基于超氧阴离子探针观察原位软骨细胞线粒体及线粒体炫

关节软骨是无血供组织。软骨细胞处于低氧环境中,细胞能量来源的大部分来自糖酵解,仅有一小部分来自线粒体氧化磷酸化。因此,软骨细胞中线粒体的功能一直未被重视,且局限于体外细胞研究。本文采用激光共聚焦显微成像技术建立了原位软骨细胞及其线粒体形态的观察方法,发现软骨细胞形态及线粒体密度与细胞所在层次相关。有文献表明,软骨细胞内线粒体源性活性氧(reactive oxygen species,ROS)可与促炎因子共同作用加速软骨组织退变。线粒体呼吸链电子漏产生的超氧阴离子是细胞内ROS的最主要来源。而超氧阴离子半衰期非常短,并且很容易自发地转化为过氧化氢,使它成为最难检测的ROS信号。新型超氧阴离子探针mt-cpYFP(mitochondrially targeted circularly permuted yellow fluorescent protein)是一种可特异性感受超氧阴离子的黄色荧光蛋白。本文基于mt-cpYFP转基因小鼠实时监测软骨细胞内超氧阴离子变化情况,发现原位软骨细胞在静息状态下存在量子化超氧爆发现象(线粒体炫);同时,促炎因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)刺激软骨细胞后,线粒体炫活性增加。因此,我们建立了原位软骨细胞线粒体形态与超氧阴离子动态变化的检测方法,并进一步探讨了促炎因子对关节软骨细胞线粒体ROS产生的影响。

前交叉韧带重建失败的影响因素分析

目的探讨性别、年龄、术后运动水平及移植物直径对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建术疗效的影响。方法研究纳入2012年2月-2017年6月,于关节镜下行自体腘绳肌腱单束重建ACL2年以上、二次关节镜手术取出内固定物的179例患者。男111例,女68例;年龄11~63岁,平均30.0岁。患者均为运动损伤;受伤至手术时间3 d^26年,中位时间120 d。Lachman试验及轴移试验均为阳性。对性别、年龄、术后运动水平(取内固定物时Tegner评分)、移植物直径以及股数进行单因素分析,初步筛选ACL重建失败的影响因素;进一步采用logistic回归进行多因素分析,筛选危险因素。结果患者术后均获随访,随访时间24~90个月,平均29.1个月。末次随访时,Lachman试验阳性25例,轴移试验阳性28例。KT-2000检查双侧膝关节胫骨前向位移差值–1~7 mm,平均1.89 mm。根据ACL重建失败评价标准,共11例(6.15%)患者重建失败。单因素及多因素分析均显示年龄、性别、术后运动水平、移植物直径及股数不是ACL重建失败的影响因素(P>0.05)。结论 ACL重建术后不同年龄、性别、运动水平患者间重建失败风险无明显差异,而且通过增加股数方法增加移植物直径,对于降低重建失败率无显著意义。