北京天坛医院5512例女性HPV感染基因型分析

目的探讨北京地区女性生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因型分布情况,为预防HPV感染和宫颈疾病防治提供理论依据。方法使用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术,对5512例女性宫颈脱落细胞进行HPV亚型检测。结果892例患者感染HPV,总感染率为16.2%。居前5位的HPV基因亚型依次为HPV52、58、16、CP8304和HPV53。单一感染664例(24.1%),占所有感染的74.4%(664/892);双重亚型感染175例,占所有感染的19.6%(175/892);多重亚型感染53例,占所有感染的5.94%(53/892)。HPV感染以≤45岁的年轻女性为主(65.4%),≤25岁患者HPV感染率最高(23.2%)。结论 HPV52、HPV58、HPV16、CP8304和HPV53感染在北京地区最为常见,总体符合亚洲人群分布规律,同时又具有独特的地域分布特点。

科研型实验室在研究型医院研究工作主体人员科研能力培养中的作用探讨

研究型医院在医疗卫生事业的临床诊疗水平、科研、教学工作中起到引领作用。其科研的主体为临床医生和专业型研究生,科研能力的培养对于研究型医院主体工作人员具有重要意义。科研型实验室是医学院校及其教学医院培养研究生和临床医生科研创新能力和开展科学研究的平台基地之一。就科研型实验室在临床专业型研究生和临床医生继续教育中科研能力培养的补充作用进行讨论,探讨科研型实验室如何通过搭建有利于医学专业型研究生和临床医生的开展科研工作的平台、促进专业型研究生和临床医生科研能力的培养和提高以及加强研究生和临床医生科研中合作意识,进而对临床医生和专业型研究生科研能力培养起到积极作用。

临床生化实验室测试过程中分析生化反应曲线对于试剂质量评估作用的探讨

目的探讨生化反应曲线监测试剂质量的意义。方法以检测原理为终点法的超敏C反应蛋白和前白蛋白以及检测原理为速率法的碱性磷酸酶为例,分析质控品的反应曲线图和起始吸光度值的变化,判断试剂是否存在质量问题。结果超敏C反应蛋白检测时反应曲线变成直线提示试剂成分已破坏;前白蛋白检测反应曲线添加试剂1和试剂2后均出现终点法图形,提示试剂1和试剂2加反;碱性磷酸酶反应曲线起始点吸光度超出试剂空白范围提示试剂已失效。结论总结本实验室质控品的正常反应曲线图,并注意观察室内质控品的反应曲线图和起始点吸光度值,有助于快速判断是否存在试剂质量问题。

临床生物化学实验室用水管理探讨

目的探讨临床生物化学实验室用水按微生物监测分级使用的重要性。方法水质微生物培养在一级标准和二级标准两种条件下,以二氧化碳浓缩试剂为测定试剂比较不同微生物培养结果时对校准工作曲线的影响;比较使用浓缩试剂和非浓缩试剂对测定二氧化碳的影响。用注射用水和实验室水机所制纯水分别复溶甘油三酯干粉试剂后,观察试剂颜色变化和试剂空白吸光度,比较不同实验室试剂用水等级对干粉试剂的影响。结果微生物培养结果为一级标准的纯水,可以用于试剂溶剂和仪器清洗,微生物培养结果为二级标准的纯水,不能作为试剂溶剂,只能用于设备清洗。注射用水可用于复溶甘油三酯干粉试剂,本实验纯水机制备的纯水不适用于复溶甘油三酯干粉试剂。结论建议医学实验室每天监控纯水机电阻率,每月对纯水机水箱进行微生物培养,不同等级纯水用于不同实验室操作。医学实验室用水定期检测(微生物含量、pH值范围等)对于实验室风险评估、保证实验室质量非常必要。

2010–2014年北京地区22家医院抗抑郁药物应用研究

目的：了解北京地区抗抑郁药物使用情况,为临床合理用药提供参考。方法：采用回顾性分析方法,以WHO推荐的限定日剂量（DDD）作为药物利用研究评价单位,对2010–2014年北京地区22家医院抗抑郁药物的销售金额、DDDs以及DDC进行统计分析。结果：2010–2014年,北京地区22家医院共使用了19种抗抑郁药物;抗抑郁药物的用药金额和DDDs均呈增长趋势;用药金额和DDDs年均增幅分别为14.79%和16.47%;各品种各年度的DDC保持不变。SSRIs和s SNRIs分别占用药金额的60%~70%和20%。DDDs排序前3位是帕罗西汀、氟哌噻吨/美利曲辛复方制剂、西酞普兰或艾司西酞普兰。结论：抗抑郁药物在临床应用日趋增长,以SSRIs和s SNRIs为代表的新型抗抑郁药物已成为一线用药。

举办实验室技术原理及实践培训班的思考及分析

为满足科研人员常规实验技能的需要,举办了继续教育课程"常用实验室技术原理及实践培训班"。对近3年举办的4期培训班课程进行总结,通过对培训课程安排、参加培训学员的基本情况及学员反馈,分析了培训中遇到的问题,为今后举办类似的实验室基础操作技能培训班提供了参考和经验。

北京天坛医院神经外科人脑肿瘤生物样本库中组织样本RNA的质量评价

目的评价首都医科大学附属北京天坛医院神经外科脑肿瘤生物样本库建库5年来样本RNA的质量。方法收集首都医科大学附属北京天坛医院神经外科2011年1月至2015年12月的脑肿瘤样本，每年度随机选取20份，共100份，使用Trizol试剂提取组织总RNA，检测RNA的纯度、浓度、完整性及样本中GAPDH和ACTB内参基因表达水平。结果2011年度至2015年度样本RNA合格率分别为25％、75％、85％、90％、100％。2011年度样本提取的总RNA大部分纯度和完整性不佳，RNA有部分降解，不能有效扩增内参基因GAPDH和ACTB，Ct值明显高于2012年度至2015年度样本的平均Ct值（P〈0．01）；2012年度至2015年度样本提取的总RNA的A260／A280比值均能达到1．8—2．1，A260／A230比值均能达到2．0以上，大部分样本RNA完整性较好，无降解，80份样本均能进行GAPDH和ACTB基因的有效扩增。结论开展RNA水平的实验研究时，建议使用储存时间在4年以内的样本，且在组织样本使用前进行RNA的质量检测；并应每年定期监测样本质量，在样本出库前进行质量评价。

脑苷肌肽促进星形胶质细胞分泌GDNF保护AAPH诱导神经元损伤的实验研究

目的研究脑苷肌肽对缺血性卒中患者发挥神经保护作用的可能机制,探讨星形胶质细胞在脑保护中的作用。方法取10只孕16-18 d SD大鼠的胚胎、及10只24 h SD乳鼠的脑组织分别用于原代神经元及原代星形胶质细胞培养,经免疫组化染色证实培养的细胞分别为神经元和星形胶质细胞后,给予1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L和40 mmol/L 2,2-偶氮二（2-甲基丙基咪）二盐酸盐{2,2’-Azobis[（2-methylpropionamidine）dihydrochloride,AAPH]}模拟缺血性卒中诱导神经元和星形胶质细胞损伤,并通过利用分光光度计分析细胞活力,观察AAPH对细胞活力的影响;观察0.025μg/ml、0.05μg/ml和0.1μg/ml脑苷肌肽对星形胶质细胞的保护作用,同时制备脑苷肌肽-星形胶质细胞条件培养基,比较条件培养基对AAPH诱导的神经元损伤的保护作用。结果经分光光度计分析40 mmol/L AAPH为合适诱导损伤浓度,在AAPH损伤4 h后,分别给予不同浓度的脑苷肌肽共同孵育24 h。结果显示0.025μg/ml、0.05μg/ml和0.1μg/ml浓度的脑苷肌肽均能够减轻AAPH造成的星形胶质细胞损伤,但0.05μg/ml和0.1μg/ml的脑苷肌肽的保护作最为显著。0.1μg/ml脑苷肌肽-星形胶质细胞条件培养基能够通过促进胶质细胞分泌胶质源性神经生长因子,进而保护AAPH诱导的神经元损伤（P〈0.05）。而将0.1μg/ml的脑苷肌肽作用24 h后的细胞上清液作为条件培养基,在40 mmol/L AAPH诱导神经元损伤后加入脑苷肌肽-星形胶质细胞条件培养基作用24 h。检测神经元细胞活力,发现脑苷肌肽-星形胶质细胞条件培养基能够逆转AAPH造成的神经元损伤,差异具有显著性（P〈0.05）。结论脑苷肌肽作为临床常用的神经保护剂,其可能的作用机制之一是促进星形胶质细胞分泌胶质源性神经生长因子,发挥神经保护作用。

细胞培养实验中细胞系鉴定及质量控制重要性探讨

目的以脑胶质瘤细胞系(U87)为例,探讨对在细胞培养实验中所使用的细胞系进行鉴定和质量控制的重要性。方法对三株不同来源的U87细胞系进行STR分型检测,并结合显微镜下形态学特征,判断所测细胞系是否为真正的U87细胞系及是否发生交叉污染。结果通过细胞STR分型结果与ATCC、DSMZ中STR数据库对比,得出U87-1细胞分型与ATCC中U-87 MG Glioblastoma-Astrocytoma Human100%匹配;U87-2细胞分型与DSMZ数据库中U-87MG100%匹配;U87-3未得到扩增产物,不能进行分型,原因是该细胞株为非人源细胞。结论细胞培养实验中所使用细胞系的鉴定对于后续研究具有重要意义,可使用STR分型检测技术在细胞系培养过程中进行质量控制,对其进行准确鉴定,并排查是否存在细胞交叉污染。

酶联免疫吸附实验中全自动立式洗板法应用效果评价

目的 与传统手工洗板法、水平注液式洗板法相比较,评价酶联免疫吸附实验中全自动立式洗板法的应用效果.方法 评价全自动立式洗板法洗板机的性能,包括微孔中液体残留量测定、针头堵孔可能性检测、交叉污染可能性检测.收集乙型肝炎病毒表面抗原化学发光法定量检测结果分别为阴性、弱阳性、阳性、强阳性的四组样本各30例,使用酶联免疫吸附实验原理乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒检测,其中洗板步骤分别使用手工洗板法、水平注液式洗板法、全自动立式洗板法三种方法,由酶标仪读取结果,记录洗板时间,数据利用r检验进行统计学分析.结果 本研究中全自动立式洗板法酶标板微孔中液体残留量均值为0.0087±0.0002μL,＜0.01μL;全自动立式洗板机使用6个月（每周至少使用2次）,96个针头未出现堵孔现象,洗板机6个月前后的直线水柱长度分别为6.53±0.27cm、6.58 ±0.31cm,两组数据差异无统计学意义;阳性质控品和阴性质控品交叉检测,及阳性混合血清和阴性混合血清交叉检测未出现交叉污染现象.120例临床样本利用三种洗板法的定性检测结果一致,其中30例弱阳性样本,均有1例假阴性且来源于同一样本;三种洗板法检测阴性、弱阳性、阳性、强阳性样本的测定结果差异无统计学意义（P＞0.05）.手工洗板法、水平注液式洗板法、全自动立式洗板法的洗板时间分别为8min、5min、20s.结论 全自动立式洗板法可满足酶联免疫吸附实验临床检测中洗板要求.

应用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验过程探讨——以乙型肝炎病毒表面抗原检测为例

目的利用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验操作流程,通过缩短孵育时间,以提高工作效率。方法收集化学发光法定量检测乙肝表面抗原阳性高值样本30例、阳性中值样本30例、阳性临界值样本30例、阴性样本30例,使用ELISA试剂盒说明书推荐方法和快速孵育法同时进行检测,比较检测结果相关性。结果使用酶标板孵育器将孵育时间缩短至原来的1/2、1/3时,ELISA试剂盒说明书推荐方法、快速孵育法与化学发光法检测结果符合率100%;当孵育时间缩短至原来时间的1/4时,两种方法与化学发光法阴性、高值和中值样本检测结果符合率100%;临界值样本检测时,ELISA试剂盒说明书推荐方法与化学发光法检测结果符合率100%,快速孵育法与化学发光法结果 6例不一致,检测结果符合率80%。结论通过实验证实,酶联免疫吸附实验时,快速孵育法可满足临床检测,可将孵育时间缩短至原试剂盒推荐时间的1/3或1/2,可提高工作效率。

临床检验诊断学专业学生生产实习中加强人文教育的探讨

医学工作中不仅要求医务人员要具有较高的专业技能,而且还要具备高尚的人文素养。加强人文教育是医学教育的发展方向。检验科是医院重要的辅助科室和窗口科室之一,其工作人员主要来自临床检验诊断学专业培养的学生,其工作人员的人文素养在临床诊治中具有重要意义,生产实习是医学生实现基础理论知识向临床实践过渡的重要环节,加强临床检验诊断学专业学生生产实习中的人文教育是医疗队伍人员素质培养的关键。文章研究了医学人文的内涵及在临床检验诊断学专业学生中加强人文教育的重要意义,并探讨了在临床检验诊断学专业学生生产实习中加强人文教育的途径,促进人文教育。

医学科研实践中人文素质培养的重要性和途径

随着经济和技术的发展,医疗健康领域也面临前所未有的挑战,当前的国家战略、深化医改、医学新技术的涌现等对新一代的医学人才提出了更高层次的要求。新形势下,医学人才的人文素质直接影响医疗服务质量、医患关系,甚至全民健康事业的发展,因此,从各个环节加强医学人才人文素质培养就显得尤为重要。现就上述问题进行探讨,并提出在医学科研实践中加强人文素质培养的独特视角,具体体现在医学科研课题的设计、申请、实施、结果分析和成果展示中均需注重人文素质培养。

在教学中培养学生临床研究的伦理意识的探讨

通过介绍对培养医学院校学生的临床研究伦理意识的探讨,提升学生对涉及人体受试者的临床研究伦理审查要素的认识,可以更好地有助于学生在从事相关工作的职业生涯中,尤其是开展临床试验中对受试者保护的重视。

缺血性脑卒中患者与健康人群临床特征及基因多态性比较分析

目的研究缺血性脑卒中患者与健康人群临床特征以及血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM1)基因rs1867624位点、平滑肌蛋白1(LMOD1)基因rs2820315位点、蛋白C受体(PROCR)基因rs867186位点多态性差异。方法纳入2014年5月至2017年10月首都医科大学附属北京天坛医院收治的缺血性脑卒中患者326例,正常体检对照者432例,收集基本资料及临床信息。利用Real-time PCR方法,使用TaqMan探针对两组人群目标单核苷酸多态性(SNP)位点进行基因分型。结果观察组与对照组年龄、体质量指数、收缩压、舒张压、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、糖化血红蛋白比较差异均有统计学意义(t/Z/χ^(2)=-9.738、-6.006、12.144、-6.691、-10.451、8.303、3.879、17.967、-9.328、-7.675,P<0.05)对缺血性脑卒中患者及对照组基因型频率及等位基因频率分析显示,两组人群中PECAM1基因rs1867624位点、LMOD1基因rs2820315位点、PROCR基因rs867186位点多态性分布差异均无统计学意义(χ^(2)=0.184、0.132、2.353、2.342、0.694、0.052,P>0.05)。结论缺血性脑卒中人群与健康人群rs1867624、rs2820315、rs867186三个SNP位点的基因多态性无显著差异。

黄芪皂苷对神经胶质瘤的体外抑制作用及机制研究

目的探讨黄芪皂苷体外抗神经胶质瘤活性及相关机制。方法采用体外培养的SHG44细胞株为研究对象,流式细胞仪检测黄芪皂苷作用后SHG44细胞凋亡率,免疫印迹法检测细胞凋亡关键蛋白p53、Bax、Bcl-2的表达变化。结果黄芪皂苷可诱导SHG44肿瘤细胞凋亡;黄芪皂苷可引发SHG44肿瘤细胞促凋亡蛋白p53、Bax高表达,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。结论黄芪皂苷可通过p53信号通路激活和Bcl-2家族介导的细胞色素C途径诱导癌细胞凋亡,从而对神经胶质瘤细胞产生抑制作用。

长链非编码RNA CRNDE对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响

目的探讨CRNDE在胶质瘤细胞中发挥的功能和可能的作用机制。方法将CRNDE基因干扰si RNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用CCK8和Transwell实验分别检测细胞增殖和迁移能力变化,并利用Real-time PCR研究下游基因表达情况。结果 si RNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞增殖和迁移能力明显降低,MAPK/ERK通路中关键蛋白激酶Raf1、MEK2、ERK1、ERK2基因及转录因子c-Myc、NF-κB基因的表达均有显著降低。结论 CRNDE可能通过调节MAPK/ERK通路一系列相关基因表达,增加胶质瘤细胞的增殖和迁移能力。

可调微量移液器良好操作规范探讨

目的 探讨可调微量移液器的操作对实验结果的影响.方法 使用血清、水、异戊醇和无水乙醇四种液体,从移液器量程的选择、改变吸头的填充方式、调节量程方式、吸头是否提前浸润、浸入时间、角度、深度和移液速度等几方面,分析影响移液准确性的因素,探讨可调微量移液器的操作方法.结果 可调微量移液器使用过程中,选择量程合适的移液器;移液器垂直对准吸头插入并左右小幅旋转填充吸头;调节量程需顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积;提前浸润2～3次;浸入时间保持3s;吸头垂直（角度90度）浸入液面;浸入深度不宜过浅;慢速移液;以上操作能够显著提高移液准确性.结论 遵循良好的移液器操作规范对于得到准确的移液体积具有重要意义.

长链非编码RNA CRNDE调控胶质瘤细胞凋亡

目的探讨长链非编码RNA CRNDE在胶质瘤细胞凋亡中发挥的功能和可能的作用机制。方法将CRNDE基因干扰siRNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用PE Annexin-V/7-AAD双染,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并利用Western方法检测细胞凋亡关键蛋白的表达变化。结果 siRNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞凋亡程度增加,凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、PARP表达量明显升高。结论 CRNDE可能通过降低凋亡相关蛋白活性及表达水平,抑制胶质瘤细胞凋亡能力。

肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎患者病原菌分布及药物敏感性分析

目的 研究肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎（spontaneous bacterial peritonitis,SBP）腹水细菌培养阳性患者的病原菌分布及药物敏感性,为SBP患者合理使用抗生素提供理论依据。方法 回顾性分析2011~2014年在首都医科大学附属北京地坛医院住院肝硬化伴有腹水症状且送检腹水细菌培养患者资料,研究对象为其中腹水细菌培养阳性患者。结果肝硬化并有腹水症状且送检腹水细菌培养患者共638例,其中细菌培养阳性者67例（10.50%）。细菌培养阳性患者中共培养39株菌,其中革兰阴性杆菌19株（49%）,革兰阳性球菌20株（51%）。阳性率前5位的细菌依次是肠球菌7株（17.9%）、链球菌7株（17.9%）、葡萄球菌6株（15.4%）、大肠埃希菌6株（15.4%）、铜绿假单胞菌3株（7.7%）,其它菌种均为革兰阴性杆菌,所占比例较小（共占25.7%）。革兰阴性杆菌对碳青霉烯类、氨基糖苷类等的敏感率较高,均超过83%;革兰阳性球菌对万古霉素敏感率为100%。结论 肝硬化并发SBP患者细菌感染以革兰阳性球菌为主,其中革兰阳性球菌以屎肠球菌为主,革兰阴性杆菌以大肠埃希菌为主。临床治疗肝硬化并发SBP应在经验用药的基础上根据药敏结果合理应用抗生素。