前列腺环素合酶基因转移治疗兔颈总动脉球囊扩张后再狭窄实验研究

目的 本研究旨在探讨前列腺环素合酶 (PCS)克隆脱氧核糖核酸 (cDNA)转染对颈动脉经皮球囊扩张术 (PTA)后再狭窄的防治效果。方法 首先提取大鼠主动脉平滑肌细胞 (VSMC)总RNA ,再根据已知PCS序列通过逆转录合成PCScDNA ;然后制备脂质体复合物。在成功建立家兔颈动脉PTA模型的基础上 ,进行体内转染实验。将实验动物分为 4组 ,各 1 0只 :①空白对照组 ;②载体对照组 ,注入pCMV -LacZ 40 μg ;③pCMV -PCS - 5组 ,注入 pCMV -PCS 5μg ;④pCMV -PCS - 4 0组 ,注入 pCMV -PCS 40 μg。 2周后对新生血管内膜与血管中层比值进行形态学分析。结果 空白对照组、载体对照组、pCMV -PCS - 5组及 pCMV -PCS - 4 0组内膜与中层厚度比值 (I/M )分别为 :(1 .2 0± 0 .1 4 )、(1 .2 4± 0 .1 5)、(0 .6± 0 .1 2 )、(0 .1 4 0± 0 .0 5) ,转基因组与空白对照组、载体对照组比较 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1 ) ,中层厚度分别为 :(0 .1 2± 0 .0 7)mm、(0 .1 4± 0 .0 8)mm、(0 .1 3± 0 .0 9)mm、(0 .1 2± 0 .0 3)mm ,各组间差异无显著性。结论 本研究显示PCS基因转移能有效地抑制颈动脉球囊扩张血管成形术后再狭窄。其作用主要是抑制新生内膜 ,而对中层几乎没有影响。这种抑制作用与转基因量相关。

前列腺环素合酶基因转移抑制血管平滑肌细胞增生的体外试验

目的 本研究旨在探索前列腺环素合酶 ( PCS) c DNA转染对血管平滑肌细胞 ( VSMCs)增生的抑制作用。方法 首先自大鼠主动脉 VSMCs提取总 RNA,再根据已知 PCS序列通过逆转录合成 PCS c DNA;然后用脂质体作载体将大鼠 PCS c DNA转染至体外培养的大鼠 VSMCs,并对 PCS蛋白水平、c AMP水平及反映 VSMCsDNA合成的 Brd U结合率进行测定。结果 p CMV- PCS转染的 VSMCs表达 PCS蛋白是 p CMV- L ac Z转染细胞的2 .1倍 ( P<0 .0 1)。c AMP水平于对照组、p CMV- L ac Z及 p CMV- PCS分别为 6 .8± 0 .7、7.5± 0 .4、17.3± 0 .5 pm ol/mg蛋白。在血清刺激下 ,转基因组 Brd U指数明显低于载体对照组及空白对照组 ( P<0 .0 1) ,无血清刺激情况下 ,PCS c DNA转染对 VSMCs DNA合成没有影响。结论 在血清刺激下 ,大鼠 PCS c DNA转染可获得 PCS过度表达 ,提高 c AMP水平而对 VSMCs增生有抑制作用。为 PCS c DNA转染治疗颈动脉球囊扩张 ( PTA)后再狭窄提供了依据。