硅化超顺磁氧化铁纳米颗粒标记人羊膜间充质细胞的效率及其对细胞增殖的影响

旨在探讨一种新型硅化超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记人羊膜间充质细胞的最佳方法,并检测其对细胞增殖的影响.用不同浓度的Si-SPIO和多聚赖氨酸混合制备PLL-Si-SPIO复合物,标记体外培养的hAMCs.利用普鲁士蓝染色和透射电子显微镜等方法对Si-SPIO的标记情况进行分析鉴定.分析Si-SPIO标记后1~4周铁颗粒在细胞内的维持与稳定.应用MTS分析法探讨经Si-SPIO标记后hAMCs的增殖活性.Si-SPIO标记后的hAMCs移植到小鼠纹状体内1周,鉴定Si-SPIO阳性细胞的存活与分布.观察发现,hAMCs经Si-SPIO标记后细胞内可检测到大量铁颗粒,铁颗粒能在细胞内维持4周以上.Si-SPIO标记具有浓度依赖性,最适浓度为20μg/mL;较低浓度的Si-SPIO对细胞增殖活力没有显著影响.移植到小鼠脑内1周后可见Si-SPIO阳性细胞.结果可知,浓度为20μg/mL的Si-SPIO标记hAMCs可获得良好的标记效果,并且不影响细胞的增殖活力.

人羊膜间充质细胞向成骨细胞诱导分化的实验研究

目的 观察人羊膜间充质细胞（humanamnionmesenchymalcells，hAMCs）体外诱导向成骨细胞分化，为骨组织工程提供种子细胞。方法从剖宫产后废弃的人羊膜组织分离培养hAMCs，经成骨细胞诱导条件培养基诱导后，对细胞形态特征、碱性磷酸酶、骨桥素、骨钙素表达以及I型胶原分泌进行观察和检测。结果原代培养的hAMCs形态呈长梭形或不规则形，呈均匀分布生长，传代后细胞体积略变大，约5～7d传代1次。经成骨细胞诱导培养15d后，hAMCs碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥素的表达呈阳性，并且检测有I型胶原分泌。结论hAMCs易于体外分离培养及扩增，体外成骨细胞定向诱导的hAMCs具有典型的成骨细胞的形态和功能性特征，是良好的骨组织工程种子细胞。