2010-2016年北京地区儿童肠道病毒感染疾病的病原特征分析

目的 分析北京地区2010至2016年引起儿童肠道病毒（EV）相关疾病的病原谱变化及其各型别的流行趋势.方法 采用重复横断面研究方法,对2010-2016年收集的首都儿科研究所附属儿童医院感染科门诊疑似EV相关疾病患儿的口咽拭子标本进行EV筛查.使用实时荧光反转录（RT）PCR反应检测EV、肠道病毒71型（EV-A71）和柯萨奇病毒A组16型（CV-A16）.经自行设计引物、改进引物及PCR扩增条件,通过RT-PCR方法对EV阳性而EV-A71和CV-A16阴性标本依次用CV-A6、EV-A和B组特异性引物以及5＇UTR通用引物进行扩增、测序以确定型别.通过计算构成比的方式分析不同EV型别的流行特点以及在不同年龄组的分布情况,使用x2检验对患儿性别的差异进行统计学分析.结果 收集的2 703份口咽拭子标本中EV阳性标本共1 992例,总阳性率为73.7％,其中EV-A71的阳性率为19.1％（516份）,CV-A16为24.3％（658份）,CV-A6为22.2％（600份）,CV-A10为4.5％（122份）,其他型别EV为3.5％（95份）,还有1份标本为EV-A71和CV-A16同时阳性,提示共感染.通过改进EV-A组VP1特异性引物和PCR扩增条件后,EV-A组（除EV-A71、CV-A16、CV-A6和CV-A10）阻性检出率由11.3％（7/62）增加至95.2％（59/62）.2010-2012年,EV阳性标本中CV-A16和EV-A71所占比例最高;然而2013年CV-A6代替CV-A16和EV-A71成为主导病原,所占比例达60.7％（68/112）,远远高于CV-A16（23.2％,26/112）和EV-A71（12.5％,14/112）;2014年,EV型别仍以CV-A16和EV-A71为主;2015和2016年均以CV-A6所占比例最高,分别为68.2％（232/340）和38.6％（151/391）.EV的流行季节多为4至8月份,但每年稍有不同,CV-A6在10和11月份会出现小的流行高峰.EV阳性标本中的男女性别比为1.50∶1,以5岁以下儿童多见.与EV-A71和CV-A16相比,CV-A6更易感染年龄偏小的儿童.结论 2010-2016年北京地区儿童中EV感染的病例中EV病原谱发生了明显变化,自2013年以来,非EV-A71和CV-A16的病原增多,CV-A6逐渐成为EV感染性疾病的主要病原体之一.对PCR引物和扩增条件的改进可以有效地提高检测结果的可靠程度.