疗银屑病中发生的浅部真菌感染。与IL-17相关生物制剂治疗相关的浅部真菌感染以轻度或中度为主, 多呈局限性, 且抗真菌治疗效果良好。此外, 本文介绍了对相关浅部真菌感染的临床评估、监控与治疗措施, 为IL-17类生物制剂临床安全用药提供依据。

声带曲霉病的性状及诊治进展

声带曲霉病为声带真菌病中最常见的类型,但在耳鼻咽喉科真菌感染中发病率低,早期症状不典型,易误诊误治。查体或在纤维喉镜下可见声带附有白色或灰黄色苔膜,如对声带分泌物涂片进行真菌直接镜检和(或)培养有助于明确诊断,必要时取活检进行组织病理检查。治疗包括局部或全身抗真菌药物治疗、手术治疗或综合治疗。该文就声带曲霉病的临床表现、实验室检查和治疗进行综述。

三唑类抗真菌新药泊沙康唑和伏立康唑简介

随着侵袭性真菌感染的发病率和死亡率逐年增多,新近问世的新型抗真菌药物也越来越多。新一代广谱三唑类抗真菌药物泊沙康唑和伏立康唑,在体内和体外均有较强的抗真菌活性,临床上用其来预防和治疗侵袭性真菌感染。两药具有共有的作用机制,在抗真菌活性、药物代谢及安全性方面有着各自特点。分子结构上泊沙康唑和伏立康唑优于原有药物伊曲康唑和氟康唑,从而具备更强、更广的抗菌谱。两药的研发和应用表明抗真菌药物研究正朝着高效、广谱、低毒的方向发展,成为治疗各种类型真菌感染新的有力手段。然而,两药在临床研究和血药浓度监测方面仍待深入探究。本文将从分子结构、作用机制、适应症和药代动力学方面介绍两药,并对两药在未来的临床应用进行展望,为临床应用提供帮助。

中国大陆地区赛多孢霉感染流行现状的回顾性分析

为了解中国大陆地区赛多孢霉感染流行情况及诊治现状,该文通过对1978年来中国大陆地区报道的赛多孢霉感染病例进行回顾性分析。发现我国临床赛多孢霉感染的致病菌种以尖端赛多孢霉为主。感染常见部位依次为眼、肺、颅内、鼻窦、皮肤、关节、脊柱。感染类型以创伤后局部感染为主,其他类型为溺水后感染、免疫功能明显受损后感染及呼吸道内定植感染等。目前我国病原学诊断主要依赖真菌培养,分子生物学方法应用较少。治疗以单独抗真菌药物治疗为主,体外药敏实验及既往诊治经验表明赛多孢霉对伏立康唑敏感度高。我国多数赛多孢霉感染预后良好,而多育赛多孢霉所致播散感染预后差。目前赛多孢霉感染早期诊断困难,应该提高对该病特点的认识、形态学诊断水平,并积极开展分子鉴定,以达到早期准确诊断、治疗。

伊曲康唑临床应用的安全性分析

伊曲康唑作为第一代三唑类抗真菌药物,上市近30年,由于其广谱的抗真菌谱,被广泛应用于临床治疗浅部及深部真菌感染,少部分患者在应用伊曲康唑后会出现胃肠道反应、肝酶升高等不良反应,本文就伊曲康唑临床应用的不良反应及在儿童、老年人和孕妇等特殊人群中应用的安全性进行综述分析。

两株希木龙假丝酵母14α-去甲基化酶基因(ERG11)的克隆及其功能初步验证

为探讨希木龙假丝酵母(假丝酵母又称念珠菌)的耐药机制,首先克隆出两株希木龙念珠菌ERG11基因,初步验证其功能,从而为后续研究奠定基础。从美国国家生物技术信息中心(National Center of Biotechnology Information,NCBI)基因数据库中获取白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌Erg11蛋白的保守序列,设计简并引物,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增获得希木龙念珠菌ERG11cDNA部分片段;用快速cDNA末端扩增法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)分别扩增其5′和3′端,获得完整的ERG11编码序列(coding sequence,CDS);将CDS克隆到pYES2表达载体中,在尿嘧啶营养缺陷型酿酒酵母中过表达ERG11;用微量液基稀释法检测转化后的酿酒酵母对氟康唑的敏感性,初步验证其功能。结果显示,简并PCR扩增获得预期708bp片段,5′RACE和3′RACE分别获得385bp和1 336bp片段,经纯化、克隆、测序、比对分析,获得两株菌的ERG11CDS;比对其编码的蛋白,与其他念珠菌的Erg11蛋白高度同源;分别检测克隆了这两株希木龙念珠菌ERG11CDS表达载体的酿酒酵母对氟康唑的敏感性,发现过表达ERG11明显降低其对氟康唑的敏感性。结果提示,简并PCR联合RACE能准确有效地克隆出希木龙念珠菌ERG11基因,用pYES2酿酒酵母表达系统能初步验证其功能。

简并PCR结合RACE法克隆希木龙念珠菌CDR1基因

目的克隆希木龙念珠菌中药外排泵基因(CDR1),为探讨希木龙念珠菌的耐药机制奠定基础。方法首先从NCBI基因数据库中找到已知的白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌Cdr1蛋白的氨基酸保守序列,并设计简并引物,PCR扩增获得希木龙念珠菌CDR1c DNA部分片段,接着使用RACE方法分别扩增其5'和3'端序列得到完整的CDR1编码序列(CDS)。结果简并PCR扩增得到预期2 210bp大小的片段;5'RACE和3'RACE分别得到CDR1c DNA 5'和3'端片段,经纯化、克隆、测序、比对和拼接分别得到两株菌完整的CDR1c DNA序列;其编码的蛋白序列经比对发现与其它念珠菌的Cdr1蛋白高度同源。结论利用简并PCR联合RACE方法能够有效、准确地克隆出希木龙念珠菌CDR1基因。

白念珠菌对特比萘芬、咪康唑和制霉菌素的敏感性测定

目的测定白念珠菌的菌丝相和酵母相对特比萘芬、咪康唑和制霉菌素的敏感性。方法参照美国临床实验室标准化研究所制定的M27-A3方案,测定特比萘芬、咪康唑和制霉菌素对从临床获得的14株白念珠菌的菌丝相和酵母相MIC值。结果 (1)特比萘芬对白念珠菌的菌丝相及酵母相MIC结果差异无统计学意义,且其对白念珠菌敏感株和耐药株间MIC结果差异亦无统计学意义;(2)咪康唑对白念珠菌的菌丝相及酵母相MIC结果差异有统计学意义,后者明显较低;该药对白念珠菌敏感株和耐药株间MIC结果的差异亦有统计学意义,后者明显较高;(3)制霉菌素对白念珠菌敏感株和耐药株间MIC结果差异无统计学意义,但制霉菌素对白念珠菌菌丝相及酵母相MIC结果差异有统计学意义,后者明显较高。结论特比萘芬对白念珠菌菌丝相无抑制效果,且与氟康唑间无交叉耐药。咪康唑与氟康唑对白念珠菌存在交叉耐药,且咪康唑对白念珠菌酵母相抑制效果优于菌丝相。制霉菌素对白念珠菌菌丝相有抑制效果,且与氟康唑间无交叉耐药。