ZEB1过表达对乳腺浸润性导管癌细胞增殖与转移潜能影响

目的乳腺浸润性导管癌(breast invasive carcinoma,BRCA)在乳腺癌中最常见,比导管原位癌恶性程度更高,预后和治疗效果不乐观。本研究通过检测BRCA细胞中E盒锌指结合蛋白(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)的表达,分析其过表达对人BRCA细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响,探讨其与BRCA发生发展的关系。方法通过蛋白质印迹法检测BRCA细胞中ZEB1蛋白水平的表达情况,另构建过表达ZEB1BRCA细胞并通过蛋白质印迹法确认其过表达水平。采用细胞计数盒8(cell counting kit 8,CCK8)法和Transwell实验分别检测过表达ZEB1对BRCA细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果蛋白质印迹法结果显示,ZEB1在BRCA细胞HCC38和BT474中的表达分别为0.28±0.02和0.22±0.01,低于正常乳腺上皮细胞(0.90±0.06),差异有统计学意义,t值分别为23.56和18.33,均P<0.001。CCK8实验结果显示,HCC38细胞ZEB1过表达组和Vector组经2因素分析结果显示F组别=6.610,P组别=0.042;F时间=9.236,P时间=0.963;F组别×时间=26.287,P组别×时间<0.001。这表明处理药物的主效应差异有统计学意义,而且药物与时间存在协同作用。ZEB1过表达组在第4天和第5天时的细胞增殖活性低于Vector组,且差异有统计学意义(t4d=4.370,P4d=0.001;t5d=5.627,P5d=0.001);BT474细胞ZEB1过表达组和Vector组经2因素分析结果显示F组别=6.737,P组别=0.039;F时间=14.619,P时间=0.921;F组别×时间=267.723,P组别×时间<0.001。这表明处理药物的主效应差异有统计学意义,而且药物与时间存在协同作用。BT474细胞ZEB1过表达组在第4天和第5天时,细胞增殖活性低于Vector组,差异有统计学意义(t4d=3.682,P4d=0.001;t5d=6.819,P5d<0.001)。Transwell迁移和侵袭实验发现,在HCC38细胞中过表达ZEB1,细胞迁移数目为41±7.94,少于Vector组82.33±7.09,t=4.28,P=0.003;在BT474细胞中过表达ZEB1,细胞迁移数目为44.33±6.11,也少于对应的Vector组89.33±5.69,t=5.51,P=0.006;过表达ZEB1的HCC38细胞,细胞侵袭数目为22.33±4.04,少于对照66.33±8.74,t=2.41,P=0.001;过表达ZEB1的BT474细胞,细胞侵袭数目为21.33±2.52,少于Vector组62.67±6.66,t=3.07,P=0.004。结论ZEB1在BRCA细胞中低表达,过表达ZEB1抑制BRCA细胞的增殖、迁移和侵袭能力。