细菌与内源性N-亚硝酰胺合成的研究

目的：许多研究证实，萎缩性胃炎患者胃内细菌繁殖增多与Ｎ－亚硝酰胺含量升高有关。因此该实验模拟胃低酸情况下，胃内细菌催化Ｎ－亚硝酰胺合成情况及合成量为研究宗旨。方法：采用患者空腹胃液中经培养、分离、鉴定的１３种４６株细菌，以甲基脲（ＭＵ）及亚硝酸纳（ＮａＮＯ２）为底物加入活菌悬液在近中性条件下进行Ｎ－甲基－Ｎ－亚硝基脲（ＭＮＵ）催化合成反应，用ＨＰＬＣ－ＰＨＰＳ－ＴＥＡ法定量测定。结果：（ａ）ｐＨ分别为５，６，７时，１３株细菌催化ＭＮＵ合成能力以ｐＨ６时最高，占９２３％。（ｂ）ｐＨ６时，４６株细菌催化ＭＮＵ合成能力不同；经筛选阳性菌６株，其中金黄色葡萄球菌合成量最高。（ｃ）多株菌混合液催化实验，催化能力与混合菌中阳性菌个体所占比例有关，比例高合成能力强；阳性菌与阴性菌相混合不影响其催化合成能力。结论：胃内细菌具有催化强致癌物Ｎ－亚硝酰胺合成的能力，其合成量决定于胃液ｐＨ、阳性菌株浓度。

中国胃癌高发县鱼露的致突/致癌性研究

通过生物学短期试验和动物诱癌实验,我们研究了我国胃癌高发区福建长乐县(男性胃癌标化死亡率达113.20/10~5)鱼露的致突致癌作用。结果表明,鱼露经亚硝化后其乙酸乙酯萃取物具有明显的直接诱发S.typhimurum TA100回变、诱发V79细胞姐妹染色单体交换(SCE)和微核:诱发大肠杆菌PQ37SOS、使小牛胸腺DNA烷化的作用,并且能诱导人正常胃粘膜细胞DNA程序外合成(UDS),给新生Wistar大鼠灌胃后第四周和第十六周分别发现能诱发腺胃粘膜不典型增生(5/5)和腺胃癌(1/5);而未经亚硝化鱼露无此作用或作用很弱。进一步分析发现亚硝化鱼露中有N-亚硝酸胺(30,9-6.04μm),这类直接致灾致癌物的存在可能是亚硝化鱼露致突致癌作用的原因。长期食用鱼露可能与当地胃癌高发有关。

口腔念珠菌病患者唾液硝酸根分泌能力升高

目的了解唾液硝酸根和亚硝酸根在口腔感染防御上的作用。方法收集33例口腔念珠菌病患者及34名无口腔念珠菌病对照者的唾液，高效液相色谱法测定硝酸根、亚硝酸根含量，对其中10例患者治疗前后的唾液硝酸根、亚硝酸根含量进行比较，结果分别采用独立样本t检验或配对样本t检验（α=0．05）。结果腮腺液硝酸根的浓度和分泌速度：患者组为（49．70±0．50）mg／L和（27．71±0．50）μg／min，对照组为（21．51±0．60）mg／L和（12．55±0．60）μg／min；混合唾液硝酸根的浓度和分泌速度：患者组为（6．46±0．94）mg／L和（10．57±0．91）μg／min，对照组为（1．11±0．70）mg／L和（2．10±0．74）μg／min；混合唾液亚硝酸根的浓度和分泌速度：患者组为（8．48±0．58）mg／L和（13．914-0．55）μg／min，对照组为（3．39±0．53）mg／L和（6．42±0．58）μg／min。以上检测项目患者组与对照组比较差异均有统计学意义（t值分别为2．692、2．554、3．792、3．464、2．888、2．397，P值均〈0．05）。念珠菌病患者治愈后，其腮腺液及混合唾液硝酸根、业硝酸根水平均下降，其中腮腺液硝酸根的分泌速度治疗前后分别为（37．50±0．50）μg／min和（14．34±0．64）μg／min，混合唾液硝酸根的浓度和分泌速度治疗前后分别为（14．29±1．01）mg／L和（2．59±1．03）mg／L、（25．97±0．93）μg／min和（4．12±1．00）μg/min，以上三者治疗前后的改变差异有统计学意义（t值分别为3．142、3．475、3．922，P值均〈0．05）。结论口腔念珠菌病患者的唾液硝酸根和亚硝酸根水平均有明显升高，治疗后下降，这种变化呵能与机体的防御性反应有关。

变性高效液相色谱在分子生物学中的应用

变性高效液相色谱法 (DHPLC)是在高效液相色谱法的基础上发展起来的一种新方法。它因使用的温度不同而有不同的应用价值 :在非变性温度下进行双链DNA分离 ,在部分变性温度下进行基因突变、单核苷酸多态性和甲基化测定 ,在完全变性温度下对寡核苷酸进行质控和纯化等。由于该技术具有快速、经济、准确和自动化程度高等特点 ,目前已经成为分子生物学常用技术之一。

CpG岛甲基化检测技术比较

Cp G岛过甲基化所致基因去表达是主要的表遗传学 (epigenetics)改变之一 ,是一种在突变、缺失、异位等序列变异之外的非序列性变化。这种表遗传异常不仅与复制延迟、染色体压缩、转录抑制密切相关 ,而且与疾病的易感性、发生发展、预后和转归均有密切关系。很多肿瘤发生都涉及到基因组甲基化的改变 ,包括抑癌基因的高甲基化和原癌基因的去甲基化。因此 ,检测甲基化的相关技术也随着甲基化研究的深入而不断推陈出新。简便高效快捷检测方法的出现极大地提高了工作效率 ,关键性 Cp