胰腺和胃肠道来源神经内分泌肿瘤分类——2018 IARC/WHO分类框架共识解读

目前神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasm,NENs)的病理学分类,在不同的器官系统中根据特定的部位使用不同的术语及标准,极易在病理医师诊断及临床医师治疗之间产生歧义。2017年11月在国际癌症研究机构举行的共识会议形成新的分类建议,新分类的主要特点是区分分化好的神经内分泌瘤和分化差的神经内分泌癌,这种形态学分类方法基于特定解剖位点的遗传学证据以及临床、流行病学、组织学和预后差异等。在不同解剖学部位使用统一的NENs分类框架,能够有效减少目前临床上存在的不一致性和歧义。新版分类中,分别对不同部位或器官来源的神经内分泌肿瘤做了分类描述,本文仅对胰腺和胃肠道来源的分类进行解读。

肺神经内分泌肿瘤病理诊断和分子病理进展

2021版WHO肺肿瘤分类中肺神经内分泌肿瘤的病理分型和诊断标准较之前无显著变化。但近年来的分子病理研究表明,肺小细胞癌和大细胞神经内分泌癌均是具有神经内分泌特征的高度异质性肿瘤,可以通过基因组或转录组的关键特征进行分子分型,对肿瘤亚型诊断以及指导患者治疗有重要参考价值。此外,“肺神经内分泌瘤G3”和“组织学转化”等新兴概念如何从病理角度进行解读以及INSM1和POU2F3等新型神经内分泌标志物应用等也需要了解和认知。本文结合2021版WHO分类和新近相关分子病理进展,对肺神经内分泌肿瘤诊断变化和分子分型进行评述。

间接体内Mini人源肿瘤异种移植模型再现转移性肠癌患者的药物治疗疗效

目的通过运用肠癌标本建立一种新型的Mini人源肿瘤异种移植(Mini patient-derived xenograft,MiniPDX)模型,并探索其指导临床治疗的可行性。方法基于上海立迪生物技术股份有限公司独创的小鼠OncoVee?MiniPDX模型建立人源化肠癌MiniPDX模型,评估MiniPDX模型与其配对肠癌患者药物治疗效果的一致性。结果运用11例转移性肠癌患者肿瘤组织标本成功建立12例MiniPDX模型,其中9例MiniPDX模型来源于9例患者的肝转移灶,1例MiniPDX模型来源于1例患者的原发灶,2例MiniPDX模型来源于同一患者的肠癌原发灶和肝转移灶。体内药效学实验显示,12例小鼠MiniPDX模型中有9例模型(75%)对药物的治疗反应与患者疗效保持一致,两者具有较好的相关性(相关系数为0.57)。结论MiniPDX模型能在2周内完成药效学检测,可作为一种快速有效的间接体内模型指导临床患者个体化治疗。

NTRK基因融合的检测及TRK抑制剂研究进展

原肌球蛋白受体激酶(tropomyosin receptor kinase,TRK)蛋白家族由神经营养性酪氨酸受体激酶(neurotrophic tyrosine receptor kinase,NTRK)基因编码,在胚胎发育和神经系统正常功能的维持中发挥作用。已在多种成人和儿童实体瘤中确定NTRK基因融合为致癌驱动因子。NTRK基因重排和融合转录可通过不同的分子病理学技术检出,这些筛查技术为确定最可能从靶向TRK融合治疗中获益的患者提供支持。本文概述了NTRK基因融合的发生机制和特征,NTRK基因融合检测方法和检测路径,以及TRK抑制剂的治疗获益和研究进展,总结了TRK融合癌的多国共识和指南,旨在帮助临床医生了解如何和何时进行NTRK基因融合检测,以及针对TRK融合癌的靶向治疗现状,从而更好地指导患者治疗。

进展期胃癌中EB病毒感染率及EB病毒参与免疫调节的机制探索

目的分析进展期胃癌中EBV阳性率及EBV参与机体免疫调节的可能机制。方法 99例进展期胃癌患者入选该研究,收集患者化疗前肿瘤组织标本99例和化疗后肿瘤组织标本108例,以及相应61例人源化胃癌移植瘤(patient-derived xenograft,PDX)组织,用显色原位杂交方法检测所有组织中EBV-RNA(EBER)状态;荧光定量PCR法检测患者血浆及淋巴细胞中EBV-DNA拷贝数;在胃癌细胞AGS中导入EBV相关BZLF1蛋白构建EBV阳性细胞,RNA测序方法分析EBV阴性及阳性胃癌细胞中差异表达的分子或通路,尤其是跟免疫相关的通路。结果 99例进展期胃癌患者化疗前标本中EBV阳性率为1.01%(1/99),且EBV状态不受化疗影响,PDX组织中EBV阳性率高达21.31%(13/61)。在8例原发肿瘤组织EBV阴性而相应PDX组织EBV阳性的患者中,5例(62.50%)患者的外周血存在EBV潜伏感染。胃癌细胞AGS中导入BZLF1蛋白后,与其配对的亲本细胞相比,筛选出差异表达分子537个,其中上调表达分子265个,下调表达分子272个,通路富集分析表明,上调通路有Jak-STAT通路、PPAR通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用通路等,这几条通路均与免疫调节相关。结论我国进展期胃癌中EBVaGC比例较低,PDX组织中EBV阳性率较高可能是由于小鼠免疫缺陷促进潜伏感染的EBV激活复制,EBV感染可能通过激活机体固有免疫而从免疫治疗中获益,确切机制有待深入探索。

乳腺乳头状病变的穿刺与切除病理诊断比较

目的将空心针穿刺(core needle biopsy,CNB)病理诊断为乳头状病变的病例与其穿刺后手术切除组织的病理诊断进行比较,评估二者的一致性及穿刺诊断不典型导管内乳头状瘤及癌的准确性。方法对342例穿刺诊断为乳头状肿瘤(导管内乳头状瘤、非典型导管内乳头状瘤、乳头状癌)后接受肿物切除的病例,分析比较前后2次病理诊断结果。结果 CNB诊断乳头状癌与手术切除诊断一致率100%,CNB诊断导管内乳头状瘤者,手术切除病变升级比例48.8%(65/133),其中非典型导管内乳头状瘤36.8%(49/133),导管原位癌或浸润性癌共计12.0%(16/133);CNB诊断非典型导管内乳头状瘤,手术切除后诊断升级为癌比例为31.8%(34/107)。部分病例(11.7%)切除组织病理诊断病变级别下降。结论 CNB诊断乳头状癌与手术切除诊断一致性较好,而在导管内乳头状瘤和不典型导管内乳头状瘤病例中均存在一定的病变低估比例。对CNB诊断为导管内乳头状肿瘤的病例应完整切除病变,避免恶性病变漏诊。

胰腺导管内嗜酸性乳头状肿瘤的临床和病理特征

胰腺导管内嗜酸性乳头状肿瘤(IOPN)是胰腺导管内乳头状黏液性肿瘤(IPMN)的亚型之一,具有与IPMN相似的临床表现和影像学特征.IOPN常见于胰头部,大体表现为囊腔内充满红色或褐红色的质软乳头,产生的黏液一般较其他类型IPMN少.组织学表现为复杂的囊内乳头状结构,肿瘤细胞具有丰富的嗜酸性颗粒状胞质而不表现明显的黏液分化.免疫组织化学特征性的表达抗线粒体抗体,此外,MUC5AC阳性,MUC1局灶阳性.分子遗传学研究结果显示,IOPN具有与其他类型IPMN不同的特征,KRAS和GNAS突变频率显著低于其他类型IPMN.目前,IOPN被认为是一种胰腺癌的癌前病变,具有进展为胰腺浸润癌的风险,但总体预后良好.总之,IOPN应该被认为是一种不同于其他类型IPMN的胰腺导管内肿瘤类型.

基于基因表达谱数据分析弥漫大B细胞淋巴瘤肿瘤相关巨噬细胞浸润情况及其与患者预后的相关性

目的基于弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)基因芯片表达数据库,分析肿瘤相关巨噬细胞及亚型浸润情况,探讨其与患者预后的相关性。方法数据来源于PubMed基因表达数据库(GEO)中的DLBCL患者微阵列(Affymetrix U133 plus 2.0)数据库(编号GSE10846)。该数据库共包含414例患者,其中306例有完整的临床、细胞起源分型(COO分型)及治疗随访信息。通过基于评估RNA转录本相对占比进行细胞类型识别(CIBERSORT)的在线计算机程序进行数据分析;从生成的分析结果文件中识别出GSE10846数据库中所有患者包含各亚型巨噬细胞在内的免疫细胞在微环境中所有可识别免疫细胞中的比例。以巨噬细胞亚群占微环境所有免疫细胞比例中位值为临界值:≥临界值为高浸润。基于GSE10846数据库中所有414例DLBCL患者的myc、bcl-2、程序性死亡受体配体1(PD-L1)及程序性死亡受体配体2(PD-L2)基因表达量的中位值为临界值,≥临界值者为高表达。分析各型及总体巨噬细胞水平与临床因素、一些基因表达及生存的相关性,采用Cox比例风险模型对DLBCL患者预后进行多因素分析。采用R 4.0.4中surv_miner包中的surv_cutpoint函数确定各项巨噬细胞亚群占微环境所有免疫细胞比例的最佳临界值,<最佳临界值为统计学低浸润,≥最佳临界值为统计学高浸润。结果经CIBERSORT分析,414例DLBCL患者中识别出肿瘤微环境中M0型巨噬细胞[15.00%(0~44.41%)]、M1型巨噬细胞[7.46%(0~23.00%)]、M2型巨噬细胞[6.28%(0~43.35%)]。具有完整的临床和随访资料的306例患者中,M0、M1、M2型和总巨噬细胞高浸润患者分别有155例(50.7%)、152例(49.7%)、156例(51.0%)、152例(49.7%),M0型巨噬细胞高浸润与COO分型为生发中心B细胞(GCB)型、PD-L1基因高表达及无myc、bcl-2 RNA水平双高表达(R-DEL)有关(均P<0.05),M1型巨噬细胞高浸润与女性、PD-L1基因高表达、PD-L2基因高表达有关(均P<0.05),M2型巨噬细胞高浸润与COO分型为GCB型、PD-L2基因高表达有关(均P<0.05),总巨噬细胞高浸润与女性、COO分型为GCB型、PD-L1基因高表达、PD-L2基因高表达、无R-DEL有关(均P<0.05)。PD-L1基因高表达与M0、M1型及总巨噬细胞高浸润相关(均P<0.01),PD-L2基因高表达与M1、M2型巨噬细胞及总巨噬细胞高浸润相关(均P<0.01)。M0型巨噬细胞高浸润组总生存(OS)较低浸润组好(P=0.002);M2型巨噬细胞低浸润组OS较高浸润组好(P=0.019)。R-DEL组OS较无R-DEL组差(P=0.001)。国际预后指数(IPI)评分低(0~2分)、COO分型为GCB型、治疗中采用利妥昔单抗的患者OS更好(均P<0.01)。多因素Cox回归分析结果显示,年龄≥60岁、COO分型为非GCB分型、治疗方案中不含利妥昔单抗、M0型巨噬细胞低浸润、M2型巨噬细胞高浸润为DLBCL患者OS的独立不良影响因素(均P<0.05)。M0型巨噬细胞最佳临界值为4.3%,M2型巨噬细胞最佳临界值为4.8%;M0型巨噬细胞统计学低浸润组OS更差(P<0.001),M2型巨噬细胞统计学高浸润组OS更差(P=0.001)。结论DLBCL肿瘤微环境的免疫细胞中肿瘤相关巨噬细胞含量最高。M2型巨噬细胞高浸润患者预后较差,而M0型巨噬细胞高浸润患者预后较好。

免疫组化检测63例原发甲状腺癌中BRAF^V600E突变及其价值研究

甲状腺乳头状癌是最为常见的甲状腺恶性肿瘤。BRAF^V600E突变是甲状腺乳头状癌中最为常见的基因突变之一。据报道,45%的甲状腺乳头状癌病例会出现BRAF^V600E基因突变。BRAF^V600E的突变对于甲状腺乳头状癌的确诊以及预测不良预后非常重要。目前可用于BRAF^V600E突变的检测方法有Sanger测序法、焦磷酸测序高分辨率熔解曲线分析及等位基因特异扩增(PCR)等方法。

运用组学手段探索EBV相关性与非相关性胃癌的可能差异分子

目的运用组学手段探索EBV相关性胃癌(EBVa GC)与EBV非相关性胃癌(EBVn GC)间的分子差异,为EBVa GC治疗选择提供依据。方法显色原位杂交检测胃癌患者手术标本和移植瘤组织EBV RNA状态。靶向捕获测序和蛋白质谱分析EBV阳性和阴性胃癌组织中差异分子,免疫组织化学验证组织中PD-L1的表达。结果与EBVn GC相比,EBVa GC中存在PIK3CA高突变率和TP53低突变率。EBVa GC中转录后调控分子表达上调,而代谢和氧化磷酸化分子下调。PD-L1在EBV阳性移植瘤中表达显著升高(76.92%vs 25.00%;P<0.05)。结论 EBV相关性与非相关性胃癌在基因变异和蛋白表达上存在很大差别。

肺癌小活检标本病理诊断规范专家共识

肺癌患者小活检标本病理诊断至关重要,尤其是对于晚期肺癌患者,其精准治疗取决于准确的肺癌病理类型及相应的分子病理检测。本共识结合第5版WHO肺癌组织学分类、相关临床肺癌诊治指南或共识要求及有关临床病理研究进展,对肺癌小活检标本诊断术语、病理亚型诊断注意事项、标志物使用及其特点、诊断局限性等方面进行说明或推荐,旨在加强肺癌小活检标本组织病理诊断的同质性及规范性,进一步提高肺癌亚型诊断准确性。

多基因检测在细胞学不确定的甲状腺结节良恶性诊断中的价值

目的研究多基因检测方法对穿刺细胞学不确定的甲状腺结节的诊断价值.方法选取2018年2-9月期间在北京大学肿瘤医院进行细针穿刺活检的甲状腺结节连续病例360例,其中男86例,女274例,年龄13~89岁,平均45.8岁.共检测391个结节,对其中细胞学不确定的141个结节的标本进行高通量多基因检测,包括16个基因突变和26种基因融合.根据甲状腺结节手术适应证对其中75个结节进行手术治疗,将基因检测结果与术后病理进行对照,计算多基因检测方法的诊断效能,通过配对χ^2检验方法比较多基因检测和BRAF V600E单基因检测的诊断正确率.结果多基因检测方法诊断不确定结节的灵敏度为73.2%;特异度为96.8%;阳性预测值为96.8%;阴性预测值为73.2%.多基因检测方法诊断正确率为83.3%,BRAF V600E单基因检测的诊断正确率为73.6%,差异有统计学意义(χ^2=31.588,P<0.01).结论对细胞学不确定的甲状腺结节穿刺标本进行多基因检测是有效的鉴别良恶性的方法,比BRAF V600E单基因检测具有更高的诊断正确率.

400例原始病理诊断与会诊病理诊断结果的比对与分析

如何做好最终病理诊断的质量控制始终是病理质量管理中的难点。因为病理诊断不同于病理实验技术的流程和能力管理，它受到多方面因素影响，如疾病病理诊断难易程度、诊断医师经验、医院规模和专科特点等，因此科学、客观地评判病理诊断质量的优劣，也需要根据中国合格评定国家认可委员会（CNAS）《医学实验室质量和能力认可准则》的要求参加适于相关检验和检验结果解释的实验室间比对计划。实验室应监控实验室间比对计划的结果，当不符合预定的评价标准时，应实施纠正措施。

加强乳腺病理诊断的规范化

2008年《中华病理学杂志》发表了“应关注乳腺癌病理诊断中的新问题”一文，探讨了建立乳腺专科病理诊断机制的必要性。近年来，乳腺癌治疗理念的不断更新、诊疗技术的快速发展，对乳腺癌病理诊断提出了更高的要求。病理学科的亚专科化正在逐步推行，行业规范也在不断加强。我们根据乳腺病理学科特点并结合近年的临床实践提出以下几点建议和观点，提醒病理工作者关注乳腺癌病理诊断中的规范化和标准化。一、发挥学组优势。

淋巴瘤病理诊断的标准化

随着2008WHO造血与淋巴组织肿瘤分类在国内逐步广泛的学习交流和应用，我国的淋巴瘤病理诊断和分型有了长足的进步。相关的临床病理研究和基础研究蓬勃开展，已有多篇大宗报道，有的研究按照新分类回顾总结了一个地区或一个医院的NK／T细胞淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤的诊断和分型归类；中国抗癌协会淋巴瘤研究协作组近年开展了全国性调查项目，对国内有代表性的24家三甲医院万余例淋巴瘤进行了统计和分析；这些大样本研究提供了具有中国特点的淋巴瘤数据。此外，多位专家针对我国淋巴瘤研究的发展前景、存在的问题、组织形态学诊断标准等发表了各自的见解，为进一步促进我国淋巴瘤病理诊断的标准化并建立相应的指南奠定了良好的基础。一。

乳腺癌新辅助治疗Miller/Payne分级相关临床病理特征分析及预测模型建立

目的:探讨浸润性乳腺癌新辅助治疗后Miller/Payne(MP)分级相关临床病理特征,并建立MP分级预测模型。方法:收集北京大学肿瘤医院2016年9月至2019年9月1053例确诊为非特殊型浸润性乳腺癌并遵循中国临床肿瘤学会(CSCO)《乳腺癌诊疗指南》行新辅助治疗的患者临床病理资料,包括年龄、性别、组织学分级、免疫组织化学染色结果和术前淋巴结转移情况等,应用R软件进行数据统计分析,并建立MP分级预测模型。结果:1053例经新辅助治疗患者中,316例(316/1053,30%)术后评判为MP5级,737例(737/1053,70%)为非MP5级。新辅助治疗后MP5级与非MP5级相比较,在组织学分级、雌激素受体(ER)/孕激素受体(PR)表达情况、HER2检测结果、Ki-67阳性指数以及分子分型上的差异有统计学意义(P<0.05);单因素和多因素Logistic回归分析进一步显示,上述临床病理特征也是MP5级的独立影响因素;采取5重交叉验证的方法评估模型的性能,得到不同模型的灵敏度和特异度。结论:非特殊型浸润性乳腺癌新辅助治疗后,高组织学分级、ER阴性、PR阴性、HER2阳性、高Ki-67阳性指数以及分子分型与MP5级相关,且是其独立影响因素;通过比较推荐使用梯度提升树模型,可对临床诊疗提供一定帮助。

组织脱水过程中的脱脂方法

在病理常规处理中富含脂肪的组织经常会出现脱水、透明不佳,导致制片不全、质量较差、切片困难等现象。乙醇和二甲苯被认为在组织处理环节起到脱水及透明的作用,但在传统流程中的实际效果往往不佳。我们通过把传统脱水、透明流程中使用的无水乙醇、二甲苯液改为无水乙醇、二甲苯液等量混合液进行脱水、脱脂、透明,取得了令人满意的效果。

甲状腺乳头状癌的组织学特点、分子标志物表达与临床预后的关系

甲状腺乳头状癌发病率逐年升高，全球每年新增10余万病例，越来越多地累及中青年人。甲状腺乳头状癌的病理诊断相对简单，而如何有效归纳组织学特点，为甲状腺乳头状癌的临床治疗和预后提供更详尽的信息是当务之急。我们拟从甲状腺乳头状癌的组织学特点、分子标志物表达、临床预后三者的相互联系入手，综合最新研究进展，为临床治疗方法的选择和预后判断提供可靠依据。

广泛累及小肠和结肠的成人自身免疫性肠病一例并文献复习

目的 探讨成人自身免疫性肠病的临床病理学特点、诊断、鉴别诊断.方法 收集北京大学第三医院诊治的成人自身免疫性肠病1例,收集患者详细的临床资料、实验室检查、病理检查资料,及患者的治疗、随访情况,结合文献进行分析.结果 患者为41岁男性,顽固性腹泻3个月余,饮食调整及抗炎治疗无效.大便镜检可见脂肪球,大便苏丹Ⅲ染色阳性.小肠造影示小肠蠕动减弱,小肠皱襞减少.结肠镜未见异常.肠镜活检示小肠绒毛消失,隐窝上皮内凋亡小体和淋巴细胞数量增多,表面上皮内淋巴细胞数量相对较少,固有膜可见多量淋巴单核细胞、浆细胞及中性粒细胞浸润.结肠可见隐窝炎及隐窝脓肿,余改变与小肠相同.免疫荧光示抗杯状细胞抗体IgG阳性.结合病史、多种辅助检查及病理组织学除外了其他引起腹泻的疾病,最终诊断为自身免疫性肠病.患者经激素治疗后痊愈,且随访8个月、停用激素后5个月未复发.结论 成人自身免疫性肠病非常罕见,正确诊断对治疗有重要指导意义.组织学形态需注意与溃疡性结肠炎、乳糜泻、淋巴细胞性肠炎等鉴别.诊断需结合病史、临床症状、内镜下表现、血清学检查及组织学综合分析.

滤泡树突细胞及Ki-67分布方式在小B细胞淋巴瘤鉴别诊断中的意义

目的观察在不同类型小B细胞淋巴瘤（SBL）中滤泡树突细胞（FDC）网架的破坏情况和FDC分布特征，结合Ki-67阳性指数高低和分布方式存在的差异，探讨其在SBL鉴别诊断中的价值。方法回顾性研究北京大学肿瘤医院2008年11月至2012年6月间诊断的68例SBL，观察CD21及CD23免疫组织化学染色显示的FDC网架破坏情况、分布形式及Ki-67阳性指数及分布形式。使用统计学软件分析其与不同SBL类型的关系。结果68例患者年龄28-85岁，平均55．2岁；男女比1．2：1，发病部位为淋巴结内55例（80．9％），结外13例（19．1％）。复习并依据2008WHO造血与淋巴组织肿瘤分类标准确诊病理诊断：低级别滤泡性淋巴瘤（FL，1级和2级）22例，边缘区淋巴瘤（MZL）19例，套细胞淋巴瘤（MCL）17例，以及慢性淋巴细胞白血病／小淋巴细胞淋巴瘤（CLIMSLL）10例。在FL中CD21及CD23标记的FDC网架是以中心破坏为主，发生比例占90．9％（20／22）。而在MZL中则以FDC网架周边结构破坏为主，为14／19；在cLL／SLL则表现为散在个别FDC或者无FDC网架；对于MCL，有7／17的病例表现为散在个别FDC或者无FDC网架，另有7／17的MCL出现了FDC的不规则网状增生。FDC网架按照破坏及分布情况在不同的淋巴瘤分型中差异具有统计学意义（P〈0．01）。Ki-67显示的肿瘤细胞增殖活性在4种不同SBL间差异也具有统计学意义（P〈0．05），增殖活性从高到低依次为：MCL、FL、SLL、MZL。Ki-67在FL病例可以看到滤泡中心散在表达且极向消失，MZL病例中可见残余生发中心外的肿瘤较为一致散在表达，而且两者均普遍低于残留非肿瘤性生发中心的阳性指数；在MCL中可见较为一致的分布，但个体间阳性指数差异较大（5％-90％）；在CLL／SLL病例中肿瘤的“增殖中心”Ki-67呈灶状增高。结论通过常规使用CD21和CD23免疫组织化学染色，显示FDC网架的破坏情况，并联合Ki-67显示细胞的增殖活性，观察两者分布形式，对于明确区分各种类型的SBL具有鉴别意义。