呼吸道合胞病毒感染相关受体的研究进展

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是导致儿童和老年人下呼吸道感染的常见病原体之一。目前还没有疫苗可预防RSV感染,预防性和治疗性的RSV特异性抗体,由于其昂贵的价格和不确定的临床价值,主要在高危人群中使用。受体是病毒感染细胞一个决定性因素,它参与了病毒的入胞、致病等过程。因此,识别与RSV相互作用的受体,并研究其在RSV感染过程中的作用,对于深入了解RSV的致病过程并寻找治疗靶点有着非常重要的意义。笔者主要对已知的RSV感染所需受体及其致病机制进行综述,为未来RSV致病机制研究及潜在药物靶点和疫苗开发提供相关的信息。

新生儿内科患儿入院时咽拭子肠道病毒核酸检测的横断面研究

背景肠道病毒(EV)是导致新生儿感染的常见病原体之一,了解住院新生儿EV核酸检测的阳性率及疾病分布情况有助于制定合理的治疗方案。目的探讨新生儿内科住院患儿入院时肠道病毒(EV)咽拭子核酸检测的阳性率及疾病分布状况。设计横断面研究。方法对2020年10月至2021年9月在首都医科大学附属北京儿童医院新生儿内科住院的患儿,于入院当天采集咽拭子,采用CA16、EV71、EV通用型核酸三重实时荧光PCR检测试剂盒进行EV核酸检测。计算EV核酸检测阳性率,统计疾病分布情况,并比较EV阳性组与阴性组新生儿的临床表现和实验室指标差异。主要结局指标住院新生儿EV核酸检测的阳性率及疾病分布情况。结果①共纳入1095例新生儿(占同期住院新生儿的91.2%),其中男婴605例(55.3%),足月儿976例(89.1%),入院中位日龄为11(4,19)d,第一入院诊断的前3顺位为新生儿病理性黄疸、新生儿肺炎、新生儿感染,住院中位时间为8(6,12)d。②EV核酸检测阳性检出率为9.1‰(10/1095),感染性疾病患儿中EV核酸阳性检出率为18.6‰(9/483)。以呼吸道症状(5例)、黄疸(3例)和消化道症状(2例)为首发症状。10例均治愈或好转出院。③EV阳性组和阴性组在性别、出生体重、出生胎龄、是否早产、分娩方式、喂养方式、母亲存在围生期感染高危因素、母妊娠期糖尿病、发病日龄、住院时间、住院费用等方面差异均无统计学意义(P>0.05)。EV阳性组(60.0%)在发病前感染接触史的发生率高于EV阴性组(7.0%);EV阳性组中枢神经系统感染(20.0%)高于EV阴性组(3.1%);差异均有统计学意义。EV阳性组感染性疾病患儿比例(90.0%)高于阴性(43.7%)但差异无统计学意义;发热、病理性黄疸、呼吸道症状、消化道症状、神经系统症状的发生率在两组差异均无统计学意义(P>0.05)。④EV阳性组和阴性组血WBC总数、Hb、PLT减少发生率、心肌酶和ALT升高发生率、血清总胆红素值、白蛋白、血肌酐及血尿素氮的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿内科患儿入院时的EV咽拭子核酸检测阳性率为9.1‰,临床表现和实验室常规检测结果无特异性改变;家庭成员传播可能是新生儿咽拭子EV核酸检测阳性的主要原因;EV核酸检测阳性患儿发生中枢神经系统感染的风险较高。

线粒体自噬在病毒感染中的研究进展

线粒体自噬作为一种选择性自噬,通过自噬系统靶向功能受损或过量的线粒体,并将其体转运至溶酶体进行降解,对控制和维持线粒体的数量和质量具有重要作用。线粒体自噬参与许多生理和病理过程,包括先天免疫、细胞凋亡和炎症等。越来越多的研究表明,多种病毒调节线粒体自噬,以实现免疫逃逸和持续感染。本文分别对线粒体自噬的分子机制、病毒对线粒体自噬的调控以及线粒体自噬在病毒复制中的作用进行综述,旨在为理解病毒的致病机制及抗病毒策略提供新思路。

儿童社区获得性肺炎中人鼻病毒感染的临床流行病学特征研究

目的了解我国儿童社区获得性肺炎(CAP)中人鼻病毒(HRV)的优势基因型及流行特点。方法采集2017年6月至2019年12月我国南、北方地区(以秦岭-淮河为界)6家医疗机构的CAP住院患儿的咽拭子或鼻咽抽吸物,应用多重呼吸道病原体检测试剂盒,筛查16种常见呼吸道病毒。对HRV阳性样本进行基因分型,并行流行病学分析。结果本研究CAP患儿(2913例)中,HRV的总检出率为12.2%(356例),其中北方地区为10.3%(145/1410例),南方地区为14.0%(211/1503例)。南方地区HRV检出率显著高于北方地区,差异有统计学意义(χ^(2)=9.562,P=0.002)。流行病学分析显示,北方地区HRV阳性病例在各年龄段分布较平均,而南方地区90.5%的阳性病例为3岁以下婴幼儿。季节分布方面,北方地区HRV阳性病例主要分布在夏、秋季,而南方地区主要分布在春、秋季。HRV与其他病原的混合感染率为40.7%,南方地区混合感染率为49.0%,显著高于北方地区的28.0%,差异有统计学意义(χ^(2)=15.801,P<0.001)。北方地区HRV最常见的混合感染病原依次为呼吸道合胞病毒(RSV)、人博卡病毒(HBOV)和副流感病毒Ⅲ型(PIV3),混合感染率分别为5.0%、5.0%和4.0%。南方地区HRV最常见的混合感染病原依次为RSV、PIV3和人偏肺病毒(HMPV),混合感染率分别为9.0%、7.0%和6.0%。病毒基因分析结果显示,3种HRV基因型均有检出,HRV-A(118/220例)为优势基因型,其次为HRV-C(82/220例)。结论本研究儿童CAP中HRV的检出率为12.2%,南、北方地区HRV阳性病例在年龄及季节分布上存在差异。HRV与其他病原存在混合感染,南方地区混合感染率显著高于北方地区。HRV-A为优势基因型,其次为HRV-C。

病毒逃逸cGAS-STING通路介导的抗病毒免疫机制研究进展

cGAS-STING信号通路是天然免疫的重要组成部分。病毒感染后,宿主启动cGAS-STING通路诱导干扰素和干扰素刺激基因的表达发挥抗病毒作用。然而,病毒为了存活和复制,也进化出多种策略抵御机体的抗病毒免疫反应。针对cGAS-STING这一信号通路,不同的病毒其作用的靶点不同;即使是同一种病毒,不同的病毒蛋白作用的机制也不尽相同。本文总结了常见DNA病毒和RNA病毒逃逸cGAS-STING通路介导的抗病毒免疫的方式和策略,为病毒感染的致病机制研究以及疫苗和药物的研发提供参考。

2014—2020年儿童社区获得性肺炎中人副流感病毒感染的多中心研究

目的了解我国儿童社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)中人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIVs)感染的流行病学特点及临床特征,为HPIVs感染诊疗和防控提供基础数据。方法2014年11月至2020年2月,在11个省和直辖市的14家医院纳入5448名CAP住院儿童,采集鼻咽抽吸物或咽拭子,使用液相悬浮芯片技术检测包括HPIV1-4型等18种呼吸道病毒核酸,收集人口学资料和临床信息进行统计学分析。结果5448例CAP住院患儿中HPIVs总检出率为8.83%(481/5448),男性检出率高于女性(62.79%v.s 37.21%,χ^(2)=0.000,P=0.992)。1~<3岁年龄组的HPIVs检出率较其它年龄组高,且差异有统计学意义(χ^(2)=61.893,P<0.001)。北方地区患儿的HPIVs检出率高于南方地区(9.02%v.s 8.65%),但差异无统计学意义(χ^(2)=0.239,P=0.625)。北方和南方地区儿童中HPIV1-4型流行特征不完全一致。HPIV1在北方和南方地区均主要为秋季流行;HPIV2在北方夏季流行,南方检出率较低;HPIV3在北方和南方春夏季是流行高峰,但南方比北方持续时间更长;HPIV4在北方和南方均主要为秋季流行。在481名HPIVs阳性患儿中,单纯HPIV感染病例占58.42%(281/481),临床表现主要以咳嗽(90.75%)和发热(68.68%)为主;合并另一种HPIV型或其它病毒感染的病例占42.62%(205/481),合并2种及以上病毒感染的病例占11.43%(55/481),HPIV3与其它病毒发生合并感染的检出率最高。47名HPIVs阳性的重症肺炎患儿中HPIV3感染占比最多(76.80%)。结论HPIVs是引起我国儿童CAP的重要病原体之一,3岁以下儿童是HPIVs感染的主要群体;各型HPIV在北方和南方地区儿童中的流行特征不完全相同;HPIV3是儿童呼吸道HPIVs感染和重症的主要型别。

病毒感染激活和抑制炎症小体的研究进展

促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)主要由巨噬细胞和树突细胞产生,是宿主针对各种侵入病原体产生先天免疫应答的重要介质。这些促炎细胞因子从病毒感染的细胞中分泌,被称为炎症小体的多蛋白复合物严格调控。根据炎症小体识别蛋白的种类,炎症小体主要分为两类,即核苷酸结合寡聚结构域样受体(NOD-like receptors,NLRs)和黑色素瘤缺乏因子2样受体(Absent in melanoma 2,AIM2)炎症小体。与其他宿主防御机制不同,炎症小体活化后,会诱导促炎细胞因子IL-1β、IL-18的成熟及分泌。适量的促炎细胞因子有利于控制病理性感染,但如果过量,则会对机体造成一定免疫损伤。本文主要对近几年有关病毒感染对炎症小体的激活和抑制机制进行了综述,总结分析了炎症小体在参与天然免疫反应及病毒感染致病过程中具有的重要作用。

病毒感染中细胞自噬研究进展

细胞自噬是一种依赖于溶酶体的细胞内降解途径,用于细胞维持内环境的稳态。自噬广泛存在于真核细胞的生理、病理过程中。研究发现自噬与病毒之间的相互作用是一个复杂且多向化的过程,一方面自噬能够参与机体免疫应答、发挥抗病毒效应;另一方面,细胞的自噬机制也可被病毒操纵,以利于其自身复制。本文对近年来细胞自噬与病毒感染的相互作用进展,尤其是病毒如何调控自噬以促进其复制和致病的机制加以综述。

人腺病毒7型感染激活NLRP3炎症小体的机制研究

目的探讨人腺病毒7型(human adenovirus type 7,HAdV-7)感染对于炎症小体激活的影响及作用机制。方法采用免疫荧光检测HAdV-7对于THP-1分化的巨噬细胞的感染;应用ELISA方法检测HAdV-7感染对于IL-1β的激活;实时荧光定量PCR检测病毒感染对于NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1等mRNA表达的影响;蛋白质免疫印迹实验(western blot,WB)检测病毒感染后细胞内NLRP3、pro-IL-1β的表达及上清中caspase-1和IL-1β蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示HAdV-7可感染THP-1分化的巨噬细胞,WB显示HAdV-7感染诱导细胞内pro-IL-1β蛋白表达上调,ELISA检测表明HAdV-7感染可诱导IL-1β的分泌表达(MOI=0.5,P=0.0008)。使用Ac-YVDK-cmk抑制caspase-1表达后,HAdV-7感染上清中IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0025);HAdV-7感染caspase-1缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达同样被显著抑制(P=0.0191)。荧光定量PCR检测HAdV-7感染可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3 mRNA表达上调(NLRP3:P=0.0004;pro-IL-1β:P=0.0007),同时WB显示HAdV-7可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3蛋白表达上调;使用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞,可抑制HAdV-7感染的细胞上清中IL-1β的表达(P=0.0027);HAdV-7感染NLRP3缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0189)。分别使用TLR2、TLR4、TLR7/9信号传导抑制剂,抑制HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制TLR4信号传导,细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调(P=0.0122);使用ROS抑制剂、组织蛋白酶B抑制剂,或抑制K+外流,分别处理HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制组织蛋白酶B(P=0.0292),或抑制K+外流时(KCl,P=0.0022;Glibenclamide,P=0.0275),细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调。结论HAdV-7感染THP-1细胞激活NLRP3炎症小体,NLRP3炎症小体激活的第一信号通过Toll样受体4(TLR4)信号传导,第二信号主要通过半通道模型介导K+外流的和溶酶体破坏模型释放组织蛋白酶B的激活NLRP3炎症小体。

β属人冠状病毒感染研究进展

β属人冠状病毒(human coronavirus,HCoV)包括HCoV-OC43、HCoV-HKU1、严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)和2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV),其中SARS-CoV、MERS-CoV和2019-nCoV为高致病性HCoV,其跨种传播和流行对人类造成重大危害,对全球公共卫生及经济造成巨大损失,但相对于成人病例,儿童感染病例较少、临床表现较轻、预后较好,原因尚不清楚。本文对5种β属HCoV感染特点进行综述,比较儿童与成人病例的异同点并探讨其可能原因,以期为全面认识β属HCoV感染提供参考信息。

2017-2020年我国儿童急性下呼吸道人腺病毒感染流行病学特征分析

目的 了解我国儿童急性下呼吸道人腺病毒(human adenovirus,HAdV)感染的流行病学特征及优势基因型别。方法 收集2017年6月-2020年4月我国南北方6家医院的急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)住院儿童的呼吸道样本,使用多重呼吸道病毒检测试剂对常见呼吸道病毒进行检测。对HAdV阳性样本进行基因分型,并收集患儿的临床信息进行临床特征及流行病学分析。结果 本研究共纳入2 793例ALRTI患儿,其中143例HAdV阳性,检出率为5.12%。南北方检出率分别为6.37%(91/1 429)和3.81%(52/1 364),差异有统计学意义(χ^(2)=9.384,P=0.002),北方3~<6岁年龄组检出率最高,为5.94%;南方1~<3岁年龄组检出率最高,为9.37%。南方2019年春季和北方2019年夏季HAdV检出率最高,分别为10.43%(12/115)和13.70%(10/73)。92例HAdV阳性样本被成功分型,以B种的3型(35例)和7型(33例)居多;北方以B种的3型(19例)、7型(8例)和E种的4型(7例)多见,南方流行的优势型别为B种的3型(16例)和7型(25例)。患儿以肺炎为主要诊断(121例),其中重症肺炎15例,HAdV-7型感染10例。46.15%的患儿合并其他病毒感染,其中呼吸道合胞病毒(18例)为最常见的混合感染病毒。结论 HAdV是2017-2020年我国儿童ALRTI的重要病毒病原之一,感染常年存在;南北方流行的HAdV均以B种为主;HAdV感染重症肺炎以HAdV-7型为主。

流感病毒相关性脑病/脑炎研究进展

流感病毒一般引发呼吸道疾病,近年来,流感病毒引起的一些呼吸道外临床表现也逐渐引起人们关注。其中流感病毒相关性脑病/脑炎(IAE)病死率高,是引起流感病毒感染危重病例死亡的重要原因,治愈者通常存在神经系统后遗症。目前国际上对于IAE的认识普遍较少,现从临床表现、流行病学资料、危险因素、分类、治疗、预后与机制研究等方面系统回顾近年来在IAE取得的进展,以期加深对本病的认识。

慢性活动性EB病毒感染的发病机制和诊治进展

慢性活动性EBV感染(chronic active Epstein-Barr virus infection,CAEBV)是EBV感染T和NK细胞所致的一种淋巴增殖性疾病.其主要临床表现为传染性单核细胞增多症样症状反复发生或持续数月至数年,伴肝脾肿大,外周血EBV-DNA载量升高,可发生噬血细胞性淋巴组织细胞增生症、白血病、淋巴瘤等严重并发症,预后差,病死率高.由于其发病机制尚未完全阐明,国内外尚无统一的治疗方案.目前,化疗联合造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)是唯一有效的根治方法.本文综述了CAEBV发病机制、诊断及治疗等方面取得的研究进展,并对治疗中存在的问题进行了总结,旨在为CAEBV的临床诊断和治疗提供参考.

登革病毒共有序列候选DNA疫苗的免疫原性和保护性研究

目的研究登革病毒(Dengue virus,DENV)共有序列候选DNA疫苗pVAX1-cE80在小鼠体内的免疫原性及其保护作用。方法首先利用pVAX1-cE80 DNA免疫BALB/c小鼠,通过ELISA和噬斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)分别检测免疫后小鼠血清中抗登革病毒的4种血清型(dengue virus serotype 1-4,DENV1-4)IgG抗体和中和抗体(neutralizing antibody,nAb)效价;利用酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测小鼠脾细胞分泌DENV1-4特异性Th1/Th2型细胞因子的能力;通过攻毒试验评价疫苗对DENV1-4感染的保护作用。结果接种疫苗的小鼠可产生针对DENV1-4的四价抗体,其中抗DENV2抗体水平最高,IgG抗体和nAb效价分别为1∶1086和1∶120;免疫后小鼠脾细胞在DENV1-4抗原刺激下均可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;疫苗免疫可为小鼠提供针对DENV1-4的部分保护作用。结论单一共有序列登革病毒候选DNA疫苗可诱导小鼠产生四价体液免疫反应和细胞免疫反应,并为小鼠提供部分保护作用,为登革病毒共有序列疫苗的研发奠定了基础。

ddPCR在儿童异基因造血干细胞移植后EB病毒感染监测中的初步应用

目的本研究应用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测儿童异基因造血干细胞移植术(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,alloHSCT)术后EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染的情况,初步探讨其在临床中作为alloHSCT移植术后EBV感染监测的补充检测方法的可行性。方法收集47例alloHSCT术后儿童共290份外周血样本,使用ddPCR和实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)分别检测血浆中EBV DNA载量,比较两者的检出效能。通过对其中39例患儿进行连续检测,观察EBV DNA载量的动态变化,并分析两种方法的优劣势。结果ddPCR的EBV阳性检出率显著高于qPCR(χ^(2)=20.25,P<0.001),尤其在低病毒载量样本中表现更佳。在连续监测EBV DNA期间,39例患儿中有14例出现ddPCR阳性结果,其中有2例在ddPCR检测阳性、qPCR检测阴性的同时出现了皮疹和发热,提示ddPCR在早期发现EBV感染方面更为敏感。结论ddPCR在alloHSCT术后患儿EBV感染监测中具有一定优势,尤其是对于低病毒载量的样本。然而,由于该技术在临床应用中尚处于探索阶段,仍需更多的研究和实践来证实ddPCR的应用价值。

肠道病毒受体的研究进展

肠道病毒是儿童感染的重要病原体,可引起手足口病、疱疹性咽峡炎、脊髓灰质炎、肺炎、脑膜炎、脑炎和新生儿脓毒症等多种疾病,严重威胁儿童生命健康。近年来,受体作为肠道病毒感染的重要宿主因子备受关注,其对肠道病毒感染致病机制研究具有重要作用。本文对目前报道的肠道病毒受体及其分子结构和功能进行综述。

2017-2020年我国儿童急性下呼吸道感染住院病例中呼吸道合胞病毒的感染情况分析

目的了解我国儿童急性下呼吸道感染(ALRTI)住院病例呼吸道合胞病毒(RSV)的感染状况。方法于2017年6月至2020年3月,在我国华北地区的首都医科大学附属北京儿童医院、东北地区的中国医科大学附属盛京医院、西北地区的银川市妇幼保健院、华南地区的广州市妇女儿童医疗中心、东南地区的温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院和西南地区的贵阳市妇幼保健院开展前瞻性儿童ALRTI病例感染RSV的多中心研究,最终共纳入2839例病例。采集儿童ALRTI住院病例的呼吸道样本,使用多重实时荧光定量PCR方法筛检样本中的16种呼吸道病毒,分析儿童ALRTI住院病例中RSV感染状况。结果RSV总检出率为18.6%(528/2839);各地区RSV检出率5.5%~44.3%。男童的RSV检出率高于女童检出率(20.2%比16.3%)(P=0.009)。<5岁年龄组的RSV检出率(22.3%,501/2245)高于5~18岁组(4.5%,27/594),差异有统计学意义(χ^(2)=97.98,P<0.001);<6月龄组患儿的RSV检出率(37.0%)高于其他年龄组,且差异有统计学意义(均P<0.001)。2018年1月至2019年12月,RSV全年均有检出(除2019年6月和7月),冬春季是流行高峰。270例重症肺炎病例中,RSV核酸阳性病例占比为17.0%(46/270),其中36例为单纯RSV感染。结论RSV是引起我国5岁以下儿童ALRTI的常见病毒病原体;全年均可检出,并呈现出冬春季流行高峰。

2009年至2021年我国9省份发热呼吸道症候群病例中人偏肺病毒感染情况及流行特征分析

目的阐明我国发热呼吸道症候群(FRS)监测病例中人偏肺病毒(HMPV)感染情况及病毒流行特征,为我国HMPV引起呼吸道相关疾病的临床诊治和疾病防控提供重要基线数据。方法选取2009年1月至2021年6月在我国9省份(北京、河北、吉林、山东、陕西、新疆、安徽、广东、湖南)的FRS监测病例作为研究对象。收集病例临床、流行病学信息并采集呼吸道标本,应用实时荧光定量PCR对样本进行HMPV核酸检测。结果共11660例样本进行了HMPV检测,HMPV阳性病例数为296例,阳性检出率为2.54%。其中218例病例为单一HMPV感染,78例病例同时检出了含HMPV 2种或2种以上病毒,占HMPV阳性病例数的26.35%。<5岁儿童是HMPV主要发病人群,检出率为3.10%。在<5岁儿童中,含HMPV混合感染中肺炎病例的比例高于单一HMPV感染病例。HMPV全年均可检出,病毒流行主要以冬、春季为主,3月份是HMPV流行高峰。结论HMPV是引起儿童急性呼吸道感染的重要病原之一,病毒流行具有明显的季节性。HMPV可引起单独感染,也可与其他呼吸道病毒合并感染,合并HMPV感染可能增加儿童肺炎的风险。

儿童急性坏死性脑病的流行病学特点及预后研究进展

急性坏死性脑病(ANE)是一种全球分布的罕见并且独特的急性脑病。通常以病毒感染相关的高热症状起病,随后迅速恶化,出现抽搐、意识障碍,甚至昏迷。ANE的神经放射学特征是累及双侧丘脑等部位的多灶性、对称性脑部病变。目前尚无针对ANE的特异性治疗方法,预后较差,大多伴随着不同程度的神经系统后遗症,甚至死亡。本文总结了儿童中这种罕见但致命疾病的流行病学特点、诊断和预后的研究进展。

重视呼吸道人副流感病毒感染

人副流感病毒(human parainfluenza viruses,HPIVs)属于副黏病毒科,为有包膜的单股负链RNA病毒,根据其血清学及基因组特征,分为HPIV1-4型。HPIVs是引起儿童和成人急性呼吸道感染的重要病毒病原,其疾病负担可能被严重低估。目前HPIVs感染尚无有效的疫苗和特异的抗病毒药物,需要重视HPIVs感染的病原学监测、致病机制研究、疾病诊治、抗病毒药物和疫苗的研发。