滴定痘苗病毒的噬斑血吸附法的优化

目的对滴定痘苗病毒的噬斑血吸附法进行优化,克服该方法稳定性差、结果数据偏差大的问题。方法通过预试验确定痘苗病毒的最佳稀释倍数、病毒吸附温度及鸡血球加入方法等参数。采用优化的噬斑血吸附法,对天坛株痘苗病毒的原始种子批、主种子批、工作种子批和参考苗进行滴定,计算变异系数(CV),确定试验内、试验间和不同实验人员间的精密度。利用Qstat软件分析本次与以往滴定结果之间的关系。结果病毒的最佳稀释度为10-6,最佳吸附温度为25～30℃,加入鸡血球的最佳方法为病毒吸附72h后,弃去部分培养液,再加入鸡血球。4种样品测定结果的试验内、试验间和不同实验人员间的变异系数均小于5%,病毒滴度分别为(7.12±0.18)LgPFU/ml、(7.79±0.21)LgPFU/ml、(7.88±0.17)LgPFU/ml和(7.64±0.14)LgPFU/ml,均高于以往滴定结果。本次与以往滴定结果之间存在线性相关性。结论优化了滴定痘苗病毒滴度的噬斑血吸附法,确定了天坛株痘苗病毒的原始种子批、主种子批、工作种子批和参考苗的滴度,为天花疫苗多项检定试验提供了可靠依据。