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帕金森病猴三重基因共转导的初步实验研究 被引量:1
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作者 沈扬 樊东升 +1 位作者 康德瑄 王立军 《中国临床康复》 CSCD 2004年第19期3740-3742,i001,共4页
目的:初步探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病猴基因治疗的效果。方法:使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(menthyl-phenyl-tetrahydropyridine,MPTP)诱发帕金森病猴模型,以复合感染的方式将分别构建编码酪氨酸羟化酶(tyrosin... 目的:初步探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病猴基因治疗的效果。方法:使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(menthyl-phenyl-tetrahydropyridine,MPTP)诱发帕金森病猴模型,以复合感染的方式将分别构建编码酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)、芳香族氨基酸脱羧酶(aromaticL-aminoaciddecarboxylase,AADC)和三磷酸鸟苷环水解酶I(GTPcyclohydrolase,GCH)基因的腺伴随病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体,通过立体定向法注入帕金森病猴一侧壳核内。观测基因转导后猴行为改善的情况达1个月,并采用免疫组化方法确定TH,AADC和GCH基因在猴纹状体内的表达。结果:组织学依据显示AAV载体所介导的TH,AADC和GCH基因均可在猴纹状体内有效表达;三重基因转导可引起帕金森病猴显著的行为改善。结论:不同种类的AAV载体介导的3种治疗基因共转导对帕金森病基因治疗的临床应用将可能是一种切实可行的有效途径。 展开更多
关键词 帕金森病 三重基因共转导 实验 基因疗法
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帕金森病大鼠三重目的基因共表达的长期行为改善 被引量:3
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作者 沈扬 樊东升 +4 位作者 王立军 康德瑄 中野今治 小泽敬也 永津俊治 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期16-18,共3页
目的 探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病基因治疗的效果。方法 分别构建编码酪氨酸羟化酶 (TH)、芳香族氨基酸脱羧酶 (AADC)和三磷酸鸟苷环水解酶I(GCH)基因的腺伴随病毒 (AAV)载体 ,用复合感染的方式将AAV TH、AAV AADC及A... 目的 探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病基因治疗的效果。方法 分别构建编码酪氨酸羟化酶 (TH)、芳香族氨基酸脱羧酶 (AADC)和三磷酸鸟苷环水解酶I(GCH)基因的腺伴随病毒 (AAV)载体 ,用复合感染的方式将AAV TH、AAV AADC及AAV GCH通过立体定向法注射入帕金森病大鼠损毁侧纹状体。采用免疫组化方法确定TH、AADC和GCH的表达 ;并连续观测基因转导后大鼠行为改善的情况长达 1年。结果 组织学依据显示TH、AADC和GCH基因均可在纹状体内长期有效而稳定的进行表达 ;三重基因转导可引起大鼠较TH和AADC共转导更为显著的行为改善(P <0 0 1)。结论 AAV载体介导的TH、AADC和GCH三重基因纹状体内共表达对于帕金森病大鼠的基因治疗更为有效。 展开更多
关键词 依赖病毒 GTP环化水解 帕金森病 基因疗法
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腺伴随病毒载体介导帕金森病猴基因治疗的实验研究
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作者 沈扬 樊东升 +1 位作者 康德瑄 王立军 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期373-373,共1页
我们在以往的研究基础上,进一步探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病灵长类模型基因治疗实验结果. 材料和方法:(1)腺伴随病毒(AAV)载体的制备:酪氨酸羟化酶(TH)质粒[芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)或三磷酸鸟苷环水解酶I(GCH)质粒]是... 我们在以往的研究基础上,进一步探讨多巴胺合成酶基因的三重共转导对帕金森病灵长类模型基因治疗实验结果. 材料和方法:(1)腺伴随病毒(AAV)载体的制备:酪氨酸羟化酶(TH)质粒[芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)或三磷酸鸟苷环水解酶I(GCH)质粒]是AAV基因组反向末端重复序列之间依次含巨细胞病毒早期响应启动因子、人类生长激素第一内含子、人源性TH(AADC或GCH)基因、SV40多聚腺苷信号的载体质粒.以磷酸钙沉积法共转染载体质粒、辅助质粒和腺病毒基因质粒于293细胞.3 d后回收并以冻融法裂解细胞,经离心所获得上清再经过2次氯化铯(CsCl)梯度密度超离心等精制处理,最终得到AAV-TH、AAV-AADC及AAV-GCH载体. 展开更多
关键词 帕金森病 基因治疗 病毒载体 介导 实验研究 转导 多巴胺 灵长类 合成酶 酶基因
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