辛伐他汀对BMSCs成骨分化早期β-catenin及Runx2表达的影响

目的观察辛伐他汀体外给药对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化早期β-catenin、Runx2表达的影响,探讨辛伐他汀在此过程中的作用及其作用机制。方法 20只4周龄雌性SD大鼠应用颈椎脱位法处死,无菌条件下取双侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨方向诱导培养。取相同第二代细胞随机分为实验组和对照组,实验组加入10-7mol/L的辛伐他汀(Simvastatin,SIM)(SIM溶于DMSO后制成母液再用完全培养基进行稀释),对照组加入含有等量DMSO的完全培养基。两组细胞在加入SIM 12 h和36 h后分别提取蛋白质和RNA,采用Western Blot法检测两组细胞β-catenin、Runx2蛋白的表达。采用实时定量-PCR法检测β-catenin、Runx2mRNA的表达。结果 (1)Western Blot结果:辛伐他汀干预12h后β-catenin和Runx2蛋白表达水平实验组与对照组相比无显著增高,两组间的差异均无统计学意义(P>0.05);辛伐他汀干预36h后实验组与对照组相比β-catenin和Runx2蛋白表达水平显著增高,两组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)实时定量-PCR结果:辛伐他汀干预12 h和36 h后β-catenin mRNA的表达水平实验组与对照组相比表达增高,两组间的差异有统计学意义(P<0.05);辛伐他汀干预12 h和36 h后Runx2 mRNA的表达水平实验组与对照组相比表达有一定程度的增高,但两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论辛伐他汀体外给药对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化早期有一定作用,这涉及到Wnt信号通路的活化,但是在不同的时间点所起作用有所差别。