高效液相色谱法测定人血清游离羟脯氨酸的含量

目的：建立血清游离羟脯氨酸的高效液相色谱外标测定法。无需对衍生产物进行处理即可使羟脯氨酸与血清中18种氨基酸达到良好的分离。方法：使用邻苯二甲醛（OPA）和芴甲基氯甲酸酯（FMOC）双衍生剂法，对血清进行处理后采用ODS C18柱，以醋酸钠缓冲液和乙腈的为流动相进行梯度洗脱，紫外检测器于265nm进行测定。结果：日内、日间RSD分别为1．95％和2．02％，回收率为（100．5±4．0）％，标准曲线在0．26～64mg·L^-1范围线性关系良好（R^2=0．9998）。使用该方法对10名健康志愿者进行了血清中游离羟脯氨酸的测定，测得男性平均值为（1．4±0．5）mg·L^-1、女性平均值为（1．10±0．32）mg·L^-1。结论：该法无需除去血清中一级胺衍生产物，直接测定羟脯氨酸，处理简单且特异性好，方法简单经济，适合临床检测需要。