5种肿瘤标志物对恶性胸腔积液诊断价值的初步评估

目的探讨癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原153(CA153)5种肿瘤标志物对于恶性胸腔积液鉴别诊断的价值。方法连续收集的恶性胸腔积液和良性胸腔积液分别从1家肿瘤专科医院与1家综合医院获得;用电化学发光法检测上述5种肿瘤标志物;选取诊断特异性100%时对应的肿瘤标志物浓度作为切值,评估单项和联合诊断的敏感性。结果恶性胸腔积液组(132例)胸腔积液5种肿瘤标志物水平高于良性组(43例)(P<0.01)。诊断特异性为100%时,CEA、CA153、CYFRA21-1单项诊断恶性胸腔积液的阳性率均大于30%,CEA检测的敏感性最高达64.4%,CA199、CA125单项诊断的敏感性较低,均小于30%(分别为28.0%、15.9%);CEA/CA153和CEA/CYFRA21-1两两联合和3项联合检测诊断恶性胸腔积液的敏感性分别为71.2%、74.2%、76.5%。结论联合检测胸腔积液CEA、CYFRA21-1和CA153对于恶性胸腔积液诊断具有良好性能。

肿瘤专科医院机会性感染筛查患者梅毒螺旋体血清学试验阳性率调查

目的调查近一年肿瘤专科医院行感染筛查患者梅毒螺旋体血清学阳性率,评价化学发光微粒子免疫分析法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutination,TPPA)和梅毒快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma regain card test,RPR)3种方法检测结果的一致性,为制定合理的梅毒螺旋体血清学筛查和报告模式提供依据。方法梅毒血清学初筛采用CMIA,当S/CO>1时,报告初筛阳性,阴性结果发阴性报告;阳性时,行TPPA和RPR检测。分析不同滴度范围TPPA和RPR的阳性率。结果连续入选40350例行感染筛查患者,初筛阳性者共519例(占1.29%)。初筛阳性者TPPA复检阳性373例(占71.86%),RPR阳性49例(占9.44%)。CMIA检测滴度S/CO在1.1~2.0、2.1~3.0、3.1~4.0、4.1~5.0、5.1~6.0、6.1~10.0、>10时,TPPA与RPR检测的阳性率分别为21%、0%,67%、0%,71%、5%,68%、10%,91%、9%,89%、0%,99%、21%。结论肿瘤专科医院患者梅毒螺旋体血清学特异性抗体CMIA初筛阳性率和TPPA确认试验阳性率与三级综合医院相近,但RPR阳性率较低。初筛滴度边缘升高者,TPPA阴性者占比高。

拉萨地区儿童临床常用生化检验项目参考区间验证

目的验证卫生行业标准WS/T780-2021《儿童临床常用生化检验项目参考区间》,判断其是否适用于我实验室所服务的拉萨地区儿童。方法在拉萨市人民医院体检人群中筛选健康体检儿童,按照参考区间建立时的性别、年龄亚组划分标准,每亚组筛选合格参考个体不少于20名,按WS/T661《静脉血液标本采集指南》采集样本,在迈瑞BS2000全自动生化分析仪上进行生化项目检测,将检测结果与行标参考区间进行比较,并对各检测参数进行年龄性别间差异比较。结果17~18岁女孩碱性磷酸酶(ALP)符合率为73.6%,未通过验证;其余的各亚组符合率均>90%,通过验证。对各项目年龄组间差异分析,除血清氯(Cl)在年龄组间差异无统计学意义,其余各项目在年龄组间差异均有统计学意义(P<0.05)。对相同年龄段性别间差异分析,天门冬氨酸氨基转移酶(AST)13~18岁男女组间差异无统计学意义,无机磷(IP)15~18岁男女组间差异无统计学意义,其余各项目在相同年龄段性别间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论《儿童临床常用生化检验项目参考区间》基本适用于拉萨地区儿童,17~18岁女孩碱性磷酸酶参考区间应单独制定;儿童生化检验项目在不同年龄及性别间有较大差异,实验室在引用或建立儿童生化项目参考区间时应重视年龄及性别划分。

北京地区22家三级医院检验结果危急值调查与分析

目的调查北京地区22家三级医院检验结果危急值项目及警戒限值,为检验结果危急值设置提供参考。方法通过电子邮件、微信上传照片收集调查医院医务处下发的危急值项目及其警戒限值的文件。结果 22家医院共设置危急值项目63项。所有医院均将血红蛋白、血小板、血钾、血钙、血糖列入危急值报告,其他认可度较高的项目及其所占的百分比分别为白细胞计数95.5%(21/22)、活化部分凝血活酶时间90.9%(20/22)、血钠86.4%(19/22)、纤维蛋白原68.2%(15/22)、凝血酶原时间63.6%(14/22)。微生物和感染类项目共有13个危急值项目。结论北京地区医院危急值项目的设置有一定差异,多数项目警戒限值相近。

新一代测序技术在肿瘤临床中的应用

随着测序技术的不断发展,成本低、速度快、通量高的新一代测序(NGS)技术在肿瘤临床领域显现出很高的应用价值。本文对NGS在肿瘤临床中的应用和研究进行了综述,主要包括检测胚系突变和单核苷酸多态性用于肿瘤预测预防,检测血浆中循环肿瘤DNA(ctDNA)用于肿瘤的早期诊断,基于NGS的单细胞测序技术检测体细胞突变用于指导个体化、靶向治疗及疗效预测。同时也简要介绍了NGS技术在临床应用中面临的挑战,为其更好地服务于临床提供思路。

UA-5800和AE-4020尿液分析仪尿蛋白试纸条结果的一致性及其与尿蛋白/肌酐比值的相关性研究

目的比较迈瑞公司UA-5800和日本爱科来公司AE-4020尿液分析仪试纸条检测尿蛋白的一致性并验证其测定的灵敏度和特异性。方法随机收集2016年10月某肿瘤专科医院门诊及住院尿液标本共721例,同时采用UA-5800和AE-4020尿液分析仪行尿蛋白定性检测,其后采用生化分析仪检测尿白蛋白含量和肌酐水平,计算尿白蛋白/肌酐比值(ACR)。以ACR≥30 mg/g Cr作为尿蛋白阳性的诊断标准,以尿试纸条阴性组ACR<30 mg/g Cr的阴性率作为特异性,以尿试纸条结果微量、1+、2+和3+组ACR≥30 mg/g Cr的阳性率作为灵敏度。结果UA-5800和AE-4020的尿蛋白定性结果具有一致性(κ=0.65),两者检测尿蛋白的特异性分别为85.19%和83.41%。UA-5800和AE-4020检出蛋白尿的灵敏度在尿蛋白微量组、1+组、2+组和3+组分别为35.53%和34.27%、86.79%和73.69%、100%和100%、100%和92.31%。结论国产UA-5800和日本AE-4020尿分析仪尿蛋白干化学检测具有较高的一致性和良好的诊断蛋白尿的特异性和灵敏度。二者均具有良好的蛋白尿筛查性能。

临床实验室HIV感染的筛查、确认及报告

艾滋病在我国的传播呈现快速增长的趋势,已成为严重威胁我国人民健康的公共社会问题。近几年来中国疾病预防与控制中心对于HIV感染筛查策略有所调整,中美间筛查策略也有细微差别。该文简要介绍了HIV感染者筛查的血清学生物标志物及中美筛查和确认策略,并对医疗机构HIV筛查报告发放模式提出建议。

人Survivin蛋白的纯化、单克隆抗体的制备及在肿瘤细胞的表达

目的表达人Survivin重组蛋白、制备单克隆抗体及检测Survivin在多种肿瘤细胞中的表达。方法诱导含有pMS-Survivin重组质粒的E.coli.表达人MS2-Survivin重组蛋白,并作为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA双筛,获得稳定分泌抗人Survivin mAb的杂交瘤细胞株。ELISA检测Survivin mAb的特异性。免疫细胞化学检测多种肿瘤细胞中天然Survivin的表达情况。结果诱导菌在相对分子质量为30KD左右表达出一新的蛋白条带。筛选出2株稳定分泌特异性抗人Survivin mAb的杂交瘤细胞株,亚类鉴定均为IgG1类。两株单克隆抗体的效价均达到6.4×105。ELISA结果显示出抗人Survivin mAb的特异性。在胃癌细胞、肺癌细胞、宫颈癌细胞中均强表达,且主要在细胞浆中。结论成功制备出特异性抗人Survivin mAb,为以后应用于临床检测奠定了基础,也为其进一步开发成诊断性试剂盒奠定了基础。

血管内皮生长因子与内皮细胞生长因子的比较分析及研究进展

生长因子是一类通过与细胞膜受体特异性结合后刺激细胞生长的细胞因子，是细胞因子家族的重要组成部分。生长因子主要包括血管内皮生长因子、内皮细胞生长因子、成纤维细胞生长因子家族（fibroblast growth factor,FGFs）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、神经生长因子（nerve growth factor，NGF）、转化生长因子（transforming growth factor，TGF）等。

实验室检查在胸腔渗出液与漏出液鉴别诊断中的作用

胸腔积液是由于局部或全身病变破坏了胸腔内液体滤过与吸收的动态平衡,导致胸腔内液体形成过快或吸收过缓所产生的一种临床常见病征,分为渗出液与漏出液两种性质。胸腔积液的性质对病因的辅助诊断具有一定的临床价值。本文对形态学和生物化学检查在渗出液与漏出液鉴别诊断中的现状作归纳与总结。

鼠抗人天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体的制备与肿瘤表达检测

目的:通过制备抗天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体(mAb),检测ASNS在不同肿瘤中的表达,探索其表达的意义。方法:诱导表达融合蛋白MS2-ASNS,以纯化的MS2-ASNS蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0融合,以融合蛋白MS2-ASNS和MS2-PAI通过间接ELISA双筛和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA和Western blot方法对抗ASNS mAb效价、特异性及亲和力进行鉴定。IHC技术检测ASNS在肿瘤细胞株及肿瘤组织中的表达。结果:获得2株能高效分泌特异性抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株F4-15、F4-16,亚类均为IgG2a。间接ELISA结果表明制备的抗体有很好的特异性,抗体效价均达到1∶5×105。Western blot鉴定抗ASNS mAb能特异性识别肿瘤细胞株中的ASNS。IHC技术检测天然ASNS在胃癌细胞株SGC-7901和肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7402、HepG2及肺癌、食管癌组织中均为胞质表达。结论:制备的抗ASNSmAb特异性强,可检测ASNS在多种肿瘤中的表达,为进一步研究ASNS在特定肿瘤如中线鼻/鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达奠定了基础。

2010～2012年913株肺炎克雷伯菌感染的分布与耐药性研究

目的调查肺炎克雷伯菌的分布及其耐药性变化。方法选择2010年1月至2012年12北京市肿瘤防治研究所收集的913株肺炎克雷伯菌临床分离菌株作为研究对象,采用K-B法进行药敏试验,所得数据采用WHONET 5.6进行分析。结果肺炎克雷伯菌临床分离菌株的标本主要来源于痰标本(46.0%);超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性菌株的阳性率为51.2%;连续3年的药敏结果显示,肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢呋辛、头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲口恶唑和环丙沙星有较高的耐药率(>30%)。结论近3年来,肺炎克雷伯菌所致感染的耐药率趋于平稳,但肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率较高。

血管内皮生长因子在肿瘤血管形成中的作用及其靶向治疗研究进展

肿瘤发展依赖于组织周围新生血管的形成。在众多促进血管生成的内源性因子中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发挥了关键性作用,因此,以VEGF为靶点进行抗肿瘤血管生成成为抗癌治疗的重要策略。截至目前,大量靶向VEGF信号转导系统的抗血管生成药物已应用于临床或处于临床试验阶段,包括VEGF单克隆抗体、VEGF受体激酶抑制剂及作用于其下游信号通路的小分子抑制剂等。本文针对VEGF的信号转导系统及其靶向治疗现状予以综述,并简要阐述抗肿瘤血管生成治疗过程中耐药现象的产生机制。

建立数字PCR检测非小细胞肺癌溶酶体相关的4次跨膜蛋白B基因拷贝数变异方法

建立芯片式数字PCR(dPCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)LAPTM4B基因拷贝数变异方法,并初步评估其基本性能和临床应用的可行性。设计LAPTM4B基因引物及特异性探针,建立dPCR反应体系,根据制备的不同浓度目的DNA样品验证该检测方法的最低检测限、精密度和线性范围。本研究首次建立并优化dPCR检测LAPTM4B基因拷贝数的反应体系,分析数据显示,该方法最低检测到12.5%的LAPTM4B基因拷贝数缺失,批间精密度变异系数CV<10%,且缺失比例在12.5%~100%范围内线性良好(R^(2)>0.99)。此外,收集2021年3月至7月于北京大学肿瘤医院就诊的6例NSCLC患者,采用自建方法检测其冰冻组织标本,探究其临床应用可行性。dPCR结果显示,其中5例患者的组织样本存在LAPTM4B基因拷贝数缺失,1例出现拷贝数增加,推测可能与其术前化疗有关。综上所述,本研究成功应用芯片式dPCR方法,建立非小细胞肺癌LAPTM4B基因拷贝数变异的检测体系,并在组织标本中初步证实其临床应用的价值。

肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中价值

目的探讨联合检测血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)19-9、CA125、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19fragments,CYFRA21-1)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)对肺癌的诊断价值。方法肺腺癌患者102例(腺癌组)、肺鳞癌患者60例(鳞癌组)、肺小细胞癌患者36例(小细胞癌组)和95例体检健康者(对照组),检测4组血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC水平,统计4组6项指标的阳性率,计算6项指标单独及联合检测诊断肺癌的灵敏性和特异性。结果腺癌组血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1和SCC阳性率分别为67.6%、28.4%、52.0%、58.8%、51.0%、14.7%,鳞癌组分别为33.3%、11.7%、41.7%、43.3%、65.0%、40.0%,小细胞癌组分别为44.4%、16.7%、13.9%、75.0%、36.1%、2.8%,对照组分别为1.1%、0、0、5.3%、2.1%、2.1%,除SCC阳性率在小细胞肺癌组与对照组比较差异无统计意义(P>0.05)外,腺癌组、鳞癌组、小细胞癌组6项指标阳性率均高于对照组(P<0.05),腺癌组CEA、CA125阳性率高于鳞癌组和小细胞癌组(P<0.05),小细胞癌组NSE阳性率高于腺癌组和鳞癌组(P<0.05),鳞癌组SCC阳性率高于腺癌和小细胞癌组(P<0.05);血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1和SCC单项指标诊断肺癌的敏感性分别为52.5%、21.0%、41.5%、56.5%、52.0%、20.0%,均低于6项指标联合检测(91.5%)(P<0.05)。结论血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC6在肺癌诊断及分型诊断中均有一定价值,联合检测6项肿瘤标志物可提高肺癌诊断的敏感性。

CellaVision DM96血细胞形态分析仪外周血细胞分类结果评价

目的评价CellaVision DM96全自动血细胞形态分析仪(简称DM96)对外周血白细胞与非白细胞成分识别与分类的性能。方法选取来自健康体检人员、肿瘤患者及白血病患者共155例外周血标本,经涂片染色,用DM96对外周血中白细胞与干扰白细胞识别的非白细胞成分共17类进行预分类,经专业人员审核再分类,以再分类结果作为"金标准"计算DM96对这17类成分分类的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果本研究DM96共采集白细胞与非白细胞成分19 587个,总正确率为82.3%(16 123/19 587)。DM96在健康体检人员和肿瘤患者组中对中性粒细胞、淋巴细胞预分类的敏感性和阳性预测值均>85%。DM96对检测幼稚粒细胞的敏感性及阳性预测值均<50%,对原幼细胞的敏感性较低,为36.1%(223/618),但阳性预测值良好,为92.1%(223/242)。结论 DM96对成熟细胞有较高识别能力,但对幼稚粒细胞和原幼细胞的识别不佳;可作为外周血涂片形态学复检的辅助工具,但对含有幼稚细胞较多的白血病外周血标本,建议仍进行人工显微镜检查。

3种检测系统常规血液凝固试验结果一致性比较

目的比较3种系统测定凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(PT-INR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(DD)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)结果的一致性,并观察质控物的基质效应。方法选取不同水平患者样本100份,采用CA7000血液凝固分析仪、Top700血液凝固分析仪、CP2000血液凝固分析仪(分别简称CA7000、TOP700、CP2000)同时检测PT、PT-INR、APTT、Fib、TT、DD、FDP,采用线性回归分析评价不同系统检测患者样本结果的相关性,计算两两系统间相对偏差。选取18种不同来源质控物在3种检测系统上同时检测PT、Fib、DD,评价质控物互换性。结果不同系统检测患者样本PT、PT-INR、Fib结果有良好的相关性(r2为0.91～0.99),两两系统间偏差分别<15%、15%、20%;3种系统检测DD的结果显著相关(r2≥0.90),CA7000、CP2000检测DD一致性好,但Top700测定结果显著低于CA7000、CP2000;不同系统检测患者样本APTT、TT结果有中度相关性(r2为0.56～0.76),且三者间测定结果有系统偏差。3种系统均采用同一品牌试剂盒及配套校准品检测FDP,系统间FDP检测结果有良好相关性(r2>0.99)。不同系统检测DD结果相关性良好(r2为0.92～0.99),但两两系统间测定结果偏差显著。18种质控物PT、Fib、DD的检测结果在3种检测系统间均无互换性。结论不同检测系统血液凝固试验检测结果一致可比程度不同,血凝质控物基质效应显著,使其在不同系统上检测结果偏差大于患者样本的检测结果。

肿瘤患者铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

目的分析本院2010—2013年住院的肿瘤患者铜绿假单胞菌分布及其对常用抗生素的耐药情况。方法分析临床送检标本中分离出的571株铜绿假单胞菌的分布情况,统计其对14种常用抗生素的耐药率。结果 571株铜绿假单胞菌中,痰标本检出354株(62.0%),气管吸出物标本检出113株(19.8%),血液、分泌液、穿刺液等标本共检出104株(18.2%);肿瘤外科检出322株(56.4%),肿瘤内科检出150株(26.3%),ICU检出99株(17.3%);38株(6.7%)对多种抗生素耐药;对头孢曲松和头孢替坦的耐药率均>94.0%,对左氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素和阿米卡星的耐药率均<10.0%。结论了解本院铜绿假单胞菌分布情况及其对常用抗生素的耐药性,对临床治疗肿瘤患者铜绿假单胞菌感染有重要作用。

抗肿瘤血管内皮细胞生长因子靶向治疗的应用与思考

以肿瘤血管生成为靶点的抗肿瘤治疗已在临床应用,其中抗血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)靶向治疗成为最常用与发展最快的抗肿瘤新生血管治疗。本文仅对抗肿瘤VEGF靶向治疗应用和存在的问题阐述如下。

腺苷脱氨酶诊断结核性胸腔积液的性能验证

目的验证腺苷脱氨酶(ADA)诊断结核性胸腔积液的性能。方法连续收集结核性胸腔积液43例、非结核性胸腔积液163例,用酶动力学法检测胸腔积液中ADA浓度。以非结核性胸腔积液组为对照,用ROC曲线计算ADA诊断结核性胸腔积液的临界值,并与既往文献报道的ADA诊断的敏感性和特异性进行比较。结果结核性胸腔积液组ADA浓度(中位数52.5 U/L)高于对照组(中位数9.8和10.6 U/L)(P<0.05)。临界值为25.0 U/L时,诊断结核性胸腔积液的敏感性和特异性分别为88.0%和91.0%。分析17篇QUADAS评分≥10分的文献发现,ADA诊断结核性胸腔积液的临界值为(28.1±12.8)U/L(10.2~55.8 U/L),Meta分析合并的诊断敏感性为89.0%(95%CI:87%~91%),合并的特异性为89.0%(95%CI:88%~91%)。结论 ADA诊断结核性胸腔积液的敏感性和特异性可达85%以上,但不同文献报告的诊断临界值有所差异。