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重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)肿瘤细胞杀伤活性检测方法的优化
1
作者
孙冬梅
王艳辉
+3 位作者
王立谦
赵凤颖
马艳秋
王宁
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期2101-2109,共9页
目的:优化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)对肿瘤细胞人乳腺癌细胞(michigan cancer foundation-7,MCF-7)的杀伤活性检测方法。方法:在不...
目的:优化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)对肿瘤细胞人乳腺癌细胞(michigan cancer foundation-7,MCF-7)的杀伤活性检测方法。方法:在不同时间加入不同浓度的活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂/ROS清除剂,确定对试验影响最小,且能有效去除活性氧的条件。对优化后的方法进行精密度和适用性验证。分别采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测,确定优化前、后方法是否有统计学差异。用不同代次的MCF-7细胞进行试验来确定细胞可使用代次。结果:在加入CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂前30 min左右,每孔加入50倍稀释的ROS抑制剂/ROS清除剂10μL为最佳条件。同一试验人员于同1 d 6次测定OrienX010的杀伤活性感染复数(multiplicity of infection,MOI)半数有效量(median effective dose,ED_(50))的RSD为15.1%,符合可接受标准;2名实验人员于不同日每人重复测定6次OrienX010的MOI ED_(50)的RSD为20.5%,符合可接受标准。对多批次的OrienX010进行肿瘤细胞杀伤活性检测,检测结果均符合质量标准。采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测,t Stat>t双尾临界值,说明优化前、后2组数据的平均值有显著性差异。MCF-7细胞检测到P 39,检测结果均合格且稳定。结论:优化后的方法有效消除了ROS对肿瘤细胞杀伤活性检测的影响,该方法具有良好的精密度及适用性,可用于重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)的肿瘤细胞杀伤活性检测;优化前、后的方法有统计学差异;MCF-7细胞可使用到P 39。
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关键词
优化
OrienX010
人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)
活性氧
肿瘤细胞杀伤活性
CCK-8
原文传递
题名
重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)肿瘤细胞杀伤活性检测方法的优化
1
作者
孙冬梅
王艳辉
王立谦
赵凤颖
马艳秋
王宁
机构
北京奥源和力生物技术有限公司
出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期2101-2109,共9页
文摘
目的:优化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)对肿瘤细胞人乳腺癌细胞(michigan cancer foundation-7,MCF-7)的杀伤活性检测方法。方法:在不同时间加入不同浓度的活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂/ROS清除剂,确定对试验影响最小,且能有效去除活性氧的条件。对优化后的方法进行精密度和适用性验证。分别采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测,确定优化前、后方法是否有统计学差异。用不同代次的MCF-7细胞进行试验来确定细胞可使用代次。结果:在加入CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂前30 min左右,每孔加入50倍稀释的ROS抑制剂/ROS清除剂10μL为最佳条件。同一试验人员于同1 d 6次测定OrienX010的杀伤活性感染复数(multiplicity of infection,MOI)半数有效量(median effective dose,ED_(50))的RSD为15.1%,符合可接受标准;2名实验人员于不同日每人重复测定6次OrienX010的MOI ED_(50)的RSD为20.5%,符合可接受标准。对多批次的OrienX010进行肿瘤细胞杀伤活性检测,检测结果均符合质量标准。采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测,t Stat>t双尾临界值,说明优化前、后2组数据的平均值有显著性差异。MCF-7细胞检测到P 39,检测结果均合格且稳定。结论:优化后的方法有效消除了ROS对肿瘤细胞杀伤活性检测的影响,该方法具有良好的精密度及适用性,可用于重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)的肿瘤细胞杀伤活性检测;优化前、后的方法有统计学差异;MCF-7细胞可使用到P 39。
关键词
优化
OrienX010
人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)
活性氧
肿瘤细胞杀伤活性
CCK-8
Keywords
optimization
OrienX010
MCF-7 cell
ROS
tumor cell killing activity
CCK-8
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)肿瘤细胞杀伤活性检测方法的优化
孙冬梅
王艳辉
王立谦
赵凤颖
马艳秋
王宁
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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已选择
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